為了解大黃魚胚胎在不同稀釋液與抗凍劑中的成活及超低溫冷凍保存的效果,開展了大黃魚胚胎在不同稀釋液及抗凍劑中的成活試驗.結(jié)果表明,大黃魚原腸期胚胎在BS2稀釋液中培育30 min后的成活率與對照組無顯著差異,說明BS2可能適合作胚胎冷凍保存用稀釋液;單一抗凍劑對大黃魚胚胎的毒性依次為丙二醇(PG)<甲醇(Me OH)<二甲基亞砜(DMSO)<二甲基甲酰胺(DMF)<乙二醇(EG),抗凍劑使部分胚胎的卵黃囊皺縮,胚體發(fā)生損傷,影響胚胎的成活率及孵化率;混合抗凍劑PMD(PG:Me OH:DMSO=9:6:5)對大黃魚心跳期胚胎的毒性較小,不影響胚胎的成活率及孵化率.以BS2為稀釋液,40%PMD為抗凍液,采用兩步降溫法進行超低溫冷凍保存大黃魚胚胎試驗,解凍后成功復活卵裂期及尾芽期凍胚各1粒,原腸期凍胚2粒,心跳期凍胚3粒.

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【部分圖文】：

比較P>0.05.圖1原腸期胚胎在不同稀釋液中的成活率2.2單一抗凍劑對大黃魚胚胎成活的影響a表示與對照

第3期楊海燕,等:大黃魚胚胎在不同稀釋液及抗凍劑中的成活及超低溫冷凍保存試驗9a表示與對照比較P>0.05.圖1原腸期胚胎在不同稀釋液中的成活率2.2單一抗凍劑對大黃魚胚胎成活的影響如圖2所示,不同抗凍劑對胚胎成活的影響不同.卵裂期、原腸期、尾芽期及心跳期胚胎經(jīng)20%PG處理30....

比較P>0.05.圖4混合抗凍劑處理下心跳期胚胎的成活率與孵化率0對照1:04:13:12:11:1抗凍劑PM與DMSO的比例a

,胚胎的成活率達87%以上,與對照組無顯著差異;PM與DMSO以3:1或2:1比例混合,胚胎的孵化率達80%以上,與對照組無顯著差異.綜合分析結(jié)果,認為PM與DMSO以3:1,即PG、MeOH及DMSO以9:6:5混合配制的抗凍液(PMD)對胚胎的毒性最小,胚胎的成活率及孵化率分....

圖5胚胎冷凍對大黃魚胚胎形態(tài)特征的影響A、a:正常的尾芽期胚胎及體節(jié);B

期,心跳期最弱;田永勝等[19]以PMP1為抗凍劑冷凍大菱鲆(Scophthalmusmaximus)胚胎,發(fā)現(xiàn)4~5對肌節(jié)期胚胎的耐受能力最強,尾芽期次之,心跳期及出膜前期胚胎耐受性較弱.研究不同發(fā)育階段胚胎對抗凍劑的耐受性,成活率與孵化率/%100806040200baaab....

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