為探究溫度和亞硝酸鹽對草魚(ctenopharyngodon idellus)組織細胞的應激作用及其細胞水平的反應機理,本文進行了以下三個方面的研究：(1)溫度對草魚腎細胞(CIK)的氧化與抗氧化指標及抗氧化物酶相關基因表達水平的影響；(2)亞硝酸鹽對草魚離體血細胞的胞內氧化及抗氧化指標、血紅蛋白及高鐵血紅蛋白含量、及抗氧化物酶相關基因表達水平的影響;(3)亞硝酸鹽對草魚離體肝細胞的抗氧化物酶活性的影響。 在研究(1)中采用的實驗細胞為來自華中農(nóng)業(yè)大學水產(chǎn)學院的CIK傳代細胞。在研究(2)和(3)中采用體質量為(65.8±5.5)g的草魚幼魚為材料,在無菌條件下提取草魚血細胞并制備離體肝細胞,設置3個亞硝酸鹽暴露組(1.0mg/L、10.0mg/L、100.0mg/L)和1個空白對照組(0mg/L組),各實驗組設置3個重復,離體血細胞實驗分別暴露0h、3h、6h、12h、24h,離體肝細胞實驗分別暴露0h、6h、12h、24h、48h、96h。研究結果如下： 1.溫度對草魚腎細胞的氧化應激水平的影響 在急性溫度變化下,無論升高溫度4℃或者降低溫度4℃都會導致胞內氧化應激水平發(fā)生改變,這...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻綜述
    1.1 溫度和亞硝酸鹽對水生動物的抗氧化系統(tǒng)和組織器官的影響
    1.2 氧化應激的產(chǎn)生與活性氧對水生動物的影響
    1.3 氧化應激與水生動物的非特異性免疫反應
    1.4 氧化應激對水生動物基因表達水平的作用機制及其影響
    1.5 研究目的與意義
第二章 溫度對草魚腎細胞的氧化應激水平的影響
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 草魚腎細胞的培養(yǎng)
        2.2.2 草魚腎細胞的處理
        2.2.3 活性氧的檢測
        2.2.4 線粒體跨膜電位的檢測
        2.2.5 抗氧化相關指標的檢測
        2.2.6 蛋白質及脂質氧化損傷的檢測
        2.2.7 抗氧化物酶基因表達的定量PCR檢測方法
    2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.4 結果與分析
        2.4.1 溫度對CIK細胞內活性氧的影響
        2.4.2 氧化損傷指標
        2.4.3 抗氧化物酶活性
        2.4.4 氧化還原狀態(tài)
        2.4.5 抗氧化酶基因的轉錄水平
    2.5 討論
第三章 亞硝酸鹽對草魚血細胞的氧化應激水平的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 離體血細胞的培養(yǎng)
        3.2.2 實驗設計
        3.2.3 血細胞內活性氧的檢測
        3.2.4 血細胞線粒體跨膜電位的檢測
        3.2.5 血細胞內抗氧化防御相關指標的檢測
        3.2.6 血細胞內脂質損傷水平及血紅蛋白和高鐵血紅蛋白的檢測
        3.2.7 血細胞內抗氧化物酶基因表達的定量PCR檢測方法
    3.3 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結果與分析
        3.4.1 亞硝酸鹽對血細胞的活性氧的影響
        3.4.2 亞硝酸鹽對血細胞的氧化損傷狀態(tài)指標的影響
        3.4.3 亞硝酸鹽對血細胞內血紅蛋白和高鐵血紅蛋白含量的影響
        3.4.4 亞硝酸鹽對血細胞內抗氧化相關酶活的影響
        3.4.5 亞硝酸鹽對血細胞內氧化還原狀態(tài)指標的影響
        3.4.6 亞硝酸鹽對血細胞內抗氧化物酶基因表達的影響
    3.5 討論
第四章 亞硝酸鹽暴露對草魚離體肝細胞氧化應激水平的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 離體肝細胞的獲取
        4.2.2 實驗設計
        4.2.3 肝細胞內抗氧化相關指標的檢測
    4.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結果與分析
        4.4.1 亞硝酸鹽對離體肝細胞的超氧化物歧化酶的影響
        4.4.2 亞硝酸鹽對離體肝細胞的過氧化氫酶的影響
        4.4.3 亞硝酸鹽對離體肝細胞的乳酸脫氫酶的影響
        4.4.4 亞硝酸鹽對離體肝細胞的谷胱甘肽轉移酶的影響
        4.4.5 亞硝酸鹽對離體肝細胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影響
        4.4.6 亞硝酸鹽對離體肝細胞的谷胱甘肽的影響
        4.4.7 亞硝酸鹽對離體肝細胞的總抗氧化能力的影響
    4.5 討論
參考文獻
致謝



本文編號：3946586