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蔓越橘生物活性物質(zhì)和有機(jī)酸測(cè)定及分析研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-07 05:20
【摘要】:蔓越橘(Vacinium macrocarpon,cranberry)是一種抗寒能力極強(qiáng),適于生長(zhǎng)在弱酸環(huán)境中的可食用小漿果,具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。實(shí)驗(yàn)以吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)漿果園12個(gè)品種的蔓越橘為試材,通過對(duì)‘Bergmen’的單因素實(shí)驗(yàn),優(yōu)化了蔓越橘生物活性物質(zhì)的提取工藝,測(cè)定了蔓越橘果實(shí)酚類物質(zhì)、萜類物質(zhì)、有機(jī)酸等生物活性物質(zhì)的含量,以期為評(píng)價(jià)不同蔓越橘種質(zhì)資源的生理活性提供理論數(shù)據(jù),為蔓越橘生物活性物質(zhì)研究及其開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下:1以栽培品種‘Bergmen’為樣本,經(jīng)單因素及響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)分析,蔓越橘總多酚提取最佳工藝條件為:乙醇濃度:49%;提取時(shí)間:14 min;料液比:1:15(W:V);提取溫度:51.5℃。在此條件下蔓越橘總多酚提取含量為:447.29±12.03 mg/100g。2不同品種蔓越橘花色苷等生物活性物質(zhì)以及p H等理化成分呈現(xiàn)明顯的多樣性;就生物活性物質(zhì)的含量而言,‘Bain Favourite No.1’的總多酚含量(1449.54 mg/100g)以及原花青素含量(4006 mg/100g)最高,‘Washington’的總黃酮含量(644.34 mg/100g)和花色苷的含量(29.11 mg/100g)最高,就主要理化成分而言,‘Bain Favourite No.1’口感佳,是適宜鮮食和加工的優(yōu)良品種。3蔓越橘中酚類物質(zhì)種類很多,包括本試驗(yàn)檢測(cè)出的蘆丁、綠原酸、阿魏酸和咖啡酸。在已測(cè)的12個(gè)品種中,蔓越橘含量較高的酚類物質(zhì)為蘆丁,平均值為143.43 mg/100g;含量最低的為阿魏酸,平均值為8.91 mg/100g,。在已測(cè)的12個(gè)品種中,蘆丁含量最高的是‘Bain 11’,為277.30 mg/100g;綠原酸含量最高的是‘Mathewes’;阿魏酸和咖啡酸含量最高的均是‘Bergmen’4蔓越橘果實(shí)中含有萜類物質(zhì),包括熊果酸和齊墩果酸。在已測(cè)的12個(gè)品種中,果實(shí)中熊果酸的含量平均值249.19 mg/100g高于齊墩果酸含量;‘Washington’的萜類物質(zhì)的含量最高;‘Bain 11’的萜類物質(zhì)含量最低。5實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的12個(gè)品種的蔓越橘共檢測(cè)出草酸、奎尼酸、蘋果酸、抗壞血酸、檸檬酸和馬來酸等6中有機(jī)酸。其中檸檬酸含量最高,平均值為5508.46 mg/100g,占總酸含量的41.6%,其次是奎尼酸,平均值為5088.97 mg/100g,然后是蘋果酸,含量平均值為1998.51 mg/100g,其他酸含量較低;蔓越橘果實(shí)中有機(jī)酸含量從綠果期到紅果期有機(jī)酸含量均有減少,而轉(zhuǎn)色期變化略有不同。
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S663.9
【圖文】:

花青素,基本結(jié)構(gòu)


青素的抗氧化活性研究主要是針對(duì)于花青素抑制、促進(jìn)脂代謝良性循環(huán)的影響、降血脂、消炎抑菌提取和定量方法已經(jīng)較為成熟;ㄇ嗨仡惢衔颱ltraviolet-Visible absorption spectrometry, UV-Vi)、薄層層析法(Thin layer chromatography,TL liquid chromatography,HPLC)、質(zhì)譜分析法(MasNuclear magnetic resonance,NMR)、毛細(xì)管區(qū)帶esis,PCE)、紅外光譜法(Infrares spectroscopy,IR)IR)以及多種分析技術(shù)聯(lián)用[32]。研究表明,通過量方法的比較,建議花青素的定量方法應(yīng)使用液素的顏色可隨著季節(jié)的變化以及細(xì)胞液的酸堿產(chǎn)因?yàn)槠淙〈幌嗤琜33],植物中存在的花青素色、矢車菊色素(Cyanindin)呈紅色、飛燕草色onidin)呈紅色、牽牛花色素(Petunidin)呈紫色、青素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)如表 1 所示。

原花青素,單體結(jié)構(gòu)


圖 2 原花青素主要單體結(jié)構(gòu)Fig. 2 The structure of proanthocyanidins main monomers(注:A (-)-兒茶素 B (+)-表兒茶素 C (-)-兒茶素 D (+)-表兒茶素)(Note:A(-)-catechin, B(+)-epicatechin, C (-)-catechin, D(+)-epicatechin)于原花青素易溶于 50℃以上的熱水以及 30 %的乙醇中,因此,對(duì)原花青素先進(jìn)行脫油脂,再采用適當(dāng)濃度的乙醇進(jìn)行萃取,過濾后回收有機(jī)溶劑,最現(xiàn)在還有一些比較新興的方法如:超臨界流體萃取法(Supercritical fluid ex、 微 波 萃 取 法 ( Microwave extraction , ME ) 以 及 雙 水 相 萃eous two-phase extraction,ATPE)等[35]。 酚酸酸是一類含有酚環(huán)的有機(jī)酸,它是多酚類物質(zhì)的一種,在許多植物中都可以一定的殺菌功能[39]。自然界發(fā)現(xiàn)的酚酸類化合物主要是以以下三類酚酸為母成:苯甲酸(Benzoic acid)(C6-C1 型)、苯乙酸(Phenylacetic acid)(C丙酸(Phenylpropionic acid)(C6-C3 型)[40](圖 3)。

氣相色譜,酚酸類化合物,母核,結(jié)構(gòu)示意圖


A B C圖 3 酚酸類化合物母核結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 3 The schematic diagram of Phenolic compounds nucleus structure(注:A 苯甲酸,B 苯乙酸,C 苯丙烯酸)(Note:ABenzoic acid, B Phenylacetic acid, C Phenylpropionic acid)目前酚酸的測(cè)定方法包括 PC、TLC、HPLC、氣相色譜(Gas Chromatography,GC)等[44]!耙粶y(cè)多評(píng)” (Quantitative analysis of ulti-components by single-marker,QAMS)法是指利用中藥有效成分內(nèi)在函數(shù)關(guān)系和比例關(guān)系,只測(cè)定需要檢測(cè)的一個(gè)成分(對(duì)照品可得到者)實(shí)現(xiàn)多個(gè)需檢測(cè)的成分(對(duì)照品難以得到或難供應(yīng))的同步測(cè)定,利用高效液相色譜檢測(cè),并采用“一測(cè)多評(píng)”法測(cè)定丹參粉酸類成分的含量,結(jié)果表明,高效液相色譜法測(cè)定準(zhǔn)確、快速,且“一測(cè)多評(píng)”法是一種易操作、低成本的一種測(cè)量丹參酚酸類成分的方法[45]。有研究發(fā)現(xiàn),HPLC 法可作為柑橘中酚酸和類黃酮同時(shí)快速檢測(cè)的常規(guī)分析方法,方法的精密性和重復(fù)性都很好,19 種酚酸的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(Relative standard deviation,RSD)分別小于 4.97 %和 3.35 %[46]。1.2.1.4 黃酮醇

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