斑節(jié)對蝦細(xì)胞周期蛋白Y和E基因的克隆及相關(guān)表達(dá)分析
發(fā)布時間:2024-03-09 14:04
斑節(jié)對蝦屬于甲殼綱(Crustacea)、十足目(Decapoda)、游泳亞目(Natantia)、對蝦科(penaeidae)、對蝦屬(penaeus),是對蝦屬中較大一種,具有很高的經(jīng)濟(jì)和營養(yǎng)價值[1]。但是,在斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖過程中,親蝦繁育技術(shù)一直是一個非常重要的限制因素[2,3]。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們越來越關(guān)注甲殼類動物尤其是對蝦中細(xì)胞周期蛋白基因的功能,對細(xì)胞周期蛋白的分子調(diào)控機(jī)制已有所研究。細(xì)胞周期蛋白是參與細(xì)胞周期調(diào)控的重要因子,細(xì)胞周期中,細(xì)胞周期蛋白家族的變化決定著細(xì)胞周期中的一系列過程[4],如DNA復(fù)制、染色體加倍、時相轉(zhuǎn)換、細(xì)胞周期的起始與結(jié)束等等。有研究報道,在斑節(jié)對蝦性腺發(fā)育的相關(guān)功能基因中,細(xì)胞周期素對其正常的生長、繁殖、發(fā)育和遺傳具有決定性作用[5]。因此,在對斑節(jié)對蝦親蝦繁育的探尋和研究中[6,7],與斑節(jié)對蝦卵巢發(fā)育相關(guān)的細(xì)胞周期蛋白家族基因成為研究熱點。在本研究中,從分子水平和蛋白水平層面,我們對斑節(jié)對蝦的細(xì)胞周期蛋白Y(Pm-cyclin Y)基因進(jìn)行了研究,探索Pm-cyclin Y與斑節(jié)對蝦卵巢發(fā)育的相關(guān)性,以期為斑節(jié)對蝦卵巢發(fā)育的分...
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3923528
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【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1.細(xì)周期進(jìn)程及重要細(xì)周期蛋白的調(diào)控路圖
上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文表達(dá)趨勢[36-38],周期蛋白E則與M期晚期及G1期早期開始表達(dá)并一直持續(xù)到G期的末期(如圖1-1)。
圖1-4.實驗技術(shù)路圖
圖1-4.實驗技術(shù)路圖Fig.1-4Experimentaltechnologyroadmap
圖2-1斑節(jié)對蝦卵巢組織總RNA電泳圖譜
28S和18S兩條條帶(常用于衡量RNA質(zhì)量指標(biāo))清晰,表明提取的總RNA可以用于進(jìn)行后續(xù)實驗。(如圖2-1)
圖2-2逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物質(zhì)量檢測意圖
得到單一且清亮的目的條帶,證明逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA可以作為,用于后續(xù)實驗(如圖2-2)。將逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA分裝,并將分裝的一部即近期實驗會用到的部分,放置在-20℃冰箱;將剩余的分裝產(chǎn)物,標(biāo)號放在℃冰箱。
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