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克氏原螯蝦源維氏氣單胞菌的鑒定、致病性研究及抗菌中草藥篩選

發(fā)布時(shí)間:2024-01-16 18:05
  隨著克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展,其病害越來(lái)越嚴(yán)重,病害已經(jīng)成為制約克氏原螯蝦產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要因素。2016年5月,湖北省潛江市某克氏原螯蝦養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)克氏原螯蝦暴發(fā)性死亡現(xiàn)象,造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失;疾∥r四肢無(wú)力,反應(yīng)遲鈍,應(yīng)激能力較弱,伏于池塘邊沿或水草上陸續(xù)死亡。為厘清病因,本研究對(duì)患病蝦進(jìn)行了病原菌的分離和鑒定,通過(guò)毒力因子檢測(cè)和多位點(diǎn)序列分型研究該菌毒力基因的分布并確定其分型地位。對(duì)人工感染后不同時(shí)期的蝦組織進(jìn)行病理學(xué)觀察,探討該菌對(duì)克氏原螯蝦的致病機(jī)理。此外,本研究還開(kāi)展了30種中草藥抑菌、殺菌試驗(yàn),以期為克氏原螯蝦細(xì)菌性疾病的防控提供科學(xué)依據(jù)。具體研究結(jié)果如下:1.從患病克氏原螯蝦肝胰腺中分離到一株優(yōu)勢(shì)菌,命名為QD160502。表型鑒定發(fā)現(xiàn)QD160502為短桿狀革蘭氏陰性菌,生理生化特性與維氏氣單胞菌參考菌株基本一致。分子生物學(xué)鑒定結(jié)果表明菌株QD160502的16S r DNA(登錄號(hào)為:KX585901)和gyr B序列(Gen Bank登錄號(hào):MN189983)與Gen Bank上維氏氣單胞菌的同源性最高,系統(tǒng)發(fā)育分析顯示QD160502與維氏氣單胞菌聚為一支;...

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 克氏原螯蝦養(yǎng)殖常見(jiàn)疾病
        1.1 病毒性疾病
        1.2 真菌性疾病
        1.3 細(xì)菌性疾病
    2 維氏氣單胞菌的研究進(jìn)展
        2.1 分類及地位
        2.2 維氏氣單胞菌的生物學(xué)特征
        2.3 維氏氣單胞菌的鑒定方法
        2.4 維氏氣單胞菌的致病性
        2.5 維氏氣單胞菌的毒力因子
        2.6 維氏氣單胞菌的基因分型研究
    3 中草藥抗菌研究進(jìn)展
        3.1 中草藥抗菌藥物篩選
        3.2 中草藥抗菌機(jī)理研究
        3.3 中草藥制劑在蝦蟹養(yǎng)殖中應(yīng)用
    4 本研究?jī)?nèi)容及目的意義
第二章 克氏原螯蝦源維氏氣單胞菌的分離鑒定和分型研究
    1 材料和方法
        1.1 樣品的收集和處理
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 病原的分離和純化
        1.5 回歸感染實(shí)驗(yàn)
        1.6 表型鑒定
        1.7 16Sr DNA和 gyrb基因的PCR鑒定及其系統(tǒng)發(fā)育分析
        1.8 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)
        1.9 毒力基因的檢測(cè)
        1.10 菌株MLST分型
    2 結(jié)果與分析
        2.1 患病蝦癥狀和分離菌觀察
        2.2 生理生化特征
        2.3 致病性試驗(yàn)
        2.4 16S r DNA和 gyr B鑒定及其系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.5 病原菌的藥敏性
        2.6 MLST分型
        2.7 毒力基因檢測(cè)結(jié)果
    3 討論
第三章 維氏氣單胞菌感染克氏原螯蝦的組織病理學(xué)研究
    1 材料和方法
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
        1.3 樣品的收集和處理
        1.4 組織病理切片制作
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
第四章 中草藥對(duì)維氏氣單胞菌體外抑菌實(shí)驗(yàn)
    1 材料與方法
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
        1.3 中草藥濃縮藥液的制備
        1.4 維氏氣單胞菌菌懸液的制備
        1.5 藥物敏感性試驗(yàn)
        1.6 中草藥最小抑菌濃度和最低殺菌濃度的測(cè)定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 藥液抑菌圈直徑的測(cè)定結(jié)果
        2.2 中草藥藥液體外MIC與 MBC測(cè)定結(jié)果
    3 討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào):3878920

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