目前在針對魚類神經(jīng)壞死病毒的疫苗研究中,主要是將神經(jīng)壞死病毒某些蛋白作為抗原進行注射免疫,但是傳統(tǒng)的注射免疫并不能有效地激發(fā)黏膜免疫。筆者將魚類神經(jīng)壞死病毒的衣殼蛋白(MCP)與鮰愛德華氏菌的跨粘膜蛋白ompN1融合表達,擬制備能夠抵抗神經(jīng)壞死病毒的粘膜疫苗;利用從NCBI GenBank庫里獲得的魚類神經(jīng)壞死病毒的外殼蛋白MCP和鮰愛德華氏菌的外膜蛋白ompN1的基因序列,將兩者進行序列優(yōu)化與全基因合成,分別構建原核表達載體:MCP-ompN1 pET28a和MCP pET28a和ompN1 pET28a,并在大腸桿菌內分別誘導表達融合蛋白MCP-ompN1,MCP,ompN1后,再利用包涵體純化及透析復性獲得MCPompN1,MCP,ompN1蛋白。SDS-PAGE結果顯示,原核表達純化得到了較純的MCP-ompN1融合蛋白,Western Blotting結果表明,純化得到的MCP-ompN1融合蛋白不僅具有MCP抗原性,還具有ompN1抗原性。本實驗通過原核表達純化得到了魚類神經(jīng)壞死病毒衣殼蛋白MCP和鮰愛德華氏菌外膜蛋白ompN1的融合蛋白MCP-ompN1,為進一步驗證融合...

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