信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)屬于分類的DNA結(jié)合蛋白家族,是一種廣譜轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,具有一些保守的結(jié)構(gòu)域,例如N-末端結(jié)構(gòu)域,卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域,DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和SH2結(jié)構(gòu)域。在哺乳動(dòng)物中,病毒、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和IFN-α都可激活STAT6。磷酸化的STAT6發(fā)生同源二聚化然后移位至細(xì)胞核,將信號(hào)從受體復(fù)合物傳遞到細(xì)胞核以調(diào)節(jié)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)進(jìn)而參與正常的細(xì)胞反應(yīng)。近年來(lái),有研究表明STAT6不但在免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)過(guò)程中起重要作用,而且還參與細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡等活動(dòng)。STAT6通過(guò)調(diào)節(jié)免疫相關(guān)基因和各種細(xì)胞凋亡功能基因來(lái)參與細(xì)胞免疫應(yīng)答和細(xì)胞凋亡。STAT6調(diào)節(jié)各種免疫細(xì)胞、趨化因子CCL2、CCL20和CCL26的轉(zhuǎn)錄和表達(dá),負(fù)責(zé)免疫細(xì)胞歸巢,參與細(xì)胞炎癥反應(yīng)。另一方面,STAT6通過(guò)上調(diào)各種抗凋亡基因的表達(dá)來(lái)抑制細(xì)胞凋亡。例如,IL-4的抗細(xì)胞凋亡活性是通過(guò)激活STAT6和隨后Bcl-xl的轉(zhuǎn)錄表達(dá)來(lái)介導(dǎo)。相反,STAT6沉默誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因Bax的表達(dá)并抑制抗凋亡基因Bcl-xl的表達(dá)。簡(jiǎn)而言之,STAT6具有多種生物學(xué)功能。STAT6的結(jié)構(gòu),表達(dá)和基于酪氨酸的磷酸化...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 前言
    1.1 STATS家族
    1.2 STAT6
        1.2.1 STAT6蛋白的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 STAT6生物學(xué)功能
        1.2.3 STAT6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
    1.3 CCL20 的生物學(xué)功能
    1.4 BCL-XL的生物學(xué)功能
    1.5 魚類STAT6研究進(jìn)展
    1.6 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備
        2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑盒
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 細(xì)胞株、載體與菌種
    2.3 實(shí)驗(yàn)材料
    2.4 相關(guān)軟件
    2.5 引物表
    2.6 實(shí)驗(yàn)方法
        2.6.1 草魚STAT6全長(zhǎng)cDNA的克隆
        2.6.2 草魚CCL20 啟動(dòng)子的克隆
        2.6.3 草魚STAT6的系統(tǒng)進(jìn)化分析
        2.6.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.6.5 草魚STAT6在CIK細(xì)胞與組織中的表達(dá)水平分析
        2.6.6 真核表達(dá)載體構(gòu)建
        2.6.7 草魚STAT6亞細(xì)胞定位
        2.6.8 草魚STAT6同源二聚化
        2.6.9 草魚STAT6調(diào)控CCL20和BCL-XL
        2.6.10 草魚STAT6增強(qiáng)細(xì)胞存活率和抗凋亡機(jī)制
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 草魚STAT6的克隆及其分析
        3.1.1 草魚STAT6全長(zhǎng)c DNA的克隆
        3.1.2 草魚STAT6基因序列分析
        3.1.3 草魚STAT6基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析
    3.2 草魚STAT6基因的定量表達(dá)分析
        3.2.1 草魚STAT6基因的組織表達(dá)分析
        3.2.2 草魚STAT6基因在CIK細(xì)胞中的表達(dá)分析
    3.3 草魚STAT6的同源二聚化分析
        3.3.1 草魚STAT6亞細(xì)胞定位分析
        3.3.2 免疫熒光共定位分析
        3.3.3 免疫共沉淀分析
    3.4 草魚STAT6對(duì)CCL20和BCL-XL轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析
        3.4.1 雙熒光素酶分析
        3.4.2 過(guò)表達(dá)草魚STAT6,CCL20和BCL-XL實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        3.4.3 敲降草魚STAT6,CCL20和BCL-XL實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
    3.5 草魚STAT6對(duì)細(xì)胞活力的影響
    3.6 草魚STAT6抑制細(xì)胞凋亡
        3.6.1 Hoechst33258 染色分析
        3.6.2 TUNEL分析
第四章 討論
第五章 主要結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及研究展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3970647