北京臨空經(jīng)濟(jì)區(qū)園林植物病害的發(fā)生
【圖文】:
ITS邋片段的邋PCR選用邋25邋叫體系:5邋gLIOx邋Buffer邋緩沖液,4邋pL邋dNTP(2.5邋mM邋each),,逡逑ITS1邋和邋ITS4邋引物各邋1邋pL邋(10邋pM),0.3邋叫邋DNA邋聚合邋Ex邋Taq邋酶(5邋U/邋ml),邋1邋pL逡逑的DNA模板,最后加入去離子水補足25邋^L(TaKaRa)。反應(yīng)條件為94°C預(yù)變性10邋min,逡逑94°C變性45s,51°C退火45邋s,邋72°C延伸45邋s,重復(fù)進(jìn)行30個循環(huán),最后72°C延伸8逡逑min,邋10°C保存。取扣1所得到的PCR產(chǎn)物加入0.5|il加樣緩沖液(6xLoading邋Buffer),逡逑在1-1.5%瓊脂糖凝膠在120V電壓下電泳30邋min后,經(jīng)過EB染色lOmin后,在紫逡逑外燈下觀察電泳結(jié)果。逡逑2A3.2序列的純化和測序逡逑觀察電泳結(jié)果,將有目的條帶(約580邋bp)對應(yīng)的PCR產(chǎn)物用BigDye邋Terminator逡逑(v.3.1)試劑盒進(jìn)行測序,產(chǎn)物用ABI3730XL核酸測序儀進(jìn)行雙向反應(yīng)測定序列。逡逑測序部分實驗由上海英駿(Invitrogen)生物技術(shù)有限公司完成。逡逑2.4.4數(shù)據(jù)的BLAST比對分析逡逑測序得到的序列用MEGA邋v.6軟件進(jìn)行序列拼合,將所獲得的基因片段與最新文逡逑獻(xiàn)和基因組數(shù)據(jù)庫中篩選的參考序列整合后,從GenBank數(shù)據(jù)庫上下載并加入合適的逡逑
B邋=邋500邋jam;邋C邋=邋5邋^un.逡逑2?臭棒枝枯。ú≡浩咸亚蜃痪虈崳幔螅穑了喝缧膹模椋祝蓿颍ǎ停铮酰纾╁澹茫澹螅澹﹀澹模邋澹危铮簦╁义蠄D3-2逡逑病害描述:危害主干和樹枝,樹皮上出現(xiàn)近梭形或不規(guī)則病斑,棕紅色,隨后下陷,逡逑壞死范圍擴(kuò)大。后期在塌陷的樹皮上出現(xiàn)散生隆起,后突出表皮形成子座,有明顯黑逡逑色邊緣。最后樹枝或主干失水干死,導(dǎo)致樹木死亡。子座在寄主樹枝表皮下埋生,孢逡逑子器散生或聚生,突出,圓形至卵形,腔室單腔直徑0.2-0.4mm。外子座頂盤圓形至逡逑卵形,淡黃色或棕色,每個頂盤有單個孔口。分生孢子無色透明,無分隔,長jb圓形,逡逑19—30邋x邋4-6邋|im0逡逑14逡逑
【學(xué)位授予單位】:北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S436.8
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本文編號:2629603
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