【摘要】：蠟梅(Chimonanthus praecox L.)又名黃梅,隸屬于蠟梅科(Calycanthaecae),蠟梅屬(Chimonanthus Lindl.),為我國特有的傳統(tǒng)名花,有著悠久的歷史和燦爛的花文化。蠟梅花開嚴冬,傲然于冰雪嚴寒之中,且香味沁人心脾;寓意忠實、獨立、堅韌、創(chuàng)新,自古以來頗受我國文人雅士的喜愛,同時也涌現(xiàn)出許多贊頌蠟梅的詩篇。蠟梅的花為兩性花,花朵結(jié)構(gòu)由內(nèi)而外分別為雌蕊、雄蕊、花被片和苞片。雄蕊從初花到衰老期,屬于多雄蕊緩慢運動,逐漸向中心雌蕊靠近;花藥由未開裂—開裂—衰老狀態(tài)轉(zhuǎn)變。這些轉(zhuǎn)變對蠟梅的繁殖進化具有重要意義。目前在分子方面對蠟梅花發(fā)育、花香、花色和抗寒方面研究較多,對蠟梅雄蕊發(fā)育和運動方面研究較少;而激素,尤其是生長素,對植物花藥的發(fā)育和細胞伸長方面有重要作用。因此,本文對蠟梅雄蕊發(fā)育后期的四個時期即平臥期(An11),直立未散粉期(An12)、直立散粉期(An13),衰老期(An14)進行轉(zhuǎn)錄組測序,并結(jié)合石蠟切片觀測和IAA處理以及相關基因表達量的測定,以初步探究蠟梅雄蕊后期發(fā)育的分子機制,為后續(xù)相關方面的研究奠定基礎。獲得主要研究結(jié)果如下:1.對蠟梅雄蕊做石蠟切片進行觀察,結(jié)果顯示蠟梅花絲彎曲部分的遠軸端細胞伸長,近軸端細胞大小基本不變。在An11時期遠軸端的細胞明顯小于近軸端的細胞;An12時期,兩端細胞大小近似。An12時期遠軸端細胞明顯大于An11遠軸端細胞。IAA免疫定位結(jié)果顯示蠟梅雄蕊中的生長素主要分布在雄蕊花絲的維管束和藥室內(nèi)壁上,其他部位也有生長素的分布但量相對較少。由此可見,蠟梅雄蕊從An11向An12時期轉(zhuǎn)變的過程中,遠軸端花絲細胞逐漸變大,近軸端細胞大小基本不變,屬于細胞不對稱生長,這可能與促進細胞生長的生長素有關。2.采用RNA-seq技術對四個時期的雄蕊進行測序,分別得到55271946、49326090、54791199、57632908條原始序列。對組裝出來的潛在轉(zhuǎn)錄本(Potential Transcript)和Unigene進行各項指標的統(tǒng)計得到237975條潛在轉(zhuǎn)錄本,176726條Unigene。并將基因與數(shù)據(jù)庫Nr、Swiss-Prot、KEGG和COG進行序列比對、功能注釋及代謝通路分析,得到蠟梅雄蕊轉(zhuǎn)錄組文庫。3.通過對差異表達基因(DEGs;，

本文編號：2661329