為了解大黃魚(yú)胚胎在不同稀釋液與抗凍劑中的成活及超低溫冷凍保存的效果,開(kāi)展了大黃魚(yú)胚胎在不同稀釋液及抗凍劑中的成活試驗(yàn).結(jié)果表明,大黃魚(yú)原腸期胚胎在BS2稀釋液中培育30 min后的成活率與對(duì)照組無(wú)顯著差異,說(shuō)明BS2可能適合作胚胎冷凍保存用稀釋液;單一抗凍劑對(duì)大黃魚(yú)胚胎的毒性依次為丙二醇(PG)<甲醇(Me OH)<二甲基亞砜(DMSO)<二甲基甲酰胺(DMF)<乙二醇(EG),抗凍劑使部分胚胎的卵黃囊皺縮,胚體發(fā)生損傷,影響胚胎的成活率及孵化率;混合抗凍劑PMD(PG:Me OH:DMSO=9:6:5)對(duì)大黃魚(yú)心跳期胚胎的毒性較小,不影響胚胎的成活率及孵化率.以BS2為稀釋液,40%PMD為抗凍液,采用兩步降溫法進(jìn)行超低溫冷凍保存大黃魚(yú)胚胎試驗(yàn),解凍后成功復(fù)活卵裂期及尾芽期凍胚各1粒,原腸期凍胚2粒,心跳期凍胚3粒.

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【部分圖文】：

比較P>0.05.圖1原腸期胚胎在不同稀釋液中的成活率2.2單一抗凍劑對(duì)大黃魚(yú)胚胎成活的影響a表示與對(duì)照

第3期楊海燕,等:大黃魚(yú)胚胎在不同稀釋液及抗凍劑中的成活及超低溫冷凍保存試驗(yàn)9a表示與對(duì)照比較P>0.05.圖1原腸期胚胎在不同稀釋液中的成活率2.2單一抗凍劑對(duì)大黃魚(yú)胚胎成活的影響如圖2所示,不同抗凍劑對(duì)胚胎成活的影響不同.卵裂期、原腸期、尾芽期及心跳期胚胎經(jīng)20%PG處理30....

比較P>0.05.圖4混合抗凍劑處理下心跳期胚胎的成活率與孵化率0對(duì)照1:04:13:12:11:1抗凍劑PM與DMSO的比例a

,胚胎的成活率達(dá)87%以上,與對(duì)照組無(wú)顯著差異;PM與DMSO以3:1或2:1比例混合,胚胎的孵化率達(dá)80%以上,與對(duì)照組無(wú)顯著差異.綜合分析結(jié)果,認(rèn)為PM與DMSO以3:1,即PG、MeOH及DMSO以9:6:5混合配制的抗凍液(PMD)對(duì)胚胎的毒性最小,胚胎的成活率及孵化率分....

圖5胚胎冷凍對(duì)大黃魚(yú)胚胎形態(tài)特征的影響A、a:正常的尾芽期胚胎及體節(jié);B

期,心跳期最弱;田永勝等[19]以PMP1為抗凍劑冷凍大菱鲆(Scophthalmusmaximus)胚胎,發(fā)現(xiàn)4~5對(duì)肌節(jié)期胚胎的耐受能力最強(qiáng),尾芽期次之,心跳期及出膜前期胚胎耐受性較弱.研究不同發(fā)育階段胚胎對(duì)抗凍劑的耐受性,成活率與孵化率/%100806040200baaab....

本文編號(hào)：3979158