【摘要】：本試驗(yàn)以不同萱草屬植物種子、未受精子房、葉片、花葶等器官為外植體分別構(gòu)建了適宜的快繁體系,對(duì)不同倍性萱草屬植物種間雜種進(jìn)行了胚拯救及早期鑒定的研究。試驗(yàn)結(jié)果如下:(1)采用普通播種方式,'茄子花1號(hào)'的種子經(jīng)培養(yǎng)箱催芽播種,種子集中于第5d到第12d露白,總共歷時(shí)8d,發(fā)芽率為64.00%,萌發(fā)種子成苗率為81.25%。采用無(wú)菌播種方式,適宜的預(yù)處理方式為蒸餾水浸泡24 h后剝?nèi)シN皮,露出白色胚乳;適宜的消毒方式為70%乙醇30 s+0.1%升汞5 min;種子露白集中于第3d到第7 d,總共歷時(shí)5d,發(fā)芽率為78.00%。與普通播種方式相比,無(wú)菌播種方式縮短了種子發(fā)芽時(shí)間,且種子在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快。(2)'茄子花1號(hào)'未受精子房適宜的消毒方式為70%乙醇30 s+5%次氯酸鈉3 min,污染率為2.00%;愈傷組織和不定芽誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基為MS +3%蔗糖+2.0 mg/L 6-BA+0.5mg/LNAA,誘導(dǎo)率為54.00%,不定芽繁殖系數(shù)為0.86。用上述培養(yǎng)基對(duì)133份不同萱草屬植物未受精子房進(jìn)行培養(yǎng),其中有91份材料誘導(dǎo)出愈傷組織,誘導(dǎo)率在6.25%-71.43%之間;有48份材料誘導(dǎo)出不定芽,繁殖系數(shù)介于0.33-4.00。由此可見(jiàn),萱草屬植物不同材料未受精子房所適用的培養(yǎng)基有所差異,實(shí)際應(yīng)用中要針對(duì)每個(gè)品種篩選合適的培養(yǎng)基進(jìn)行子房外植體快繁。(3)'茄子花1號(hào)'組培苗葉片在兩種不同激素組合的MS+3%蔗糖培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出了愈傷組織,兩種不同激素組合中6-BA與2,4-D配比分別為0.5mg/L+2.0mg/L和1.0 mg/L+5.0 mg/L,誘導(dǎo)愈傷組織所需時(shí)間分別為40 d和110 d左右。采用未受精子房適宜的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,組培苗葉片不定芽繁殖系數(shù)達(dá)65。(4)'沖里花1號(hào)' 20 cm高花葶外植體適宜的消毒方式為70%乙醇30 s+0.1%升汞8 min;愈傷組織的適宜誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+3%蔗糖+2.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA,誘導(dǎo)率為40.00%,采用未受精子房適宜的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,花葶不定芽繁殖系數(shù)為2.65。對(duì)20 cm花葶進(jìn)行分段誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)現(xiàn),花葶上、中、下三部分的愈傷組織誘導(dǎo)率依次降低。在花葶不同發(fā)育階段采集'沖里花1號(hào)' 10cm、20cm、30cm、40cm和60 cm高度的花葶誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)率隨采集高度升高而降低。(5)誘導(dǎo)以上各類外植體不定芽生根的適宜培養(yǎng)基為:MS+3%蔗糖+0.25 mg/L NAA,生根率達(dá)100%。(6)在 MS+9%蔗糖+0.10mg/L6-BA+0.01mg/LNAA 培養(yǎng)基上,'宿遷 1 號(hào)'(2 n=3 x=33)♀×'東莊黃花'(2 n=2 x=22)雜交組合胚齡6 d的雜種胚珠誘導(dǎo)出1個(gè)愈傷組織,接種到前期篩選的不定芽和生根培養(yǎng)基上得到6株雜種苗。'宿遷3號(hào)'(2 n=3x=33)♀× '東莊黃花'(2n=2 x=22)♂雜交組合胚齡6d和7d的雜種胚珠發(fā)育成種子,種子為正常種子大小的一半。對(duì)6株雜種苗進(jìn)行EST-SSR鑒定,發(fā)現(xiàn)雜種苗帶型均不同于母本,可見(jiàn)雜種苗均不是由珠被發(fā)育而來(lái),可能是由雜種胚發(fā)育而來(lái)。
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S682.19
【圖文】：

圖４不同消毒方式對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響逡逑Ｆｉｇ．４邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ邋ｍｅｔｈｏｄｓ邋ｏｎ邋ｃａｌｌｕｓ邋ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ逡逑Ｄｌ：次氯酸鈉消毒，莖段有變白現(xiàn)象；Ｄ２：次氯酸鈉消毒，莖段兩頭開(kāi)裂，愈傷極少；Ｄ３：逡逑０．１％升汞消毒，莖段變粗伸長(zhǎng)，兩端長(zhǎng)愈傷組織逡逑Ｄ１：邋ＮａＣＩＯ邋ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，邋ｓｔｅｍｓ邋ｈａｖｅ邋ｗｈｉｔｅｎｉｎｇ邋ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ邋；Ｄ２：邋ＮａＣＩＯ邋ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，邋ｓｔｅｍ邋ｔｗｏ邋ｅｎｄｓ逡逑ｃｒａｃｋ邋ｗｉｔｈ邋ｆｅｗ邋ｃａｌｌｕｓ；邋Ｄ３：邋０．１％邋ＨｇＣｌ２邋ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，邋ｓｔｅｍ邋ｔｈｉｃｋｅｒ邋ａｎｄ邋ｅｌｏｎｇｅｒ，邋ｇｒｅｗ邋ｃａｌｌｕｓ邋ｂｏｔｈ邋ｔｗｏ邋ｅｎｄｓ逡逑

ｏ＿Ｌ＿Ｊ逡逑圖６雜種胚拯救培養(yǎng)過(guò)程逡逑Ｆｉｇ．６邋Ｈｙｂｒｉｄ邋ｅｍｂｒｙｏ邋ｒｅｓｃｕｅ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邋ｐｒｏｃｅｓｓ逡逑ＦＩ：剛接種；Ｆ２：發(fā)育成種子；Ｆ３：誘導(dǎo)出愈傷組織；Ｆ４：愈傷增殖；Ｆ５：長(zhǎng)成植株逡逑Ｆ１：邋ｊｕｓｔ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ；Ｆ２：邋ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ邋ｉｎｔｏ邋ｓｅｅｄｓ邋；Ｆ３：邋ｉｎｄｕｃｅｄ邋ｃａｌｌｕｓ邋；Ｆ４：邋ｃａｌｌｕｓ邋ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ邋；Ｆ５：邋ｇｒｅｗ邋ｉｎｔｏ逡逑ｐｌａｎｔｓ逡逑

圖６雜種胚拯救培養(yǎng)過(guò)程逡逑Ｆｉｇ．６邋Ｈｙｂｒｉｄ邋ｅｍｂｒｙｏ邋ｒｅｓｃｕｅ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邋ｐｒｏｃｅｓｓ逡逑ＦＩ：剛接種；Ｆ２：發(fā)育成種子；Ｆ３：誘導(dǎo)出愈傷組織；Ｆ４：愈傷增殖；Ｆ５：長(zhǎng)成植株逡逑Ｆ１：邋ｊｕｓｔ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ；Ｆ２：邋ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ邋ｉｎｔｏ邋ｓｅｅｄｓ邋；Ｆ３：邋ｉｎｄｕｃｅｄ邋ｃａｌｌｕｓ邋；Ｆ４：邋ｃａｌｌｕｓ邋ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ邋；Ｆ５：邋ｇｒｅｗ邋ｉｎｔｏ逡逑ｐｌａｎｔｓ逡逑

本文編號(hào)：2780936