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過(guò)氧化物還原酶(Peroxiredoxin)4在日本囊對(duì)蝦抗WSSV病毒感染中的功能與機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-03 14:47
  研究背景先天免疫是單細(xì)胞生物到高等動(dòng)物普遍具有的一種抵御外界病原微生物入侵的天然防御機(jī)制,是宿主進(jìn)行自我保護(hù)的基礎(chǔ)。無(wú)脊椎動(dòng)物中只存在有先天免疫系統(tǒng),之前在果蠅和線蟲(chóng)為代表的模式生物中對(duì)先天免疫系統(tǒng)的研究取得了較大進(jìn)展。近年來(lái),以對(duì)蝦為代表的海洋無(wú)脊椎動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展,但由病原微生物引起的各種疾病給這些養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了巨大損失。所以,我們研究對(duì)蝦的先天免疫機(jī)制,旨在為相關(guān)產(chǎn)業(yè)的病害防治提供理論上的依據(jù)和技術(shù)上的支持。研究的科學(xué)問(wèn)題及意義已知,在需氧生物中,由過(guò)氧化氫酶,過(guò)氧化物還原酶和超氧化物歧化酶等組成的酶促反應(yīng)抗氧化系統(tǒng)在生物體的先天免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用。我們前期的研究結(jié)果表明,過(guò)氧化物還原酶4(Peroxiredoxin,Prx4),作為一類多功能的、廣泛分布的硫醇依賴性的抗氧化蛋白,可以參與到對(duì)蝦抗病毒免疫過(guò)程中。但是其分子機(jī)制尚不明確。本論文研究發(fā)現(xiàn)WSSV感染可以促進(jìn)對(duì)蝦Prx4蛋白分泌到血淋巴中,作為損傷相關(guān)分子模式(Damage-associated signaling molecules,DAMPs)促進(jìn)血細(xì)胞中NF-kappa B轉(zhuǎn)錄因子的同源蛋白Dorsal入核...

【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.2酶促反應(yīng)抗氧系統(tǒng)(FujiiandIkeda,ZooZb)

圖1.2酶促反應(yīng)抗氧系統(tǒng)(FujiiandIkeda,ZooZb)

Fig?1.2?Enzymatic?reaction?antioxidant?system?(Fujii?and?Ikeda,?2002b).??Pnc的結(jié)構(gòu)及分類在哺乳動(dòng)物中了解的較為清楚。哺乳動(dòng)物中的Pnc由六個(gè)??亞家族組成,即Prxl、Pi_x2、Prx3、Prx4、Pr....


圖1.3哺乳動(dòng)物中6種prx亞型的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖(Fujiiand撅da,ZooZb)

圖1.3哺乳動(dòng)物中6種prx亞型的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖(Fujiiand撅da,ZooZb)

3、過(guò)氧化物還原酶與先天免疫??近年來(lái),越來(lái)越多的證據(jù)證明幾種Prx亞型成員參與一些生理病理過(guò)程如組??織修復(fù)、寄生蟲(chóng)感染和腫瘤發(fā)展,也在動(dòng)物先天免疫反應(yīng)中發(fā)揮功能。??在脊椎動(dòng)物中,當(dāng)小鼠的巨噬細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受到脂多糖LPS的刺激??時(shí),Prxl、Prx5會(huì)上調(diào)表達(dá),上調(diào)的....


圖2.1?WSSV感染上調(diào)A/yPrx4表達(dá)和分泌

圖2.1?WSSV感染上調(diào)A/yPrx4表達(dá)和分泌

進(jìn)行了?MyPrx4的體外重組表達(dá)、純化和抗體制備。我們通過(guò)大腸桿菌(Kco//)??Rosetta(DE3)表達(dá)成熟歸Prx4,并通過(guò)親和純化獲得神Prx4重組蛋白(rA辦Prx4?)。??rMjPrx4的分子量是33kDa,它主要表達(dá)在上清中(圖2.1B)。我們使用純化的??....


圖2.2C是重組蛋白rT^Prx4的酶活性檢測(cè)結(jié)果

圖2.2C是重組蛋白rT^Prx4的酶活性檢測(cè)結(jié)果

p°^n?—■■ns?h??"J?0.0?II?,?I?1?I?1?i?,—??Time?post-challenge?with?WSSV(h)??圖2.2胞外的均‘Prx4可以促進(jìn)Dorsal入核。(A)血細(xì)胞中Dorsa丨在WSSV病??28??



本文編號(hào):3917948

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