青蝦,學(xué)名日本沼蝦(Macrobrachium nipponense),俗稱河蝦,是我國重要淡水養(yǎng)殖品種之一。由于青蝦等甲殼類動物在生長發(fā)育過程中會經(jīng)歷多次蛻殼,常用的體外標(biāo)記會隨著蛻殼而丟失,同時由于青蝦個體小而且離水極易死亡,體內(nèi)標(biāo)記也難以使用,個體標(biāo)記和識別是青蝦選育面臨的主要困難之一。使用DNA分子標(biāo)記進(jìn)行親緣關(guān)系分析可以克服蛻殼的制約,對青蝦的損傷也很小,因此建立一種基于DNA分子標(biāo)記的青蝦親子鑒定技術(shù)具有重要意義。微衛(wèi)星具有多態(tài)性高、共顯性遺傳等優(yōu)點(diǎn),目前在水產(chǎn)動物親子鑒定和數(shù)量性狀相關(guān)基因研究中得到廣泛應(yīng)用,但迄今未見微衛(wèi)星應(yīng)用于青蝦親子鑒定的報道。本文從本實(shí)驗(yàn)室已開發(fā)的微衛(wèi)星中篩選得到適用于親子鑒定的微衛(wèi)星組合,對3個全同胞家系進(jìn)行親子鑒定分析,并評估微衛(wèi)星標(biāo)記的鑒別能力,建立青蝦親子鑒定技術(shù),同時為給青蝦的性狀相關(guān)分子標(biāo)記的篩選提供一定參考數(shù)據(jù),本文通過對微衛(wèi)星位點(diǎn)與青蝦體長、體重的相關(guān)性進(jìn)行分析,初步篩選與生長性狀相關(guān)的微衛(wèi)星位點(diǎn)。從本實(shí)驗(yàn)室已開發(fā)的微衛(wèi)星位點(diǎn)中,選擇30對多態(tài)性較高的微衛(wèi)星引物進(jìn)行進(jìn)一步篩選,通過對太湖野生群體16個隨機(jī)個體的DNA檢測,挑選條帶清...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    第一節(jié) 分子標(biāo)記概述及其在甲殼動物中的應(yīng)用
        1 分子標(biāo)記概述
            1.1 限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)
            1.2 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(AFLP)
            1.3 微衛(wèi)星DNA分子標(biāo)記(SSR)
            1.4 單核苷酸多態(tài)性(SNP)
            1.5 其他分子標(biāo)記
        2 分子標(biāo)記在甲殼類動物遺傳育種中的應(yīng)用
            2.1 遺傳多樣性分析
            2.2 遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
            2.3 經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的分子標(biāo)記篩選
            2.4 親緣關(guān)系鑒定
                2.4.1 親緣關(guān)系鑒定的原理
                2.4.2 可用于親緣關(guān)系鑒定的標(biāo)記
                2.4.3 親緣關(guān)系鑒定概率
    第二節(jié) 本研究的目的意義
第二章 基于微衛(wèi)星標(biāo)記的青蝦親子鑒定技術(shù)建立
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)用青蝦
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法及操作
        2.1 青蝦基因組DNA提取
        2.2 基因組DNA電泳檢測
        2.3 微衛(wèi)星引物合成
        2.4 PCR引物的擴(kuò)增反應(yīng)及電泳檢測
        2.5 聚丙烯酰胺凝膠的制備及電泳
        2.6 聚內(nèi)烯酰胺凝膠的染色
        2.7 微衛(wèi)星引物篩選
        2.8 親子鑒定分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 微衛(wèi)星分型
        3.2 家系遺傳多樣性分析
        3.3 微衛(wèi)星位點(diǎn)排除率及模擬鑒定率分析
        3.4 家系鑒定率
    4 討論
        4.1 微衛(wèi)星位點(diǎn)的選擇
        4.2 模擬分析與家系鑒定
        4.3 建立青蝦親子鑒定技術(shù)的意義
第三章 青蝦生長性狀相關(guān)微衛(wèi)星標(biāo)記的初步篩選
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)用青蝦
        1.2 主要儀器與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法及操作
        2.1 青蝦DNA的提取
        2.2 微衛(wèi)星引物的合成
        2.3 PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物檢測
        2.4 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 性狀的表型值分布
        3.2 微衛(wèi)星位點(diǎn)的多態(tài)性
        3.3 微衛(wèi)星位點(diǎn)與體長、體重的相關(guān)分析
    4 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
碩士期間發(fā)表的文章或?qū)＠?br>


本文編號：3933227