隨著抗菌藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中用量的增加及混合使用現(xiàn)象的出現(xiàn),水產(chǎn)病原菌表現(xiàn)出更強的耐藥性甚至是多重耐藥性,大大增加了水產(chǎn)養(yǎng)殖中細菌性病害防治的難度。細菌耐藥性最常見的傳遞方式是耐藥質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移。本研究通過對多個水產(chǎn)致病弧菌質(zhì)粒上新霉素及卡那霉素的耐藥基因aph(3’)-IIa進行檢測分析,并利用電穿孔法將篩選得到的3個受試菌株上的質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌中,結(jié)果從3個轉(zhuǎn)化子中檢測到目的基因。進一步的藥敏測試結(jié)果顯示, 3個轉(zhuǎn)化子的最小抑菌濃度(MIC值)以及最小殺菌濃度(MBC值)均明顯上升�？梢�,在特定條件下,水生致病性弧菌對氨基糖苷類(新霉素和卡那霉素)的耐藥質(zhì)�？赊D(zhuǎn)移至大腸桿菌并參與介導(dǎo)其耐藥性,大大降低了受體菌對新霉素和卡那霉素的敏感性。本研究將為環(huán)境弧菌與臨床細菌對氨基糖苷類藥物的抗性傳遞研究提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和參考依據(jù)。

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【部分圖文】：

圖1水產(chǎn)致病菌藥物耐藥率分析

根據(jù)表2的藥敏實驗判定標(biāo)準(zhǔn),對7株受試菌針對8類共14種抗菌藥物的敏感性進行判斷,7株受試菌均表現(xiàn)耐藥(如圖1),其中編號B2D的菌株對受試的14種藥物均表現(xiàn)為耐藥(即對受試藥物耐藥比例為100%),7株受試菌均對3類以上抗生素表現(xiàn)耐藥,多重耐藥率為100%;且7個菌株均對受試的....

圖2耐藥菌質(zhì)粒電泳圖

將藥敏實驗所篩選得到的耐藥菌通過質(zhì)粒提取試劑盒的處理,分析質(zhì)粒攜帶情況(如圖2)結(jié)果發(fā)現(xiàn),7株受試菌均攜帶質(zhì)粒,質(zhì)粒攜帶率為100%,每株受試菌攜帶質(zhì)粒大小約為1kb,均為小型質(zhì)粒。用ddH2O代替質(zhì)粒DNA作為陰性對照,以質(zhì)粒DNA和基因組DNA作為模板,對氨基糖苷類耐藥基....

圖3質(zhì)粒DNA耐藥基因aph(3′)-ⅡaPCR產(chǎn)物電泳結(jié)果

用ddH2O代替質(zhì)粒DNA作為陰性對照,以質(zhì)粒DNA和基因組DNA作為模板,對氨基糖苷類耐藥基因aph(3′)-Ⅱa進行PCR擴增。質(zhì)粒DNA耐藥基因擴增結(jié)果如圖3所示,受試菌BBX1、BBXP1、NA0301、9H7均分別擴增出677bp的特異性片段且無其他雜帶出現(xiàn)。以相應(yīng)....

圖4基因組DNA耐藥基因aph(3′)-ⅡaPCR產(chǎn)物電泳結(jié)果

對在質(zhì)粒DNA上檢測出特異片段同時在相應(yīng)基因組DNA上未檢出特異片段的3株受試菌(BBX1、BBXP1和NA0301)進行耐藥基因測序,用DNAstarMegAlign軟件對耐藥基因測序結(jié)果進行分析,結(jié)果表明BBX1、BBXP1、NA0301中的aph(3′)-Ⅱa耐藥基因與....

本文編號：3927840