【摘要】：青枯病是世界性土傳病害,可危害多種作物,尤其是茄科作物。近年來,嫁接栽培技術(shù)的推廣應(yīng)用對茄果類蔬菜防治土傳病害和提高產(chǎn)量發(fā)揮了很大的作用。生產(chǎn)上對抗性砧木需求量大,開展青枯病抗性砧木選育具有重要意義。本研究通過分離鑒定青枯病菌,用青枯病菌對砧用辣椒種質(zhì)資源進(jìn)行室內(nèi)人工接種,鑒定砧用辣椒種質(zhì)對青枯病的抗性表型,再結(jié)合田間自然病圃接種試驗(yàn),篩選出不同抗性親本進(jìn)行雙列雜交,分析抗性雜種優(yōu)勢,探討砧用辣椒種質(zhì)對青枯病的抗性遺傳規(guī)律。構(gòu)建F2群體,采用分離分組混合分析法(BSA)篩選SSR和ISSR分子標(biāo)記,分析標(biāo)記與抗性基因的連鎖關(guān)系,為利用分子標(biāo)記技術(shù)輔助辣椒抗青枯病砧木育種提參考。研究結(jié)果如下:1、選用特異性引物Y2/OLI1對從感病辣椒植株上分離的青枯病菌總DNA進(jìn)行PCR檢測,得到特異條帶,回收PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序,經(jīng)過NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行Blast比對,得到長288bp的序列與茄科雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)菌株EP1(登錄號為CP015116.1)具有99%的同源性,確定分離到的菌株為茄科雷爾氏菌,表明采用引物Y2/OLI1進(jìn)行PCR擴(kuò)增能夠有效準(zhǔn)確檢測辣椒青枯病菌。2、對15份砧用辣椒種質(zhì)進(jìn)行青枯病抗性鑒定,結(jié)果表明不同砧木對青枯病的抗性差異顯著。其中有2份種質(zhì)表現(xiàn)高抗(HR),1份種質(zhì)表現(xiàn)抗病(R),3份種質(zhì)表現(xiàn)中抗(MR),1份種質(zhì)表現(xiàn)感病(S),其余表現(xiàn)高感(HS)。田間病圃接種鑒定結(jié)果表明,種質(zhì)F06、G16、D16、D36的抗性水平分別為抗病(R)、中抗(MR)、感病(S)、高感(HS),與室內(nèi)接種鑒定一致。3、以病情指數(shù)分析抗病性雜種優(yōu)勢,四個不同抗性砧木種質(zhì)組配的12個F1組合中,有2個組合(D16×D36和G16×F06)表現(xiàn)負(fù)向超高親優(yōu)勢,占參試組合數(shù)的16.6%;有 5 個組合(D16×D36,G16×D36,G16×F06,F06×D16 和 F06×D36)表現(xiàn)負(fù)向超中親優(yōu)勢,占參試組合數(shù)的41.7%;其余組合表現(xiàn)正向超中親優(yōu)勢,占參試組合數(shù)的41.7%。表明辣椒砧木對青枯病抗性的雜種優(yōu)勢表現(xiàn)較為復(fù)雜,在選配親本時,選擇抗性水平相同的雙親可選育出抗性強(qiáng)的雜交組合。4、以抗青枯病種質(zhì)F06和感青枯病種質(zhì)D36為親本進(jìn)行正反交,分別獲得正反交F1代、F2代,經(jīng)分析發(fā)病情況和病情指數(shù),表明砧用辣椒種質(zhì)F06對青枯病的抗性表達(dá)受細(xì)胞質(zhì)基因調(diào)控,并存在加性效應(yīng)。5、采用群體分離法,構(gòu)建抗感青枯病的F2分離群體,進(jìn)行SSR和ISSR分子標(biāo)記篩選研究。從113對SSR引物和100條ISSR引物中,篩選出具有多態(tài)性的1對SSR引物(R105)和2條ISSR引物(UBC803和UBC876),經(jīng)F2分離群體驗(yàn)證,獲得1個與砧用辣椒青枯病抗性相關(guān)的標(biāo)記Q76,遺傳距離為7.30cM。
【圖文】：

落連在一起形成菌苔，表現(xiàn)為乳白色，具有流動性，與單菌落的顏色和形態(tài)相似。經(jīng)過逡逑培養(yǎng)２４ｈ后觀察，發(fā)現(xiàn)被注射青枯病菌液的煙葉葉肉組織（１，邋２，邋３，邋４）均出現(xiàn)明顯病逡逑斑，病斑呈灰褐色，紙狀，，對照（ＣＫ）沒有出現(xiàn)病斑，如圖３－１邋（Ｂ）所示，說明該青逡逑枯病菌致病性強(qiáng)，可用于接種試驗(yàn)。逡逑ｆｎｍ逡逑＾邋ｍｒｎｍ邋．逡逑圖３－１：青枯病菌菌苔形態(tài)（Ａ）和煙葉過敏性反應(yīng)（Ｂ）逡逑Ｆｉｇ３－１：邋Ｒａｌｓｔｏｎｉａ邋ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ邋ｌａｗｎ邋ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ（Ａ）邋ａｎｄ邋ｔｏｂａｃｃｏ邋ａｎａｐｈｙｌａｘｉｓ（Ｂ）逡逑３．３．２砧用辣椒對青枯病抗性表型逡逑辣椒砧木在人工氣候箱里接種３０天后發(fā)病情況如表３－３所示，發(fā)病率和病情指數(shù)逡逑最低的是４．６７％，發(fā)病率最高達(dá)到８８．７１％，病情指數(shù)最高達(dá)８７．４２°／。，表明不同砧用辣逡逑２１逡逑

邐ＨＲ逡逑在室內(nèi)人工接種的情況下，砧用辣椒接種后對青枯病菌的反應(yīng)如圖３＿３，除了砧木逡逑Ｃ６在第１０天開始發(fā)病，其余均在接種后５天之前開始發(fā)病，說明青枯病菌的致病力強(qiáng)，逡逑砧用辣椒被青枯病菌侵染后發(fā)病迅速。砧用辣椒發(fā)生青枯病的整體基本趨勢是在第５到逡逑第１５天之間線性增長，到第２５天后病情趨于穩(wěn)定。其中表現(xiàn)為高抗水平的砧木Ｃ６和逡逑Ｃ７病情指數(shù)隨接種時間變化趨勢緩慢，說明感病緩慢，對青枯病菌的抗病能力強(qiáng)；高逡逑感水平砧木Ｄ２６和１０６病情指數(shù)隨時間增長快，說明對抗青枯病菌的能力弱，在第２５ｄ逡逑２２逡逑
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S436.418

【參考文獻(xiàn)】

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1 許占友,邱麗娟,常汝鎮(zhèn),李向華,鄭翠明,劉立宏,郭蓓;利用SSR標(biāo)記鑒定大豆種質(zhì)[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);1999年S1期

2 華靜月;張長齡;何禮遠(yuǎn);;我國植物青枯菌的生化型和其他生理差異[J];植物保護(hù)學(xué)報(bào);1984年01期

3 任欣正,潘小玫,蔣曉芳,方中達(dá);間接血凝抑制技術(shù)檢測植物青枯病[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1984年03期

4 高用明,朱軍;植物QTL定位方法的研究進(jìn)展[J];遺傳;2000年03期

5 趙鑫,周寶利,林桂榮,付亞文;辣椒嫁接效果試驗(yàn)研究[J];北方園藝;2000年04期

6 鄭群,宋維慧;國內(nèi)外蔬菜嫁接技術(shù)研究進(jìn)展(上)[J];長江蔬菜;2000年08期

7 劉曉妹,蒲金基,王玉萍;防治番茄青枯病復(fù)配劑篩選[J];農(nóng)藥;2003年08期

8 朱賢聰;金e

本文編號：2671574