【摘要】：南瓜是瓜類蔬菜嫁接生產(chǎn)中的主要砧木,可作為黃瓜、西瓜、甜瓜、苦瓜、西葫蘆等瓜類蔬菜的砧木,選用適當(dāng)?shù)哪瞎蠟檎枘究墒构项愂卟颂岣弋a(chǎn)量、改善品質(zhì),增強(qiáng)抗病抗逆性。為探究嫁接南瓜有性后代表型性狀是否會(huì)產(chǎn)生變異以及變異的穩(wěn)定性及遺傳機(jī)制,本試驗(yàn)以南瓜自交系‘北觀’為砧木,‘360-3’作接穗進(jìn)行嫁接,獲得嫁接植株(G_0)的種子進(jìn)行田間種植,對(duì)嫁接植株的一代(G_1)和二代(G_2)進(jìn)行農(nóng)藝性狀調(diào)查和分析,明確了嫁接兩世代的不同性狀變異情況和穩(wěn)定性;同時(shí)也為證明產(chǎn)生嫁接變異的遺傳機(jī)制,初步優(yōu)化和建立了適于本試驗(yàn)材料的甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性分析技術(shù)體系,為充分利用表觀遺傳學(xué)在作物改良中的潛力提供新途徑。主要研究結(jié)果如下:(1)通過嫁接南瓜G_1代群體與砧木和接穗的農(nóng)藝性狀分析,發(fā)現(xiàn)嫁接南瓜G_1代與接穗的不同性狀相比有一定的差異,出現(xiàn)了變異性狀。嫁接南瓜G_1代的葉片長、葉片寬、葉面積、節(jié)間長、莖粗、葉柄粗和第一雌花節(jié)位維持了接穗的性狀表現(xiàn),葉柄長、果肉顏色、種寬、種厚性狀受到砧木的影響;嫁接南瓜G_1代瓜柄基部凸凹形態(tài)、瓜臍凸凹形態(tài)、瓜柄橫切面形狀均有砧木果實(shí)形態(tài)性狀出現(xiàn);對(duì)主要性狀的變異分析顯示,嫁接南瓜G_1代葉柄長、果肉顏色a值、種寬3個(gè)主要變異性狀在不同株系間的表現(xiàn)均有不同的差異,而種厚性狀在不同株系間無差異。(2)對(duì)嫁接南瓜G_2代群體與砧木和接穗的農(nóng)藝性狀分析發(fā)現(xiàn),嫁接南瓜G_2代遺傳了嫁接南瓜G_1代的主要變異性狀。嫁接南瓜G_2代的葉片寬、葉柄長、莖粗、葉柄粗、果肉顏色a值、種長、種寬、種厚與種形指數(shù)9個(gè)性狀與接穗具有顯著性差異,其中葉柄長、種寬、種厚發(fā)生了遺傳變異,同時(shí)葉片寬與百粒重出現(xiàn)了隔代遺傳的現(xiàn)象;在嫁接南瓜G_2代中瓜柄基部凸凹形態(tài)、瓜臍凸凹形態(tài)、瓜柄橫切面形狀仍有砧木果實(shí)形態(tài)性狀的出現(xiàn);因此,葉柄長、種寬、種厚、果實(shí)不同形態(tài)性狀在嫁接南瓜G_2代發(fā)生了遺傳變異。(3)為探索嫁接引起性狀變異的遺傳機(jī)制,初步建立并優(yōu)化了南瓜MSAP體系,即第一步最佳酶切時(shí)間2 h,HapⅡ(HpaⅡ/MspⅠ)0.5μL;第二步酶切時(shí)間6 h,EcoRⅠ用量0.4μL;連接體系包括酶切產(chǎn)物21μL,EcoRⅠ接頭(5μmol/L)、HapⅡ接頭(5μmol/L)各1μL,連接時(shí)間12 h;最佳預(yù)擴(kuò)增反應(yīng)體系(25μL)包含2μL連接產(chǎn)物,1.5μL Mg~(2+),2μLdNTP(2.5 mmol/L),0.6μL Taq酶(5 U/μL),0.4μL上下游引物(10μmol/L);最佳選擇性擴(kuò)增反應(yīng)體系以預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋120倍為模板(4μL),其它同預(yù)擴(kuò)增體系。利用優(yōu)化后的體系進(jìn)行聚丙烯凝膠電泳驗(yàn)證并篩選出適于南瓜MSAP分析的36對(duì)引物,優(yōu)化后的MSAP體系多態(tài)性好,體系穩(wěn)定,可重復(fù)。
【圖文】：

第一章 文獻(xiàn)綜述5m C5m CGG”和“5m CCGG”，但可切割單鏈甲基化的序列；而 MspⅠ能切割鏈 “C5m CGG”，但不能切割“5m CCGG”甲基化序列。MSAP 法可以對(duì)全基因胞嘧啶甲基化程度進(jìn)行分析，不一定需要預(yù)先知道所分析 DNA 的基因序列，直接與基因序列聯(lián)系，，具有穩(wěn)定性好，一次性可檢測位點(diǎn)多等特點(diǎn)，適用于總基化特異性位點(diǎn)分析。

在園藝生產(chǎn)上應(yīng)用廣泛，已用于多種蔬菜、傳變異相關(guān)研究在茄子[41]、擬南芥[97]、榨菜[98種為試驗(yàn)材料，在苗期采用插接的嫁接方法過調(diào)查嫁接南瓜自交一代的農(nóng)藝性狀，分對(duì)嫁接有性后代性狀的影響，為探明嫁接。度南瓜種（C. maxima）‘北觀’和中國南瓜學(xué)院南瓜種質(zhì)資源創(chuàng)新與利用團(tuán)隊(duì)于 2000 交純化留種獲得的穩(wěn)定高代自交系。
【學(xué)位授予單位】：河南科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S642.1

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本文編號(hào)：2698710