發(fā)布時(shí)間：2020-04-09 22:35

【摘要】：毛木耳是木耳屬食用菌之一,素有“樹(shù)上海蜇皮”之美稱(chēng),是一種天然的食藥用菌,為我國(guó)第六大主栽食用菌。隨著產(chǎn)業(yè)規(guī)模逐步擴(kuò)大,市場(chǎng)上對(duì)優(yōu)良品種的需求增加,種質(zhì)資源是優(yōu)良品種選育的基礎(chǔ),對(duì)種質(zhì)資源進(jìn)行全面的科學(xué)評(píng)價(jià),有利于科學(xué)利用優(yōu)良種質(zhì)特性。因此本研究從細(xì)胞學(xué)、形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、分子標(biāo)記四個(gè)方面對(duì)毛木耳種質(zhì)資源進(jìn)行評(píng)價(jià),建立綜合評(píng)價(jià)體系,篩選出具有開(kāi)發(fā)潛力的優(yōu)良菌株。具體研究結(jié)果如下:(1)細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià),對(duì)45株(野生菌株14株、栽培菌株13株、雜交菌株18株)毛木耳菌株進(jìn)行體細(xì)胞不親和性評(píng)價(jià),共配制990個(gè)對(duì)峙培養(yǎng)組合,結(jié)果表明99.89%的組合有拮抗線,說(shuō)明這些菌株體細(xì)胞不親和,具有生理特性差異;僅有Ac2和Ac4無(wú)拮抗線,說(shuō)明二者體細(xì)胞親和,親緣關(guān)系較近,未發(fā)現(xiàn)具有生理特性差異。(2)形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià),按照DUS標(biāo)準(zhǔn)原則開(kāi)展毛木耳農(nóng)藝性狀調(diào)查,均存在不同程度的差異,可以為毛木耳DUS的制定提供科學(xué)依據(jù)。其中25℃菌絲生長(zhǎng)速度范圍為1.10-4.70mm/d;菌絲邊緣整齊、不整齊分別占比24.44%、75.56%;菌落色素分泌明顯、不明顯分別占比60%、40%;菌絲體有膠質(zhì)物、無(wú)膠質(zhì)物分別占比20%、80%;耳片邊緣整齊、波浪分別占48.89%、51.11%;耳片腹面無(wú)、少、多褶皺分別占比33.33%、35.56%、31.11%;其中鮮耳腹面顏色為白色、淺粉色、紅褐色顏色分別約占35.56%、8.88%、55.56%;耳片質(zhì)地軟、硬分別占51.11%、48.89%;生育期為86-144天,早熟、中熟、晚熟分別占比20%、44.44%、35.56%;每100kg干料產(chǎn)毛木耳干重為0.45-6.88kg。高產(chǎn)型、中產(chǎn)型、低產(chǎn)型分別約占比24.44%、26.66%、48.9%;耳片干濕比為14.6%-22.5%。性狀聚類(lèi)結(jié)果將供試菌株分為八大類(lèi)群,能夠更清楚的比較菌株間的性狀。綜合所有農(nóng)藝性狀指標(biāo),篩選出2個(gè)特異毛木耳種質(zhì),1個(gè)早熟菌株Ac13、1個(gè)高產(chǎn)菌株Ac15,為毛木耳定向育種提供優(yōu)質(zhì)材料。(3)生物化學(xué)評(píng)價(jià),共檢測(cè)到313條酶帶,酶帶數(shù)量在3-8條不等,多數(shù)為5條和6條,共有36條遷移率(Rf)不同的酶帶,Rf分布范圍在0.261-0.585,其中Rf為0.423的酶帶E18最為穩(wěn)定,出現(xiàn)頻率達(dá)到為71.1%,酶帶E14(Rf=0.400)出現(xiàn)頻率為44.4%,酶帶E26(Rf=0.485)出現(xiàn)頻率為44.4%,這些譜帶可以作為供試菌株的高頻次譜帶。在相似系數(shù)為0.68時(shí)可以分為兩大類(lèi)群,類(lèi)群I有9個(gè)菌株,全部為野生菌株;類(lèi)群II包括36個(gè)菌株。在遺傳相似系數(shù)為0.715時(shí),類(lèi)群II又分為兩大亞群,亞群I有1株野生菌株、全部的雜交菌株和栽培菌株,亞群II包括4個(gè)菌株,全部為野生菌株。在細(xì)胞學(xué)評(píng)價(jià)中無(wú)拮抗線的2個(gè)菌株Ac2和Ac4,同工酶遺傳相似系數(shù)為0.935,存在一定遺傳差異性,說(shuō)明后者比前者在毛木耳種質(zhì)資源評(píng)價(jià)方面更為有效。(4)分子標(biāo)記評(píng)價(jià),基于毛木耳全基因開(kāi)發(fā)的144對(duì)引物中篩選出24對(duì)穩(wěn)定性好、多態(tài)性高的SSR引物用于毛木耳種質(zhì)資源評(píng)價(jià)。PopGene1.32共檢測(cè)到145個(gè)等位基因,多態(tài)性位點(diǎn)比率是100%,表明24對(duì)SSR引物在毛木耳種質(zhì)中具有較豐富的多態(tài)性。NTSYS-PC聚類(lèi)分析結(jié)果表明在遺傳相似系數(shù)0.71時(shí),可將供試菌株分為兩大類(lèi)群。類(lèi)群I包括16個(gè)雜交菌株及其栽培親本菌株Ac1;類(lèi)群II包括28個(gè)菌株,在相似系數(shù)為0.717時(shí)又分為兩個(gè)亞群,亞群I為全部為栽培菌株,亞群II為全部供試野生菌株14個(gè)、以野生菌株Ac13為親本的2個(gè)雜交菌株。聚類(lèi)結(jié)果表明利用SSR分子標(biāo)記可以將大部分雜交、栽培、野生菌株分開(kāi),從分子水平上揭示各菌株間的遺傳差異,較生物化學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果更詳細(xì),因此基于基因組開(kāi)發(fā)的SSR分子標(biāo)記適合于毛木耳種質(zhì)資源評(píng)價(jià)研究。
【圖文】：

親和組合無(wú)拮抗線（圖 1.2），這對(duì)組合是 Ac2 和 Ac4，說(shuō)明二者體細(xì)胞親和，親緣關(guān)系較近，，但這兩株菌株是否為同一菌株還需要其他評(píng)價(jià)方法驗(yàn)證。圖1.1 有拮抗線Fig.1.1 Have antagonistic lines圖1.2 無(wú)拮抗線Fig.1.2 No antagonistic line

圖1.1 有拮抗線Fig.1.1 Have antagonistic lines圖1.2 無(wú)拮抗線Fig.1.2 No antagonistic line
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S646.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2621343