隨著集約化養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展, 水產(chǎn)養(yǎng)殖病害問題日益突出。為了防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病,抗生素被大量應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。由于抗生素的大量使用所導(dǎo)致的藥物殘留等問題,抗生素在國(guó)外許多國(guó)家受到嚴(yán)格的限制。一些抗生素在我國(guó)也已經(jīng)被禁止使用,因此尋求能有效防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病、替代或減少抗生素使用的藥物和飼料添加劑顯得非常必要和緊迫。本研究通過體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn),探討豬血多肽(Peptides from Swine Blood, PSB)對(duì)建鯉抗氧化和免疫功能的影響,為應(yīng)用豬血多肽防治水產(chǎn)動(dòng)物疾病提供理論依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：1.體外實(shí)驗(yàn)：采用密度梯度離心技術(shù),分離純化建鯉頭腎細(xì)胞、頭腎巨噬細(xì)胞和外周血白細(xì)胞。將不同濃度的豬血多肽加入到鯉頭腎細(xì)胞、頭腎巨噬細(xì)胞和外周血白細(xì)胞的體外培養(yǎng)體系中作用24 h, WST-1法測(cè)定細(xì)胞增殖,NBT還原法和Griess試劑顯色法測(cè)定巨噬細(xì)胞的氧呼吸爆發(fā)活性和氮呼吸爆發(fā)活性。結(jié)果表明：濃度為20、40、80μg/mL的豬血多肽能顯著提高外周血白細(xì)胞的增殖；濃度為40和80μg/mL的豬血多肽能顯著增強(qiáng)頭腎巨噬細(xì)胞的氧呼吸爆發(fā)活性和氮呼吸爆發(fā)活性；另外80μg/mL的豬血多肽...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 生物活性肽研究進(jìn)展
        1.1 生物活性肽制備方法
            1.1.1 通過體外酶水解蛋白質(zhì)獲得
            1.1.2 通過模擬或者取實(shí)體動(dòng)物胃腸道物消化前體蛋白獲得
            1.1.3 通過化學(xué)方法以及基因重組技術(shù)人工合成生物活性肽
        1.2 生物活性肽的功能
            1.2.1 調(diào)節(jié)胃腸道吸收礦物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的功能
            1.2.2 調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)
            1.2.3 調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)
            1.2.4 調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)
            1.2.5 調(diào)節(jié)機(jī)體的抗氧化功能
            1.2.6 其他功能
        1.3 生物活性肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究進(jìn)展應(yīng)用
            1.3.1 多肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究進(jìn)展
            1.3.2 動(dòng)物蛋白源活性肽在水產(chǎn)動(dòng)物中的研究
    2 豬血的研究進(jìn)展
        2.1 豬血的成分
        2.2 豬血的開發(fā)和利用
            2.2.1 在飼料上的利用
            2.2.2 食品工業(yè)應(yīng)用
            2.2.3 在保健食品中的利用
            2.2.4 制取多肽
    3 魚類細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1 魚類細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展
        3.2 細(xì)胞培養(yǎng)的形式
        3.3 影響魚類細(xì)胞培養(yǎng)的因素
            3.3.1 溫度
            3.3.2 PH值和滲透壓
            3.3.3 培養(yǎng)基
            3.3.4 添加成分
    4 Toll樣受體在水產(chǎn)動(dòng)物免疫中的研究進(jìn)展
    5 實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x
第二章 豬血多肽的安全性評(píng)價(jià)分析
    1 材料和方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2.1 建鯉頭腎細(xì)胞分離
            1.2.2 豬血多肽體外安全性分析
            1.2.3 豬血多肽體內(nèi)安全性分析
        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    2 結(jié)果與分析
        2.1 豬血多肽對(duì)建鯉頭腎細(xì)胞活力的影響
        2.2 豬血多肽體內(nèi)安全性測(cè)定
    3 討論
第三章 豬血多肽對(duì)建鯉離體培養(yǎng)免疫細(xì)胞活性的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 建鯉外周血白細(xì)胞分離
            1.2.2 建鯉頭腎巨噬細(xì)胞的分離
            1.2.3 建鯉頭腎細(xì)胞的分離
        1.3 免疫指標(biāo)的測(cè)定
            1.3.1 外周血白細(xì)胞增殖的測(cè)定
            1.3.2 呼吸爆發(fā)活性測(cè)定
            1.3.3 SOD活力的檢測(cè)
        1.4 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 豬血多肽對(duì)建鯉外周血白細(xì)胞增殖的影響
        2.2 豬血蛋白活性肽對(duì)建鯉頭腎巨噬細(xì)胞氮呼吸爆發(fā)和氧呼吸爆發(fā)活性的影響
        2.3 豬血多肽對(duì)建鯉離體頭腎細(xì)胞SOD活性的影響
    3 討論
第四章 豬血多肽對(duì)鯉血清中免疫因子的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 試驗(yàn)組別劃分及處理
            1.2.2 樣品采集
            1.2.3 免疫指標(biāo)的測(cè)定
        1.3 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 豬血多肽對(duì)建鯉血清中IL-1β和TNF-α的影響
        2.2 豬血多肽對(duì)建鯉血清中C3和C4的影響
        2.3 豬血多肽對(duì)建鯉肝臟細(xì)胞TLR-4含量變化的影響
    3 討論
第五章 豬血多肽對(duì)建鯉抗氧化能力的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 方法
            1.2.1 試驗(yàn)組別劃分及處理
            1.2.2 血清制備
            1.2.3 血清蛋白含量以及生化指標(biāo)活力測(cè)定
        1.3 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 豬血多肽對(duì)建鯉血清中TP和Alb含量的影響
        2.2 豬血蛋白活性肽對(duì)建鯉血清中抗氧化能力的影響
        2.3 豬血多肽對(duì)建鯉血清中AKP活性的影響
    3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄



本文編號(hào)：3824275