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殼寡糖對(duì)魚類免疫、腸道菌群及外周血白細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的影響

發(fā)布時(shí)間:2024-11-01 23:43
  殼寡糖(Chitosan oligosaccharides)由殼聚糖酸水解或酶解、脫乙;,是N-乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖以β-1,4糖苷鍵連接而成的寡聚物。殼寡糖作為免疫增強(qiáng)劑可提高魚類的生長(zhǎng)性能、免疫功能及抗病性能等。本研究以俄羅斯鱘(Acipenser gueldenstaedti)為研究對(duì)象,在基礎(chǔ)飼料中添加殼寡糖,測(cè)定其對(duì)免疫、抗菌感染及腸道菌群的影響,分析在飼料中添加殼寡糖的可行性,并確定殼寡糖的最佳添加劑量和最佳飼喂時(shí)間,為生產(chǎn)實(shí)踐及環(huán)保養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù);另以半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)為研究對(duì)象,腹腔注射殼寡糖溶液,分析其對(duì)外周血白細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的影響,為今后探究殼寡糖如何影響基因功能提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:1.實(shí)驗(yàn)選取健康俄羅斯鱘(體重685.0±6.5 g,體長(zhǎng)45.5±5.5 cm,魚齡24個(gè)月)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料,實(shí)驗(yàn)組飼喂含殼寡糖的飼料(0.10%、0.30%、0.50%、0.75%、1.00%、1.50%質(zhì)量比),每組設(shè)置3個(gè)養(yǎng)殖池,每池100條魚。采用ELISA試劑盒檢測(cè)飼喂不同時(shí)間后鱘魚血清中的溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷...

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 不同濃度的殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘免疫指標(biāo)的影響
    1.1 材料和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼喂管理
        1.1.4 免疫因子測(cè)定
            1.1.4.1 溶菌酶活性測(cè)定
            1.1.4.2 免疫球蛋白M濃度測(cè)定
            1.1.4.3 補(bǔ)體C3 濃度測(cè)定
            1.1.4.4 酸性磷酸酶活性測(cè)定
            1.1.4.5 堿性磷酸酶活性測(cè)定
        1.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    1.2 結(jié)果分析
        1.2.1 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘血清中溶菌酶活性的影響
        1.2.2 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘血清中免疫球蛋白M濃度的影響
        1.2.3 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘血清中補(bǔ)體C3 濃度的影響
        1.2.4 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘血清中酸性磷酸酶活性的影響
        1.2.5 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘血清中堿性磷酸酶活性的影響
    1.3 討論
第二章 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘抗菌感染和免疫基因表達(dá)的影響
    2.1 材料和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.1.3 菌液制備
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼喂管理
        2.1.5 樣品采集與保存
        2.1.6 免疫基因的表達(dá)分析
            2.1.6.1 總RNA提取及c DNA合成
            2.1.6.2 免疫基因的表達(dá)分析
        2.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2.2 結(jié)果分析
        2.2.1 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘累積死亡率的影響
        2.2.2 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘組織中免疫基因表達(dá)的影響
    2.3 討論
第三章 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘腸道菌群的影響
    3.1 材料和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼喂管理
        3.1.4 樣品采集與保存
        3.1.5 DNA提取,收集PCR擴(kuò)增產(chǎn)物并測(cè)序
        3.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3.2 結(jié)果分析
        3.2.1 殼寡糖對(duì)腸道菌群多樣性的影響
        3.2.2 殼寡糖對(duì)俄羅斯鱘腸道菌群的影響的種群分析
        3.2.3 腸道菌群的進(jìn)化關(guān)系分析
        3.2.4 腸道菌群的功能注釋及代謝通路分析
    3.3 討論
第四章 殼寡糖對(duì)半滑舌鰨外周血白細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的影響
    4.1 材料和方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼喂管理
        4.1.4 樣品采集與細(xì)胞分離
        4.1.5 轉(zhuǎn)錄組測(cè)定
        4.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    4.2 結(jié)果分析
        4.2.1 半滑舌鰨轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果
        4.2.2 殼寡糖對(duì)半滑舌鰨外周血白細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組mRNA基因表達(dá)的影響
        4.2.3 半滑舌鰨轉(zhuǎn)錄組差異表達(dá)基因的功能注釋及代謝通路分析
    4.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    1 魚類簡(jiǎn)介
    2 魚類免疫系統(tǒng)
        2.1 免疫器官
        2.2 免疫細(xì)胞
        2.3 免疫因子
            2.3.1 溶菌酶(lysozyme)
            2.3.2 免疫球蛋白M(Immunoglobulin M)
            2.3.3 補(bǔ)體C3(Complement3)
            2.3.4 磷酸酶(phosphatase)
        2.4 免疫基因
    3 腸道微生物的研究進(jìn)展
        3.1 腸道微生物的研究進(jìn)展
        3.2 魚類腸道菌群的鑒定方法
    4 殼寡糖的研究現(xiàn)狀
        4.1 殼寡糖的功能
        4.2 殼寡糖在養(yǎng)殖中的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號(hào):4008680

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