發(fā)布時(shí)間：2024-03-03 14:47

　　研究背景先天免疫是單細(xì)胞生物到高等動物普遍具有的一種抵御外界病原微生物入侵的天然防御機(jī)制,是宿主進(jìn)行自我保護(hù)的基礎(chǔ)。無脊椎動物中只存在有先天免疫系統(tǒng),之前在果蠅和線蟲為代表的模式生物中對先天免疫系統(tǒng)的研究取得了較大進(jìn)展。近年來,以對蝦為代表的海洋無脊椎動物養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展,但由病原微生物引起的各種疾病給這些養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大損失。所以,我們研究對蝦的先天免疫機(jī)制,旨在為相關(guān)產(chǎn)業(yè)的病害防治提供理論上的依據(jù)和技術(shù)上的支持。研究的科學(xué)問題及意義已知,在需氧生物中,由過氧化氫酶,過氧化物還原酶和超氧化物歧化酶等組成的酶促反應(yīng)抗氧化系統(tǒng)在生物體的先天免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。我們前期的研究結(jié)果表明,過氧化物還原酶4(Peroxiredoxin,Prx4),作為一類多功能的、廣泛分布的硫醇依賴性的抗氧化蛋白,可以參與到對蝦抗病毒免疫過程中。但是其分子機(jī)制尚不明確。本論文研究發(fā)現(xiàn)WSSV感染可以促進(jìn)對蝦Prx4蛋白分泌到血淋巴中,作為損傷相關(guān)分子模式(Damage-associated signaling molecules,DAMPs)促進(jìn)血細(xì)胞中NF-kappa B轉(zhuǎn)錄因子的同源蛋白Dorsal入核...

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.2酶促反應(yīng)抗氧系統(tǒng)(FujiiandIkeda，ZooZb)

Ｆｉｇ?１．２?Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ?ｓｙｓｔｅｍ?（Ｆｕｊｉｉ?ａｎｄ?Ｉｋｅｄａ，?２００２ｂ）．??Ｐｎｃ的結(jié)構(gòu)及分類在哺乳動物中了解的較為清楚。哺乳動物中的Ｐｎｃ由六個(gè)??亞家族組成，即Ｐｒｘｌ、Ｐｉ＿ｘ２、Ｐｒｘ３、Ｐｒｘ４、Ｐｒ....

圖1.3哺乳動物中6種prx亞型的結(jié)構(gòu)簡圖(Fujiiand撅da，ZooZb)

３、過氧化物還原酶與先天免疫??近年來，越來越多的證據(jù)證明幾種Ｐｒｘ亞型成員參與一些生理病理過程如組??織修復(fù)、寄生蟲感染和腫瘤發(fā)展，也在動物先天免疫反應(yīng)中發(fā)揮功能。??在脊椎動物中，當(dāng)小鼠的巨噬細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受到脂多糖ＬＰＳ的刺激??時(shí)，Ｐｒｘｌ、Ｐｒｘ５會上調(diào)表達(dá)，上調(diào)的....

圖２．１?ＷＳＳＶ感染上調(diào)Ａ／ｙＰｒｘ４表達(dá)和分泌

進(jìn)行了?ＭｙＰｒｘ４的體外重組表達(dá)、純化和抗體制備。我們通過大腸桿菌（Ｋｃｏ／／）??Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３）表達(dá)成熟歸Ｐｒｘ４，并通過親和純化獲得神Ｐｒｘ４重組蛋白（ｒＡ辦Ｐｒｘ４?）。??ｒＭｊＰｒｘ４的分子量是３３ｋＤａ，它主要表達(dá)在上清中（圖２．１Ｂ）。我們使用純化的??....

圖２．２Ｃ是重組蛋白ｒＴ＾Ｐｒｘ４的酶活性檢測結(jié)果

ｐ°＾ｎ?—■■ｎｓ?ｈ??＂Ｊ?０．０?ＩＩ?，?Ｉ?１?Ｉ?１?ｉ?，—??Ｔｉｍｅ?ｐｏｓｔ－ｃｈａｌｌｅｎｇｅ?ｗｉｔｈ?ＷＳＳＶ（ｈ）??圖２．２胞外的均‘Ｐｒｘ４可以促進(jìn)Ｄｏｒｓａｌ入核。（Ａ）血細(xì)胞中Ｄｏｒｓａ丨在ＷＳＳＶ病??２８??

本文編號：3917948