【摘要】：本試驗(yàn)利用自育高效授粉樹1379、1539、2119及3-21的花粉對富士和紅星進(jìn)行授粉,以嘎啦的花粉作為對照,對果實(shí)發(fā)育期間抗壞血酸(AsA)、可溶性糖和可滴定酸組分、總類黃酮含量的變化進(jìn)行研究,并對果實(shí)成熟時(shí)的外在及內(nèi)在品質(zhì)進(jìn)行研究,如單果重、果形指數(shù)、果實(shí)硬度、揮發(fā)性物質(zhì)、果皮花色苷含量等。采用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)比較了 1379和嘎啦花粉授粉后的富士果實(shí)不同發(fā)育階段基因表達(dá)的差異,挖掘與AsA、類黃酮合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因。主要結(jié)果如下:1.不同授粉樹的花粉對富士、紅星蘋果進(jìn)行的授粉試驗(yàn)結(jié)果表明,高效授粉樹的花粉對能夠有效地提高果實(shí)的單果重、果形指數(shù)、花色苷含量等外觀品質(zhì)及硬度、可溶性固形物、揮發(fā)性氣體物質(zhì)、可溶性糖、可滴定酸等內(nèi)在品質(zhì),且均與對照存在顯著性差異。2.在果實(shí)發(fā)育過程中,果實(shí)中的AsA和類黃酮含量逐漸減少,幼果中的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于成熟果實(shí),同一發(fā)育時(shí)期的果實(shí)中紅星的類黃酮含量大于富士,而AsA的含量相差不大。經(jīng)過高效授粉樹授粉后的成熟果實(shí)中AsA、類黃酮含量明顯提高,富士經(jīng)1379、1539、2119、3-21花粉授粉后的果實(shí)內(nèi)類黃酮含量與對照相比分別增長13.80%、28.54%、19.65%、18.92%,紅星分別增長 4.69%、15.64%、14.59%、26.40%;富士經(jīng)1379、1539、2119、3-21花粉授粉后的果實(shí)內(nèi)AsA含量與對照相比分別增長 34.55%、28.18%、52.73%、57.27%,紅星分別增長 8.67%、20.23%、9.83%、24.86%且都 與對照都存在顯著性差異。3.將1379、嘎啦與富士授粉,對花后15、30、45、60天的果實(shí)利用Illumina雙末端測序(Hiseq 2500)平臺進(jìn)行測序,共產(chǎn)生59047506條高質(zhì)量的reads,通過混合拼接共13272條Unigenes得到了基因功能注釋,并有3339條Unigenes映射到Go數(shù)據(jù)庫中不同的節(jié)點(diǎn),而通過KEGG代謝通路分析發(fā)現(xiàn)3636條Unigenes參與了 124個生物學(xué)途徑,其中25條被注釋到AsA代謝途徑中,24條被注釋到類黃酮生物合成途徑中。4.對花后15d、30d、45d、60d的果實(shí)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,利用測序結(jié)果對蘋果不同授粉組合AsA、類黃酮生物合成途徑相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行分析。結(jié)果表明,在果實(shí)發(fā)育過程中AsA合成相關(guān)基因GME、GGP、APX均有不同程度的下調(diào),而AO基因呈上調(diào)表達(dá)模式,分別比較1379和嘎啦授粉后的果實(shí),1379授粉果實(shí)中GME基因顯著上調(diào)表達(dá)。類黃酮合成相關(guān)基因CHI、DFR、LAR、ANR在果實(shí)發(fā)育過程中均下調(diào)表達(dá),而1379授粉后的果實(shí)比和嘎啦授粉LAR基因顯著上調(diào)表達(dá)。這些基因的表達(dá)與果實(shí)中AsA、類黃酮的變化規(guī)律基本一致。采用qRT-PCR對這23個與AsA、類黃酮生物合成相關(guān)的基因進(jìn)行了表達(dá)驗(yàn)證,結(jié)果表明qRT-PCR與表達(dá)譜分析結(jié)果基本一致。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S661.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2627582