【摘要】：十二卷屬(Haworthia)植物是一類具有極佳觀賞價(jià)值和極高經(jīng)濟(jì)效益的小型多肉植物,但是由于其生長緩慢且自然繁殖率低,因此,采用組織培養(yǎng)技術(shù)對十二卷屬植物進(jìn)行繁育具有重要意義。本研究以'金子'萬象(Haworthia maughanii'Gold')、'奈良' 玉扇(Haworthia trunceat 'Nara')、'阿房宮'壽(Haworthia comptoniana'Aboukyuu')和 'OB-1 ' 玉露(Haworthia cooperi 'OB-1')這 4 種十二卷屬植物為供試材料進(jìn)行組織培養(yǎng)研究,構(gòu)建再生體系。并在此基礎(chǔ)上,利用甲基磺酸乙酯(EMS)誘導(dǎo)斑錦變異植株,利用秋水仙素誘導(dǎo)多倍體植株。主要研究結(jié)果如下:1、無菌播種。用2%NaClO溶液浸泡' OB-1'玉露種子20min時(shí),污染率(5.60%)顯著低于其他處理,發(fā)芽率(71.2%)介于其他兩組處理之間,最終成活率(62.40%)顯著高于其他處理。2、愈傷組織的誘導(dǎo)。對4種十二卷屬植物的葉片薄層進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo),研究發(fā)現(xiàn)黑暗條件下的誘導(dǎo)率顯著高于光照條件。'金子'萬象和'阿房宮'壽誘導(dǎo)愈傷組織的激素最優(yōu)配比均為6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L,'奈良'玉扇的激素最優(yōu)配比為6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT1.0mg/L,'OB-1'玉露的激素最優(yōu)配比為 6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L。對'阿房宮'壽和'OB-1'玉露的葉塊進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo),'阿房宮'壽的激素最優(yōu)配比為6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L,'OB-1'玉露的激素最優(yōu)配比為6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。通過對'阿房宮'壽和'OB-1'玉露葉片愈傷組織的誘導(dǎo),發(fā)現(xiàn)不同部位的誘導(dǎo)率由高到低均為:葉基中間葉塊中間薄層葉窗。3、不定芽的分化。'金子'萬象愈傷組織的最佳分化培養(yǎng)基配方為MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L,此時(shí)的分化率為71.67%,顯著高于其他處理。在此培養(yǎng)基配方中,'奈良'玉扇、'阿房宮'壽和'OB-1'玉露均能正常分化產(chǎn)生不定芽,分化率在50%以上。4、生根和移栽。'金子' 萬象不定芽的最佳生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+AC1.0g/L+NAA0.2mg/L,此時(shí)的生根率為98.61%,平均生根數(shù)為3.69條,平均根長為2.32cm,均顯著高于其他處理。在此培養(yǎng)基配方中,'奈良'玉扇、'阿房宮'壽和'OB-1'玉露均能正常生根,平均生根率均在90%以上。移栽后,4種十二卷在赤玉土:蛭石=1:1栽培基質(zhì)中成活率(95%)均最高。5、EMS誘變育種研究。'阿房宮'壽愈傷組織存活率和分化率隨濃度和時(shí)間的增大而降低,且濃度和時(shí)間對存活率和分化率均有極顯著影響。其中0.4%EMS+2h為最佳誘變處理,共計(jì)得到15株斑錦變異植株。利用該處理對4種十二卷的愈傷組織進(jìn)行大量誘變,其中'阿房宮'壽和'金子'萬象共計(jì)得到29株斑錦變異植株,帶錦的玉露葉片和帶錦的玉扇葉片共計(jì)得到78株斑錦變異植株。6、多倍體育種研究。通過4種方式對'金子'萬象進(jìn)行秋水仙素誘導(dǎo),其中愈傷組織浸泡法得到1 18株多倍體,愈傷組織混培法得到12株多倍體,葉片浸泡法未得到多倍體植株,葉片混培法得到11株多倍體。對'金子'萬象多倍體進(jìn)行形態(tài)、氣孔和染色體觀測發(fā)現(xiàn),多倍體在株高冠幅比和葉窗面積上與二倍體具有顯著差異,且其下表皮氣孔變大,密度減小,四倍體染色體數(shù)目為2n=4x=28。
【學(xué)位授予單位】：北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S682.33
【圖文】：

十二卷屬再生體系的建立％，污染率顯著低于對照，發(fā)芽率與對照無顯著差異，顯著低于處理２０ｍｉｎ；ＮａＣ１０溶液浸種２０ｒｍｎ時(shí)，污染７１．２％）居中，成活率（６２．４％）顯著高于其他兩組；Ｎ污染率雖與２０ｍｉｎ無顯著差異，但發(fā)芽率（５９．２％）顯率也最低。逡逑表２－１邋ＮａＣＩＯ滅菌時(shí)間對種子萌發(fā)生長的影響逡逑２－１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ＮａＣＩＯ邋ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ邋ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋ｓｅｅｄ邋ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ邋ａｎｄ邋ｇｒｏ邐污染率（％）邐發(fā)芽率（％）邐成１００．０±０．００ａ邐８０．０±３．１６ａ１３．６０±２．１９ｂ邐８１．６０邋士邋４．５６ａ邐４５．６０邋土邋２．１９ｃ邐７１．２０邋土邋１．７９ｂ邐６７．２０邋士邋３．３５ｃ邐５９．２０土邋３．３５ｃ邐４值＋標(biāo)準(zhǔn)差，同列不同字母表示在ｐ＝０．０５水平上存在顯著差

２．２．２．１２比較葉片不同部位對‘ＯＢ－１’玉露誘導(dǎo)愈傷組織的影響逡逑在９種組合中，選擇較適宜的培養(yǎng)基配方ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ進(jìn)逡逑行葉片不同部位愈傷組織的誘導(dǎo)（圖２－２）。試驗(yàn)結(jié)果見表２－２３。逡逑［＾逡逑圖２－２邋‘ＯＢ－丨’玉露葉片不同部位逡逑Ｆｉｇｕｒｅ２－２邋Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐａｒｔｓ邋ｏｆ邋Ｈ．邋ｃｏｏｐｅｒｉ邋‘ＯＢ－１邋’邋ｌｅａｖｅｓ逡逑注：Ａ：葉基；Ｂ：中間薄層；Ｃ：中間葉塊；Ｄ：葉窗逡逑由表２－２３可知，‘ＯＢ－１邋’玉露葉片基部的愈傷組織誘導(dǎo)率最高，高達(dá)９８．３３％，逡逑其次是葉塊，為９３．３３％，兩者之間無顯著差異。中間薄層有大部分薄片失活，誘逡逑導(dǎo)率僅為３０．００％，顯著低于葉片基部和中間葉塊。相較于‘阿房宮’壽的中間薄逡逑層誘導(dǎo)率８６．６７％，說明此玉露更不適合用薄層誘導(dǎo)。葉片頂部的窗結(jié)構(gòu)極難進(jìn)行逡逑２０逡逑ｋ逡逑

由表２－３２可知，四種十二卷均能夠正常生根，生根率均在９０％以上，說明此逡逑培養(yǎng)基具有－定適普性。至此，四種十二卷都建立了快繁體系，‘金子’萬象離體逡逑快繁的幾個(gè)階段圖示如下（圖２－３）。逡逑圖２－３邋‘金子’萬象離體快繁的幾個(gè)階段逡逑ｌ＇邋ｉｇｕｒｅ２－３邋Ｓｅｖｅｒａｌ邋ｓｔａｇｅｓ邋ｏｎ邋ｔｉｓｓｕｅ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邋ｏｉ邋Ｈｃｒｗｏｒｔｈｉａ邋ｍａｕｇｈａｎｉｉ逡逑注：Ａ：誘導(dǎo)出愈傷組織；Ｂ：誘導(dǎo)出不定芽；Ｃ：生根培養(yǎng)；Ｄ：生根培養(yǎng)根部逡逑２．４．２．４十二卷屬四種材料組培苗的移栽逡逑將生根后的四種十二卷轉(zhuǎn)接到三種基質(zhì)中，３０ｄ后，統(tǒng)計(jì)成活率，見表２－３３。逡逑四種十二卷在赤玉土邋：蛭石＝１：邋１栽培基質(zhì)中，成活率均最高；‘金子’萬象和‘０Ｂ－１’逡逑玉露成活率高達(dá)９９．１７％和９７．５％，顯著高于其他兩個(gè)處理；‘奈良’玉扇和‘阿房逡逑宮’壽成活率為％．６７％和９８．３３％。逡逑表２－３３四種十二卷的移栽逡逑Ｔａｂｌｅ２－３３邋Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ邋0［＇Ｈａｗｏｒｔｈｉａ逡逑基質(zhì)配方邐‘金子’萬象邋‘奈良’玉扇邋‘阿房宮＇壽￣玉露逡逑赤玉土：蛭石＝丨：Ｉ邐９９．１７±２．０４ａ邐９６．６７±４．０８ａ邐９８．３３±２．５８ａ邐９７．５（）±４．１８ａ逡逑蛭石：泥炭＝１：邋１邐９５．００±３．１６ｂ邐９５．００±３．１６ａ邐９５．００±３．１６ａ邐９１．６７±２．５８ｂ逡逑赤玉土邋：泥炭＝１：邋１邐８９．１７±５．８５ｃ邐８９．１７±５．８５ｈ邐８８．３３±６．０６ｂ邐８８．３３±２．５８ｂ逡逑由表２－３４可知

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本文編號：2755485