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草魚IPS-1基因應(yīng)對(duì)GCRV感染及病毒和細(xì)菌類似物刺激的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2024-02-27 10:33
  草魚(Ctenopharyngodon idella)在我國(guó)淡水養(yǎng)殖中占有重要的地位,但草魚呼腸孤病毒引起的草魚出血病嚴(yán)重影響了草魚養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。草魚是低等脊椎動(dòng)物,先天性免疫在草魚免疫系統(tǒng)中占據(jù)重要地位,因此研究草魚先天免疫相關(guān)基因的抗病機(jī)理將為草魚出血病的治療奠定理論基礎(chǔ)。 IPS-1(IFN-β promoter stimulator1,IPS-1)是RLRs(retinoic acid-inducible gene-I(RIG-I)-like receptors,RLRs)家族重要的接頭分子,在RLRs介導(dǎo)的抗病毒免疫反應(yīng)中起重要作用。草魚IPS-1(CiIPS-1)蛋白包含N端的CARD(caspase activation andrecruitment domain,CARD)、中間的多脯氨酸結(jié)構(gòu)域(proline-rich domain,PRO)、一個(gè)TRAF2(tumour-necrosis factor receptor associated factor,TRAF)結(jié)合位點(diǎn)和一個(gè)C端的跨膜域(terminal transmembrane,TM)。在哺乳動(dòng)物中研究表明...

【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1RLRs介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控(YoneyamaandFujita2007)

圖1-1RLRs介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)控(YoneyamaandFujita2007)

和MDA5識(shí)別RNA的能力有所不同,更能促進(jìn)MDA5與RNA病毒的結(jié)合,這可能與RIG-I和MDA5對(duì)不同dsRNA的親和力不同造成的(Pippigetal.2009)。RIG-I和MDA5基因蛋白以不活躍的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中,病毒入侵后,R....


圖1-2RLRs/IPS-1介導(dǎo)的信號(hào)通路(RamosandGale2011)

圖1-2RLRs/IPS-1介導(dǎo)的信號(hào)通路(RamosandGale2011)

圖1-2RLRs/IPS-1介導(dǎo)的信號(hào)通路(RamosandGale2011)Fig.1-2IPS-1mediatedsignalingpathwaythroughRLRs(RamosandGale2011)-1基因介導(dǎo)的先天性免疫信號(hào)通路S-....


圖2-1pCMV-EGFP-CMV-SV40質(zhì)粒圖

圖2-1pCMV-EGFP-CMV-SV40質(zhì)粒圖

Forwardprimer,10mM)0.8Reserveprimer,10mM)0.8TP(10mM)0.8Buffer2Cl2(25mM)2Taq聚合酶0.22O11.8總體積20(1循環(huán)),94oC,3min;熱循環(huán)(30循環(huán)),設(shè)計(jì)引物預(yù)測(cè)溫....


圖2-3CiIPS-1全長(zhǎng)及其結(jié)構(gòu)域的過表達(dá)載體質(zhì)粒圖

圖2-3CiIPS-1全長(zhǎng)及其結(jié)構(gòu)域的過表達(dá)載體質(zhì)粒圖

通過EcoRI和ApaI雙酶切,將CiIPS-1全長(zhǎng)基因及其結(jié)構(gòu)域片段引入過表達(dá)載體pCMV(圖2-1),成功構(gòu)建好CiIPS的六個(gè)表達(dá)載體,質(zhì)粒圖如下圖2-3所示:pIPS-1(圖2-3A)、pΔPRO(圖2-3B)、pCARD(圖2-3C)、pΔCARD(圖2-3D)、pΔT....



本文編號(hào):3912562

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