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大鯢源弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定、敏感藥物篩選及耐藥性分析

發(fā)布時(shí)間:2025-04-26 23:39
  近年來,大鯢疾病頻發(fā),為了確定重慶某大鯢養(yǎng)殖場患病大鯢的病原菌,并進(jìn)行菌種鑒定及胞外酶活性研究,從具有典型癥狀的病鯢肝臟分離出一株菌株TNL12,根據(jù)形態(tài)學(xué)特征、生理生化特性以及16S rDNA分析對(duì)菌株進(jìn)行種類鑒定,通過人工感染試驗(yàn)確定病原菌株的致病性,利用平板法檢測(cè)胞外酶活性。結(jié)果顯示,所獲菌株為革蘭氏陰性短桿菌,無芽孢,其生理生化特性與弗氏檸檬酸桿菌一致。16S rDNA分析表明,TNL12與弗氏檸檬酸桿菌的同源性為99%,在系統(tǒng)發(fā)育樹與弗氏檸檬酸桿菌聚為一支。該病原菌可引起健康青蛙、大鯢出現(xiàn)感染癥狀,且感染癥狀與自然發(fā)病癥狀相似。胞外酶活性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該菌可產(chǎn)卵磷脂酶、淀粉酶,但不產(chǎn)脂酶、蛋白酶、明膠酶、脲酶等胞外酶。這些研究結(jié)果表明,從患病大鯢中分離出的病原菌為弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii),且對(duì)大鯢有較強(qiáng)的致病性。在大鯢病害防治的過程中,由于抗生素的不合理使用,使許多病原菌對(duì)抗生素產(chǎn)生了一定的抗性,為研究有效防治大鯢疾病的方法,采用紙片擴(kuò)散法研究所分離的病原菌對(duì)20種抗生素的敏感性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本次分離的病原菌TNL12為弗氏檸檬酸桿菌,對(duì)林可霉素類...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖5-1?45種中草藥對(duì)弗氏梓檬酸桿菌的抑制效果比例圖??

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圖5-1?45種中草藥對(duì)弗氏梓檬酸桿菌的抑制效果比例圖??f?Citrobacter?Freundii?on?the?Sensitivity?of?45?Kinds?of?Chinese?Medicinal?He表5-2?45種中草藥提取液對(duì)大鮑源弗氏梓檬酸桿菌的抑菌效果??


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圖6-1?MsrD基因電泳檢測(cè)圖??Figure?6-1?Electrophoresis?Map?of?MsrD?Gene?Detection??

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圖6-4耐P-內(nèi)酜胺類抗生素的耐藥基因檢測(cè)??Fiure?6-4?Resistant?Gene?Detection?on-lactams?Antibiotic??

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將實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到的所有目的基因送至華大基因科技有限公司(北京)進(jìn)行測(cè)序,所??得序列與NCBI中Genebank報(bào)道的基因序列進(jìn)行BLAST比對(duì),測(cè)得所得序列與大腸桿??菌中耐P-內(nèi)酰胺類抗生素抗性基因Tem同源性均達(dá)100%,比對(duì)結(jié)果如圖6-5,證明本??次分離于大鮑的弗氏梓檬酸....



本文編號(hào):4041542

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