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芍藥遺傳多樣性研究與赤霉素解除休眠的機(jī)理探討

發(fā)布時(shí)間:2020-06-23 09:04
【摘要】:芍藥(Paeonia lactiflora Pall.)為芍藥科(Paeoniaceae)多年生宿根植物,是深受我國(guó)人民喜愛(ài)的傳統(tǒng)名花。目前國(guó)內(nèi)外培育的芍藥品種已逾千個(gè),變異類型非常豐富,但因缺乏相應(yīng)的親本信息,致使無(wú)法全面了解各品種的遺傳背景。本研究通過(guò)染色體核型鑒定和SSR分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)不同芍藥品種群的品種遺傳多樣性進(jìn)行了研究,為芍藥的品種分類、品種選育以及種質(zhì)資源利用提供科學(xué)依據(jù)。另一方面,在芍藥促成栽培時(shí),生產(chǎn)上廣泛利用GA_3打破休眠,但對(duì)促進(jìn)芍藥花芽休眠解除的分子機(jī)理尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究從形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和分子生物學(xué)角度探討了不同GA_3處理方式對(duì)芍藥花芽形態(tài)分化、生理生化代謝、GID1受體基因和DELLA蛋白基因表達(dá)模式的影響,探討芍藥花芽休眠解除過(guò)程的生理與分子機(jī)制,為芍藥的花期調(diào)控和分子育種提供理論指導(dǎo)。本研究主要成果如下:1、不同芍藥品種群品種的染色體核型鑒定:對(duì)21個(gè)倍性未知的品種進(jìn)行了染色體核型鑒定。結(jié)果顯示:中國(guó)芍藥品種群的品種為二倍體,伊藤芍藥品種群的5個(gè)品種為三倍體,雜種芍藥品種群中的15個(gè)品種倍性多樣,出現(xiàn)了二倍體、三倍體及四倍體的分化。2、SSR分子標(biāo)記篩選與遺傳多樣性分析:從100對(duì)引物中篩選出13對(duì)多態(tài)性引物,總計(jì)得到86個(gè)等位位點(diǎn)(76個(gè)多態(tài)性等位位點(diǎn)),每對(duì)引物平均擴(kuò)增6.615位點(diǎn)。有效等位位點(diǎn)變化范圍為2.243-7.800,PIC含量的變化范圍為0.554-0.872,遺傳多樣性指數(shù)變化范圍為1.701-3.126。通過(guò)UPGMA法構(gòu)建了 55個(gè)芍藥品種的聚類圖,55個(gè)品種被劃分為9個(gè)小組。3、外源噴施GA_3對(duì)芍藥'大富貴'花芽分化的影響:將進(jìn)入花瓣原基階段的植株移入冷庫(kù),同時(shí)噴施150 mg/L的外源GA_3。結(jié)果顯示:GA_3對(duì)芍藥的花芽分化進(jìn)程影響十分顯著,花芽分化周期極大縮短,入冷庫(kù)前噴施150 mg/L外源GA_3的植株僅需25 d就能迅速?gòu)幕ò暝A段分化到雌蕊原基階段,比對(duì)照組提前了 40 d。4、芍藥花芽休眠解除過(guò)程中的生理代謝研究:可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量等10個(gè)生理指標(biāo)在芍藥花芽休眠解除期間均呈一定的規(guī)律性變化。芍藥花芽休眠解除時(shí),可溶性糖和淀粉含量、SOD和PDO酶活性呈現(xiàn)下降趨勢(shì),CAT酶活性呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。GA_3和GA_3/ABA的比值在芍藥花芽休眠解除時(shí)均呈上升趨勢(shì),GA_3/ABA的比值基本能夠反映芍藥花芽休眠解除的趨勢(shì)。5、GID1受體基因和DELLA蛋白基因表達(dá)模式的探索:從本課題組已有轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中篩選出2個(gè)GID1受體基因PlGID1a和PlGID1b,3個(gè)DELLA蛋白基因PlDELLA1、PlDELLA2和PlDELLA3。根據(jù)結(jié)果推測(cè)較高表達(dá)量的GID1(PlGID1a和PlGID1b)受體基因,較低表達(dá)量 DELLA(PlDELLA1、PlDELL APlDELLA3)蛋白會(huì)促進(jìn)芍藥花芽休眠解除。由于PlGID1a和PlDELLA2的基因表達(dá)量差值相對(duì)較大,推測(cè)PlGID1a和PlDELLA2是GID1受體基因和DELLA蛋白中的關(guān)鍵基因。
【學(xué)位授予單位】:北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S682.12
【圖文】:

植物,赤霉素,蛋白,三聚體


赤霉素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在模式植物擬南芥和水稻中已經(jīng)有了清晰的闡明,della逡逑蛋白、赤霉素受體G/Di和見(jiàn)}7等是赤霉素轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的重要轉(zhuǎn)導(dǎo)因子。根據(jù)前人逡逑研宄,如圖1-1,GA-G/Di-DELLA信號(hào)通路就是赤霉素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑(Sun,2010)。逡逑首先,調(diào)控植物生長(zhǎng)的相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子,與DELLA蛋白基因相結(jié)合,抑制植株生長(zhǎng)(呂逡逑西洋,2007;盧加舉,2013);其次,G/Di與赤霉素結(jié)構(gòu)形成二聚體(Ueguchi-Tanaka逡逑etal,2005;邋Chandleretal,2008)。在邋G/Di邋與邋GA邋形成二聚體時(shí),極易與邋DELLA邋蛋白逡逑結(jié)合;最后GA-G/D7-DELLA形成三聚體。GA-G/D7-DELLA三聚體抑制了邋DELLA逡逑蛋白與其他植物轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合,與DELLA蛋白聯(lián)系緊密的關(guān)鍵基因,基因表達(dá)量逡逑趨向正;蛘咴黾樱龠M(jìn)了植物的生長(zhǎng)發(fā)育(Ueuch-Tanaka邋etal,2007),同時(shí)逡逑GA-G/Di-DELLA三聚體形成后,DELLA蛋白與泛素E3連接酶復(fù)合體(SCraiy7/G/?)逡逑進(jìn)一步結(jié)合,促進(jìn)DELLA蛋白被26S蛋白酶產(chǎn)生了植株對(duì)GA3的響應(yīng)過(guò)程(Dill邋et逡逑al.

技術(shù)路線圖,試驗(yàn)材料,挪威云杉,感受能力


GA-respo^]邋0邋■邐*?.邐嫇逡逑圖1-1植物GA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)模式逡逑Fig.邋1-1邋Model邋of邋GA邋signaling邋in邋plants邋(Sun,2010)逡逑Ueguchi-Tanaka等(2005)在水稻中鑒定了受體基因G/Z)/。研究發(fā)現(xiàn)受體基因逡逑G/D/在感知GA信號(hào)后,自身構(gòu)象發(fā)生改變,促進(jìn)G/D/與DELLA蛋白結(jié)合,進(jìn)而逡逑促進(jìn)DELLA蛋白降解,激活被DELLA蛋白抑制的基因轉(zhuǎn)錄因子。葛暉(2010)探逡逑索葡萄果實(shí)在GA3處理后G/D7受體基因的表達(dá)差異,發(fā)現(xiàn)其在GA3處理?xiàng)l件下均逡逑有上調(diào)或下調(diào)表達(dá)。張運(yùn)城(2015)以針葉樹(shù)挪威云杉和油松為試驗(yàn)材料,探索不同逡逑組織G7D/基因的表達(dá)分析,發(fā)現(xiàn)其在球花和其他組織均有表達(dá),同時(shí)在對(duì)八G/D/逡逑基因的驗(yàn)證過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)其能增強(qiáng)對(duì)GA3的感受能力,促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育。羅弦逡逑等(2016)以唐菖蒲為試驗(yàn)材料

【參考文獻(xiàn)】

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1 高燕;蔣昌華;宋W

本文編號(hào):2727103


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