【摘要】：柑橘砂皮病是柑橘上的主要病害之一,通常在樹體受傷或樹勢差時(shí)發(fā)生,特別是遭受凍害時(shí)最容易侵染葉片。受害后在表面形成砂粒狀麻點(diǎn),嚴(yán)重影響果實(shí)外觀,使其果實(shí)商品價(jià)值下降。本文通過對(duì)湖南省不同來源的柑橘砂皮病進(jìn)行研究,分離柑橘砂皮病的病原菌,觀察致病菌的生物學(xué)特性,同時(shí)進(jìn)行防治藥劑的室內(nèi)抑菌效果測定,為柑橘砂皮病的綜合防治提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.根據(jù)分離菌株的形態(tài)特征,結(jié)合分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)所分離的柑橘砂皮病菌株進(jìn)行鑒定,一共得到27株柑橘砂皮病菌株(Diaporthe citri),利用常規(guī)菌種保存方法對(duì)其進(jìn)行保存。2.通過對(duì)6株具有代表性的柑橘砂皮病菌株的生物學(xué)特性比較研究。結(jié)果表明:6株柑橘砂皮病菌株均在V8果蔬培養(yǎng)基和燕麥培養(yǎng)基生長最佳,在10~35℃這個(gè)溫度范圍內(nèi)均生長,菌絲生長的最佳溫度范圍是26℃~30℃,致死溫度40℃。菌株在3~12這個(gè)pH值范圍均生長,最適pH值6~9,6株菌株在酸性條件及堿性條件下致死pH分別是2、13,光暗交替對(duì)菌株生長影響明顯,菌株對(duì)有機(jī)氮源蛋白胨、酵母以及牛肉膏利用效果最好。有機(jī)碳源蔗糖對(duì)菌株生長影響明顯。3.根據(jù)菌絲生長速率法,檢測了代森錳鋅、苯醚甲環(huán)唑、乙鋁·錳、多菌靈、咪鮮胺等5種殺菌劑對(duì)柑橘砂皮病菌的毒力,結(jié)果表明,本實(shí)驗(yàn)所用的5種殺菌劑均對(duì)柑橘砂皮病菌的菌絲有著抑制作用。5種殺菌劑根據(jù)抑菌作用的強(qiáng)到弱,依次為:咪鮮胺苯醚甲環(huán)唑多菌靈乙鋁·錳鋅代森錳鋅,其中25%咪鮮胺對(duì)柑橘砂皮病菌的毒力最高,EC50值是0.099μg/mL。4.通過PCR技術(shù)擴(kuò)增了27株柑橘砂皮病菌株的ITS及β-tubulin片段,并測序。將所得序列與Genbank中下載的相關(guān)序列進(jìn)行比對(duì),通過分子生物學(xué)軟件MEGA 5.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果表明:不同柑橘砂皮致病菌菌株之間存在著遺傳多樣性差異,但這種差異與菌株的來源沒有明顯相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S436.66
【圖文】：

3.1.1 分離的柑橘砂皮病菌株統(tǒng)計(jì)表 2-2 柑橘砂皮的分離結(jié)果Table 2-2 The isolates of Diaporthe criti from different place of Hunan province菌株編號(hào) 寄主來源 采集地點(diǎn) 采集時(shí)間 菌株編號(hào) 寄主來源 采集地點(diǎn) 采集時(shí)間HLXQG 臍橙 回龍圩 2014 年 XNMG 蜜橘 新寧 2015 年HLXXG 夏橙 回龍圩 2014 年 XNPG i*柑葉片 新寧 2015 年HLXPY i*柑葉片 回龍圩 2014 年 MYXY 夏橙葉片 麻陽 2015 年HLXYG 柚子 回龍圩 2014 年 MYBG 冰糖橘 麻陽 2015 年HLXBG 冰糖橘 回龍圩 2014 年 TDPG i*柑 通道 2015 年SMBG 冰糖橘 石門 2014 年 TDMG 蜜橘 通道 2015 年SMMG 蜜橘 石門 2014 年 HJXG 夏橙 洪江 2015 年JYXG 夏橙 江永 2015 年 HJBG 冰糖橘 洪江 2015 年JYMG 蜜橘 江永 2015 年 ARMG 蜜橘 安仁 2016 年JYBG 冰糖橘 江永 2015 年 LYPG i*柑 耒陽 2016 年YZQG 臍橙 宜章 2015 年 YXBG 冰糖橘 永興 2016 年YZXG 夏橙 宜章 2015 年 LXPY i*柑葉片 瀘溪 2016 年YZPG i*柑 宜章 2015 年 LHQG 臍橙 隆回 2016 年YZBG 冰糖橘 宜章 2015 年3.1.2 分離菌株的菌落及形態(tài)特征

3.1.1 分離的柑橘砂皮病菌株統(tǒng)計(jì)表 2-2 柑橘砂皮的分離結(jié)果Table 2-2 The isolates of Diaporthe criti from different place of Hunan province菌株編號(hào) 寄主來源 采集地點(diǎn) 采集時(shí)間 菌株編號(hào) 寄主來源 采集地點(diǎn) 采集時(shí)間HLXQG 臍橙 回龍圩 2014 年 XNMG 蜜橘 新寧 2015 年HLXXG 夏橙 回龍圩 2014 年 XNPG i*柑葉片 新寧 2015 年HLXPY i*柑葉片 回龍圩 2014 年 MYXY 夏橙葉片 麻陽 2015 年HLXYG 柚子 回龍圩 2014 年 MYBG 冰糖橘 麻陽 2015 年HLXBG 冰糖橘 回龍圩 2014 年 TDPG i*柑 通道 2015 年SMBG 冰糖橘 石門 2014 年 TDMG 蜜橘 通道 2015 年SMMG 蜜橘 石門 2014 年 HJXG 夏橙 洪江 2015 年JYXG 夏橙 江永 2015 年 HJBG 冰糖橘 洪江 2015 年JYMG 蜜橘 江永 2015 年 ARMG 蜜橘 安仁 2016 年JYBG 冰糖橘 江永 2015 年 LYPG i*柑 耒陽 2016 年YZQG 臍橙 宜章 2015 年 YXBG 冰糖橘 永興 2016 年YZXG 夏橙 宜章 2015 年 LXPY i*柑葉片 瀘溪 2016 年YZPG i*柑 宜章 2015 年 LHQG 臍橙 隆回 2016 年YZBG 冰糖橘 宜章 2015 年3.1.2 分離菌株的菌落及形態(tài)特征

圖 2-3 分生孢子釋放的黃色形似奶油的滴狀物Fig.2-3 The conidia release the yellowish creamy drops離物分別在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基（PDA）上恒溫箱（24℃特征，分生孢子，對(duì)其進(jìn)行顯微觀察：皮病菌在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基（PDA）上恒溫箱（24℃）征，菌株在 PDA 培養(yǎng)基上 27℃培養(yǎng) 7 天后菌落直徑達(dá) 63.較為發(fā)達(dá)的基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲為白色（圖 2-1-2）紡錘形 α 型孢子，無色，正直，常具 2 個(gè)油球，有時(shí)油型，無色，正直或者彎鉤狀，無油球，單孢。分生孢子從分色的形似奶油的滴狀物（圖 2-3）。研究酒精對(duì)健康的柑橘果實(shí)表面消毒后用無菌水沖洗 3 次，在上液滴在小孔上，以滅菌水作對(duì)照，發(fā)現(xiàn)接種果實(shí)的發(fā)病部的病健交界處進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，獲得與最初分離的病原

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5 李e

本文編號(hào)：2749181