【摘要】：榛子為榛科(Corylaceae)榛屬(Corylus L.)植物,其營養(yǎng)豐富,風(fēng)味獨特,深受消費者喜愛。榛子不僅擁有較高的營養(yǎng)價值,經(jīng)濟價值,還具有藥用價值和商業(yè)價值。從榛葉和樹干中可提煉出紫衫醇,更凸顯了榛子的研究價值。本研究利用SSR、SRAP兩種分子標(biāo)記研究榛屬種質(zhì)資源的遺傳多樣性及種間親緣關(guān)系,為我國榛屬資源保護、優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源的利用以及新品種選育提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.篩選出條帶清晰,多態(tài)性好的32對SSR引物、28對SRAP引物用于榛屬種質(zhì)資源的遺傳多樣性及親緣關(guān)系分析;對所選32對SSR引物進行了退火溫度的篩選,分別對SSR-PCR,SRAP-PCR擴增體系進行了優(yōu)化。2.SSR、SRAP引物的平均多態(tài)位點百分比分別是88.14%,100%。兩種分子標(biāo)記均能在榛屬植物中有效擴增,可以用于榛屬植物的遺傳多樣性研究�；赟SR標(biāo)記榛屬種質(zhì)資源的主要遺傳多樣性指數(shù):等位基因數(shù),有效等位基因數(shù),香農(nóng)指數(shù),Nei’s遺傳多樣性指數(shù)平均值分別是4.8125、3.6576、1.3803、0.714。基于SRAP標(biāo)記的榛屬種質(zhì)資源的主要遺傳多樣性指數(shù):等位基因數(shù),有效等位基因數(shù),香農(nóng)指數(shù),Nei’s遺傳多樣性指數(shù)平均值分別是1.8904、1.6468、0.5459、0.3701。兩種分子標(biāo)記在榛屬種質(zhì)資源的遺傳多樣性指數(shù)均說明榛屬植物有較高的遺傳多樣性。3.基于SSR標(biāo)記的榛屬資源種間遺傳多樣性指數(shù)可知,榛屬種間的遺傳多樣性大小依次為平榛平歐雜種榛華榛川榛歐榛毛榛絨苞榛�；赟RAP標(biāo)記的榛屬資源種間的遺傳多樣性指數(shù)可知榛屬種間的遺傳多樣性大小依次為歐榛平榛平歐雜種榛毛榛川榛華榛絨苞榛。兩種分子標(biāo)記均顯示我國原產(chǎn)的榛屬資源中平榛遺傳多樣性最高,絨苞榛遺傳多樣性最低。4.SSR標(biāo)記和SRAP標(biāo)記的分子方差分析結(jié)果均顯示榛屬植物的遺傳分化大多發(fā)生在種群內(nèi)(SSR=84%;SRAP=89%),少數(shù)發(fā)生在種群間。5.依據(jù)遺傳距離和遺傳一致度及聚類結(jié)果顯示平榛與平歐雜種榛的親緣關(guān)系最近,藏刺榛和絨苞榛的親緣關(guān)系最遠。聚類結(jié)果還顯示毛榛與平榛親緣關(guān)系較近,藏刺榛與川榛、華榛聚在一組親緣關(guān)系較近。滇榛與絨苞榛親緣關(guān)系近但與其它種親緣關(guān)系較遠。聚類結(jié)果與材料來源地有一定的相關(guān)性。兩種標(biāo)記雖然不能夠?qū)⑺虚粚俜N群完全區(qū)分開,但是聚類結(jié)果能夠在一定程度上反映了榛屬資源的遺傳多樣性和親緣關(guān)系。主坐標(biāo)分析與對應(yīng)分子標(biāo)記的聚類結(jié)果大致相同。
【圖文】：

1%瓊脂糖凝膠電泳檢測時，條帶明亮程度反映總DNA的濃度，條帶越亮DNA濃度越高。根據(jù)電泳槽干凈與否，條帶有無拖尾，是否有RNA條帶，條帶清晰程度來判斷DNA的質(zhì)量，若點樣孔無殘留，條帶明亮，且完整清晰，，無拖尾，無雜帶，表示此DNA可備選用。用紫外分光光度計檢測DNA濃度及純度時，依據(jù)OD260/OD280的比值評判DNA質(zhì)量;當(dāng)OD260/OD280<1.6時，說明DNA溶液中有多糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，OD260/OD280>1.9時，說明樣品中存在RNA等雜質(zhì)。OD260 /OD280 范圍在1.7～1.8之間的DNA溶液可備用(楊曉旭，2017)。3.2 SSR 引物及最佳退火溫度篩選結(jié)果3.2.1 SSR 引物篩選篩選引物的原則首先是引物擴增條帶清晰且能分清主條帶，其次是條帶具有多態(tài)性。從圖 1 中可以看出 1 號、2 號、3 號、5 號、7 號、8 號、9 號、10 號、11 號引物主條帶清晰且多態(tài)性好，個別有雜帶拖帶現(xiàn)象，但可以通過調(diào)節(jié)退火溫度得到改善。4 號、6號引物雖然多態(tài)性單一但條帶清晰，無雜帶可暫時選用，若在種群擴增多態(tài)性差時再棄之。12 號引物條帶不清晰棄之不用。

3 結(jié)果與分析選定前三個濃度（0.1U、0.15U、0.2U）為 Taq DNA 聚合酶基礎(chǔ)濃度；引物濃度在前兩個濃度時條帶較模糊，從第三個濃度開始條帶清晰，所以選擇 0.6μmol/L、0.8μmol/L、1.0μmol/L 作為基礎(chǔ)濃度；Mg2+濃度篩選中前四個濃度的條帶除第 2 濃度條帶模糊，其它 3 個濃度的條帶清晰，所以選定前三個濃度（0.5mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L）為基礎(chǔ)濃度。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S664.4

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5 關(guān)繼義,陳永亮,賈道興,劉義;榛屬群叢對土壤理化性質(zhì)影響的研究[J];植物研究;1998年03期

6 劉起銜,張燦明;中國榛屬植物一新種[J];植物研究;1990年01期

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8 ;林業(yè)科技動態(tài)[J];遼寧林業(yè)科技;1988年01期

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3 李京t

本文編號：2608895