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枇杷種子無菌萌發(fā)和離體再生體系建立研究

發(fā)布時間:2020-06-26 23:51
【摘要】:枇杷具有重要的研究價值,但枇杷仍無穩(wěn)定的離體再生體系。本文研究了不同品種的枇杷種子萌發(fā)情況,影響種子萌發(fā)的因素以及貯藏對種子萌發(fā)的影響并優(yōu)化了枇杷種子無菌萌發(fā)的消毒體系。以無菌苗為實驗材料,本文通過直接再生不定芽途徑(從外植體直接誘導(dǎo)不定芽)和間接再生不定芽途徑(先誘導(dǎo)愈傷組織,再分化成芽)探究了枇杷離體再生體系。主要研究結(jié)果如下:1、通過對13個枇杷品種種子萌發(fā)的探究,發(fā)現(xiàn)白肉類枇杷種子的萌發(fā)率普遍高于紅肉類枇杷種子的萌發(fā)率,且苗高更高。通過對種子內(nèi)源ABA和IAA含量的測定,結(jié)果顯示,種子內(nèi)源ABA含量與播種后80d種子萌發(fā)率呈負(fù)顯著性相關(guān),而內(nèi)源IAA含量與播種后80d種子萌發(fā)率無顯著相關(guān)性。去除酒精消毒環(huán)節(jié)可促進(jìn)種子萌發(fā),對'大紅袍'種子萌發(fā)的促進(jìn)效果大于對'硬條白沙種子萌發(fā)的促進(jìn)作用。此外,應(yīng)用異噻唑啉酮(PPM)可有效控制枇杷種子去除酒精消毒環(huán)節(jié)后無菌萌發(fā)的污染。2、果實成熟度對枇杷種子萌發(fā)的影響不大,但品種間存在差異,如完全成熟的'Oobusa'果實中的種子具有較高的萌發(fā)率(80d萌發(fā)率為73.33%,是轉(zhuǎn)色期種子萌發(fā)率的2.5倍)。種子萌發(fā)情況與貯藏方式(果實貯藏和種子貯藏)關(guān)系較小,主要受貯藏天數(shù)的影響。即兩種貯藏方式下的種子萌發(fā)率差異不大,而貯藏20d或更久,種子萌發(fā)率顯著降低,貯藏40d的種子基本失去了萌發(fā)能力。枇杷種子貯藏特性在品種間存在較大差異,4℃C和15℃C對'早鐘六號'種子萌發(fā)影響不大,而25℃C明顯抑制種子萌發(fā);不同貯藏溫度對'太平白'種子萌發(fā)的不利效應(yīng)較小,總體來說,15℃C可作為枇杷種子貯藏的首選試驗溫度。通過貯藏和提前采收可延長枇杷種子的供應(yīng)期。3、不同外植體(葉片、子葉、莖段)、不同品種以及不同苗齡的子葉均較難直接再生不定芽;葉片誘導(dǎo)愈傷組織較為容易,但愈傷組織再分化不定芽仍十分困難。外植體離體再生的難易程度與品種相關(guān),且不同品種適宜的誘導(dǎo)愈傷組織形成的植物激素種類和比例不同。白肉類枇杷'硬條白沙'和'寧海白'的葉片較早且最易形成愈傷組織,而紅肉類枇杷'大五星'和'大紅袍'愈傷組織誘導(dǎo)相對較難。'硬條白沙'和'大紅袍'的最適培養(yǎng)基為MS6即MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.8 mg/L 2,4-D + 0.4 mg/L NAA;'寧海白'的最適培養(yǎng)基為 MS4即MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D;'大五星'的最適培養(yǎng)基為MS5即MS + 0.5 mg/L 6-BA+ 2.0 mg/L 2,4-D。
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S667.3
【圖文】:

種子萌發(fā)率,品種,數(shù)據(jù),軟條


2.2.1枇杷品種對種子萌發(fā)的影響逡逑通過對浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院批杷種質(zhì)資源圃的13個成熟果實的批杷種子萌發(fā)逡逑率的統(tǒng)計和播種后80邋d的苗高的顯著性分析(圖2.1),結(jié)果顯示,播種后20邋d,逡逑有九個品yL種子萌發(fā),但其他四個品種種子仍未萌發(fā)(數(shù)據(jù)顯示在圖2.1中無柱逡逑子)。播種后40邋d,所有品種種子均萌發(fā),但品種間差異較大,從10.00%邋(‘大逡逑紅袍’)到80.70%邋(‘軟條白沙’)不等。60d時,‘軟條白沙’和‘太平白’逡逑種子的萌發(fā)率超過85%,接近于播種后80邋d的萌發(fā)率。而其他品種種子播種后逡逑60d的種子萌發(fā)率顯著低于其80d種子萌發(fā)率,而到80d,其中七個品種的種逡逑子萌發(fā)率高于85%),但3個品種種子萌發(fā)率低于70%邋(圖2.1)。播種后苗高逡逑的變化總體和萌發(fā)率的變化趨勢類似,但品種間存在差異如‘軟條白沙’種子逡逑80邋d的平均苗高達(dá)8.63邋cm而‘Oobusa’的平均苗高僅為1.87邋cm邋(表2.2)。已逡逑有的枇杷種子萌發(fā)的研究顯示

順序圖,品種,種子播種,種子萌發(fā)率


White-fleshed邋cultivai*s邐Red-fleshed邋cultivars逡逑圖2.1邋13個批杷品種種子萌發(fā)率(數(shù)據(jù)從10邋d到80邋d,間隔10邋d,只顯示20邋d、逡逑40d、60d和80d數(shù)據(jù)。Errorbars=SE(n=3)。20d沒有數(shù)據(jù)柱的品種說明種逡逑子還未萌發(fā))逡逑Figure邋2.1邋Germination邋rate邋of邋seeds邋from邋13邋loquat邋cultivars.邋(The邋data邋were逡逑collected邋from邋10邋d邋to邋80邋d邋after邋sowing邋at邋10邋d邋intervals,邋but邋only邋the邋data邋at邋20邋d.逡逑40邋d,邋60邋d邋and邋80邋d邋were邋shown.邋Error邋bars邋mean邋SE邋(n=3).邋Note邋that,邋the邋absence邋of逡逑a邋20邋d邋column邋indicated邋that邋no邋seed邋had邋germinated.)逡逑15逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2731059

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