發(fā)布時間：2023-03-29 01:09

　　壇紫菜(Pyropia haitanensis)是生長于我國南方沿海的一種重要的大型經(jīng)濟海藻。近年來,高溫爛菜和種質(zhì)退化等問題嚴重制約著壇紫菜養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。因此,研究壇紫菜的抗逆機制,選育具有優(yōu)良性狀的新品種具有十分重要的意義。本研究以壇紫菜耐高溫型品系Z-61為材料,克隆了壇紫菜滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)合成酶相關(guān)基因的全長序列,并從基因表達和代謝組兩個方面分析了壇紫菜滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)在應(yīng)答高溫和失水脅迫時的可能作用,旨在為壇紫菜的良種選育以及基因工程研究提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.通過基于GC-MS的代謝組學(xué)技術(shù)研究了不同脅迫條件下壇紫菜代謝物種類及含量的變化,結(jié)果顯示高溫和失水脅迫下細胞內(nèi)代謝物的變化明顯不同,氨基酸中脯氨酸、天冬酰胺、絲氨酸等含量增加,糖類中海藻糖、D-阿拉伯糖醇的含量增加,多元醇中甘油在失水下含量也顯著增加。2.通過氣相色譜技術(shù)測定了高溫和失水脅迫下脯氨酸、甘油和海藻糖的含量變化,結(jié)果顯示三種物質(zhì)在失水下含量顯著增加,由此推測脯氨酸、甘油和海藻糖是壇紫菜抵抗逆境脅迫的重要滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)。3.采用RACE和普通PCR擴增的方法,克隆得到7條壇紫菜滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)合成酶相...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 植物滲透壓調(diào)節(jié)的研究概述
        1.1.1 滲透脅迫信號的識別與轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.1.2 滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)
    1.2 藻類滲透壓調(diào)節(jié)的研究進展
        1.2.1 滲透脅迫信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
        1.2.2 滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)
    1.3 植物代謝組學(xué)的研究進展
        1.3.1 植物代謝組學(xué)概述
        1.3.2 逆境脅迫下植物代謝組學(xué)的研究進展
    1.4 藻類代謝組學(xué)的研究進展
    1.5 藻類滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)相關(guān)基因的研究進展
    1.6 本研究的目的及意義
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料及處理
    2.2 實驗儀器
    2.3 實驗試劑
        2.3.1 瓊脂糖凝膠電泳試劑
        2.3.2 LB培養(yǎng)基
        2.3.3 基因克隆及表達定量分析相關(guān)試劑
    2.4 實驗引物
    2.5 實驗方法
        2.5.1 總RNA的提取
        2.5.2 總RNA的質(zhì)量檢測
        2.5.3 基因克隆
        2.5.4 基因序列的生物信息學(xué)分析
        2.5.5 實時熒光定量PCR
        2.5.6 代謝組學(xué)檢測
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 逆境脅迫下壇紫菜的代謝組學(xué)分析
        3.1.1 色譜圖
        3.1.2 多維統(tǒng)計分析
        3.1.3 滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)的含量變化
    3.2 壇紫菜葉狀體RNA的制備及質(zhì)量檢測
    3.3 滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)相關(guān)基因的克隆與表達分析
        3.3.1 壇紫菜滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)相關(guān)基因的全長克隆
        3.3.2 PhTPS序列的生物信息學(xué)分析
        3.3.3 PhGPDH序列的生物信息學(xué)分析
        3.3.4 PhOAT序列的生物信息學(xué)分析
        3.3.5 PhCDH序列分析
    3.4 逆境脅迫下壇紫菜滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)相關(guān)基因的表達分析
        3.4.1 PhTPS基因在高溫脅迫下的定量表達分析
        3.4.2 PhTPS基因在失水脅迫下的定量表達分析
        3.4.3 PhGPDH基因在高溫脅迫下的定量表達分析
        3.4.4 PhGPDH基因在失水脅迫下的定量表達分析
        3.4.5 PhOAT基因在高溫脅迫下的定量表達分析
        3.4.6 PhOAT基因在失水脅迫下的定量表達分析
        3.4.7 PhCDH基因在高溫脅迫下的定量表達分析
        3.4.8 PhCDH基因在失水脅迫下的定量表達分析
第4章 討論
    4.1 逆境下壇紫菜代謝物的相關(guān)分析
        4.1.1 氨基酸類代謝產(chǎn)物
        4.1.2 糖類、糖醇類代謝物
        4.1.3 胺類代謝物
    4.2 海藻糖及合成酶基因的克隆及表達分析
    4.3 甘油及合成酶基因的克隆及表達分析
    4.4 脯氨酸及合成酶基因的克隆及表達分析
    4.5 甜菜堿及合成酶基因的克隆及表達分析
    4.6 逆境脅迫下代謝物含量變化與基因表達水平變化的關(guān)聯(lián)分析
        4.6.1 海藻糖
        4.6.2 甘油
        4.6.3 脯氨酸
        4.6.4 甜菜堿
結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3773676