為了快速有效地檢測養(yǎng)殖對蝦的對蝦白斑綜合征病毒(WSSV)和傳染性皮下及造血器官壞死病毒(IHHNV),建立了WSSV和IHHNV的雙重環(huán)介導等溫擴增(LAMP)檢測方法,并以鈣黃綠素熒光目測方法和電泳方法分別觀察和檢測結(jié)果。通過擴增序列分析發(fā)現(xiàn),WSSV的LAMP擴增靶序列中存在HinfⅠ酶切位點,而IHHNV的LAMP擴增靶序列中沒有此酶切位點,因此可以利用內(nèi)切酶酶切反應來區(qū)分兩種病毒的擴增產(chǎn)物。試驗結(jié)果顯示,所建立的雙重LAMP方法具有較好的靈敏性和特異性。將所建立的檢測方法進行臨床應用,對湛江地區(qū)養(yǎng)殖場對蝦WSSV和IHHNV的流行情況進行調(diào)查,結(jié)果發(fā)現(xiàn),湛江地區(qū)養(yǎng)殖場WSSV和IHHNV感染率較高,且在低日齡蝦苗中有感染情況。本研究所建立的LAMP方法不需要嚴格的儀器設備,反應快速、操作簡單,適用于口岸檢疫和條件相對落后的基層實驗室進行疫病的快速檢測。

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