【摘要】：百合科萱草屬花卉以其植株強(qiáng)健且花型碩大、色澤鮮艷,葉形優(yōu)雅、葉姿挺拔等特點(diǎn),被園林工作者認(rèn)為是優(yōu)秀的園林地被和庭院觀賞植物之一。我國(guó)萱草屬野生種質(zhì)資源極為多樣,但長(zhǎng)期的自然、人工雜交造成我國(guó)現(xiàn)有萱草品種雜交起源相近、遺傳背景復(fù)雜,一定程度上給育種工作帶來(lái)難題。因此,近些年我國(guó)研究學(xué)者積極收集國(guó)內(nèi)優(yōu)良的種質(zhì)資源,并引進(jìn)諸多國(guó)外品質(zhì)精良的萱草新品種開(kāi)展繁育研究。本研究以祁東新發(fā)食品有限公司培育的晚花新品種“新發(fā)中秋花”萱草作為研究對(duì)象,針對(duì)取材時(shí)間不同選取不同部位,以萱草花蕾、花梗上部、心葉及莖段等不同部位作為外植體采用不同的滅菌方式,利用調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)劑的方法開(kāi)展啟動(dòng)、增殖培養(yǎng)環(huán)節(jié),以獲得優(yōu)質(zhì)的愈傷組織及不定芽,并對(duì)誘導(dǎo)出的愈傷組織進(jìn)行再分化,對(duì)直接、間接不定芽進(jìn)行繼代增殖,實(shí)驗(yàn)后期進(jìn)行生根培養(yǎng)以及煉苗移栽等培養(yǎng)環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)旨在尋找建立“新發(fā)中秋花”萱草材料離體快速繁殖體系的正確方法,為其在園林市場(chǎng)應(yīng)用奠定工廠化大規(guī)模生產(chǎn)育苗基礎(chǔ)、為萱草新品種深度育種研究提供技術(shù)支撐。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)綜合考慮外植體污染率、死亡率的高低以及消毒條件的難易程度,認(rèn)為“新發(fā)中秋花”萱草組織培養(yǎng)最適宜的外植體為幼嫩花梗分蘗的結(jié)節(jié)處,取材時(shí)期為八月中上旬即植株抽蕾期,可有效獲得無(wú)菌幼苗,外植體可在兩周左右萌芽、一個(gè)月形成愈傷組織,較大程度上縮短了獲得無(wú)菌幼苗的時(shí)間。以幼嫩花梗、心葉及子房為實(shí)驗(yàn)材料,最佳的滅菌方案為C2處理:70%酒精(C_2H_5OH)30s+0.1%升汞(HgCl_2)10min(添加適量的吐溫-80);以莖段為實(shí)驗(yàn)材料,最佳滅菌方案為C9處理:70%酒精(C_2H_5OH)30s+0.1%升汞(HgCl_2)(添加適量的吐溫-80)12min+2%次氯酸鈉(NaClO)4min。(2)通過(guò)對(duì)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在“新發(fā)中秋花”萱草品種的啟動(dòng)培養(yǎng)誘導(dǎo)中啟動(dòng)率的影響結(jié)果分析得出P7處理:MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.1mg/L,對(duì)“新發(fā)中秋花”品種外植體進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)、萌芽和促進(jìn)后期外植體植株形態(tài)塑造均有較好的效果。因此,該處理為此萱草品種花梗、子房及莖段部位組織培養(yǎng)的最佳啟動(dòng)培養(yǎng)基。心葉部位外植體最適宜啟動(dòng)培養(yǎng)為EP處理:SH+L-脯氨酸(C_5H_9NO_2)0.3g/L+瓊脂糖(AG)4g/L+2,4-D 3.0mg/L+TDZ 0.5mg/L+肌醇100mg/L+蔗糖30g/L。通過(guò)觀察10個(gè)處理下增殖培養(yǎng)植株的增殖率和增殖系數(shù),分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)適宜濃度的植物生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素合理搭配可以有效的促進(jìn)植物后期的形態(tài)塑造,提高組培苗的增殖系數(shù),獲取更多長(zhǎng)勢(shì)健康植株優(yōu)良的組培苗。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)論證得出,Q7處理:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L為“新發(fā)中秋花”萱草的最佳增殖培養(yǎng)基。(3)生根培養(yǎng)階段Z6處理生根時(shí)間較早,根系為黃綠色長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)良,呈放射狀生長(zhǎng),綜合多方面考慮Z6處理:1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L最為適合“新發(fā)中秋花”萱草進(jìn)行生根培養(yǎng)。若想縮短生根時(shí)間,不計(jì)生產(chǎn)成本可以先使用1/2MS+NAA0.2mg/L進(jìn)行7d生根培養(yǎng),后接入1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA 0.1mg/L培養(yǎng)基中。兩種處理方式在組培苗的長(zhǎng)勢(shì)及生長(zhǎng)速度上有差異,在生根率與移栽成活率上無(wú)顯著差異。長(zhǎng)勢(shì)正常的組培苗單株苗根數(shù)在4-6條,培育20d后根系穩(wěn)定,長(zhǎng)度超過(guò)3cm時(shí),在正常管理情況下移栽到多種基質(zhì)中組培苗均可成活。(4)大多數(shù)萱草材料進(jìn)行移栽時(shí)煉苗時(shí)間不超過(guò)2d最為合適,“新發(fā)中秋花”萱草適宜煉苗天數(shù)為1d,煉苗后植株后期生長(zhǎng)良好。經(jīng)過(guò)分析,最適宜“新發(fā)中秋花”萱草的栽培基質(zhì)為(2)處理,即V(園土):V(蛭石)=1:1的混合基質(zhì),處理基質(zhì)簡(jiǎn)單,植株生長(zhǎng)良好。在移栽前還需對(duì)栽培基質(zhì)進(jìn)行高溫高壓滅菌處理以減少土壤中的細(xì)菌、病菌,在此基礎(chǔ)上“新發(fā)中秋花”萱草組培煉苗移栽后成活率可達(dá)100%,多種基質(zhì)下長(zhǎng)勢(shì)均良好。
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S682.19
【圖文】：

圖 2-1(A-D) 預(yù)處理萱草外植體A: 待取莖段材料；B: 心葉；C: 幼嫩“Y”型花梗；D：幼蕾Fig.2-1 (A-D) Pretreatment day lily explant.（1）前期材料預(yù)處理：將摘取的外植體材料用洗衣粉水進(jìn)行沖洗，約 20min 左右用小試管刷輕輕刷洗表面絨毛，用較舒緩水流反復(fù)沖洗 5min，最后用無(wú)菌水沖洗。為保持材料細(xì)胞活性，在實(shí)驗(yàn)前夕先將材料放入盛有少量無(wú)菌水的燒杯中浸泡要進(jìn)行消毒時(shí)，拿進(jìn)組培室放置于超凈工作臺(tái)上，用消毒過(guò)的試紙吸去多余水分備進(jìn)行外植體消毒工作。（2）外植體準(zhǔn)備：將花梗剪切成約 2.0cm-2.5cm 小段，在花梗分節(jié)點(diǎn)兩端各留出.0cm 左右長(zhǎng)度花梗，以便消毒后剪切出新傷口。消毒時(shí)先不切開(kāi)花苞，待消毒完畢離取出潔凈的子房外植體。待取莖段材料只留環(huán)狀生長(zhǎng)點(diǎn)部位，挖除發(fā)黑變褐的，減少污染。（3） 外植體滅菌操作：將準(zhǔn)備完畢的外植體用無(wú)菌水沖洗 1-2 次后，用 70%酒

表 3-1 不同的滅菌處理對(duì)外植體接種的影響Tab.3-1 Influence of different Sterilization programmes for explant inoculation處理方案 接種/個(gè) 花梗污染率% 花梗死亡率% 莖段污染率% 莖段死Treatment scheme Number Pedicel of pollution Pedicel of death Root of pollution Root oC1 30 83.33 0 100 0C2 30 34.44 0 76.66 0C3 30 17.54 85.44 46.67 0C4 30 34.22 46.33 95.56 0C5 30 22.22 65.56 81.11 0C6 30 0 100 47.78 26C7 30 24.33 33.33 62.22 0C8C9303013.22053.2210037.7827.4500

表 3-1 不同的滅菌處理對(duì)外植體接種的影響Tab.3-1 Influence of different Sterilization programmes for explant inoculation處理方案 接種/個(gè) 花梗污染率% 花梗死亡率% 莖段污染率% 莖段死Treatment scheme Number Pedicel of pollution Pedicel of death Root of pollution Root oC1 30 83.33 0 100 0C2 30 34.44 0 76.66 0C3 30 17.54 85.44 46.67 0C4 30 34.22 46.33 95.56 0C5 30 22.22 65.56 81.11 0C6 30 0 100 47.78 26C7 30 24.33 33.33 62.22 0C8C9303013.22053.2210037.7827.4500

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本文編號(hào)：2770320