近年來(lái)，隨著大黃魚(yú)養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)張，網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚(yú)的病害頻發(fā)，其中大黃魚(yú)“白點(diǎn)病”成為危害最為嚴(yán)重的流行性疾病之一�！鞍c(diǎn)病”病原為刺激隱核蟲(chóng)(Cryptocaryon irritans)，病魚(yú)大量感染該寄生蟲(chóng)后，會(huì)出現(xiàn)體表、鰭條及鰓瓣布滿肉眼可見(jiàn)的大小白色點(diǎn)狀蟲(chóng)體和包囊，活動(dòng)異常、上皮增生、呼吸困難、機(jī)械損傷等病癥。本文利用分子生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建并完善了LAMP檢測(cè)方法；采用該方法對(duì)養(yǎng)殖大黃魚(yú)海區(qū)、魚(yú)體組織等感染刺激隱核蟲(chóng)跟蹤檢測(cè)，闡述了2012²013年期間，刺激隱核蟲(chóng)感染養(yǎng)殖大黃魚(yú)的規(guī)律；研究了溫度、鹽度等海區(qū)水體理化因子對(duì)刺激隱核蟲(chóng)感染的影響；分析了刺激隱核蟲(chóng)對(duì)不同魚(yú)體組織的感染差異；為大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)病的防控技術(shù)研究以及實(shí)行刺激隱核蟲(chóng)病原的檢測(cè)、監(jiān)測(cè)等提供了理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 本文依賴自動(dòng)循環(huán)鏈置換反應(yīng)，通過(guò)識(shí)別靶序列上4個(gè)特異區(qū)域的引物和具有鏈置換的DNA聚合酶，在Mg2+濃度為2mmol-1、反應(yīng)溫度61℃⁶6°C，內(nèi)外引物濃度2:1⁶:1、反應(yīng)時(shí)間60min的優(yōu)化條件下，擴(kuò)增出呈特異性LAMP梯形條帶產(chǎn)物...

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
論文摘要
Abstract of Thesis
引言
1.緒論
    1.1 大黃魚(yú)的生物學(xué)特性及養(yǎng)殖現(xiàn)狀
        1.1.1 形態(tài)特征
        1.1.2 種群分布
        1.1.3 生物學(xué)特征
        1.1.4 繁殖規(guī)律
        1.1.5 養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    1.2 大黃魚(yú)病害研究概況
        1.2.1 網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚(yú)的主要疾病及其病原
        1.2.2 大黃魚(yú)疾病的病原檢測(cè)及其防治
    1.3 海水魚(yú)類刺激隱核蟲(chóng)及其研究進(jìn)展
        1.3.1 刺激隱核蟲(chóng)的基本特征
        1.3.2 刺激隱核蟲(chóng)的發(fā)現(xiàn)以及分類學(xué)地位的確定
        1.3.3 刺激隱核蟲(chóng)的生活史
        1.3.4 刺激隱核蟲(chóng)病的病理癥狀及診斷
        1.3.5 刺激隱核蟲(chóng)病流行情況及病因分析
        1.3.6 刺激隱核蟲(chóng)病防治方法
    1.4 魚(yú)類寄生蟲(chóng)病的檢測(cè)與診斷方法
    1.5 LAMP 檢測(cè)技術(shù)的研究與應(yīng)用
    1.6 論文研究的內(nèi)容及目的
2.大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng) LAMP 檢測(cè)方法的建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 蟲(chóng)株與菌株
        2.1.2 主要試劑及儀器
        2.1.3 大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)的 LAMP 反應(yīng)體系的建立
        2.1.4 反應(yīng)體系及條件的優(yōu)化
            2.1.4.1 時(shí)間、溫度的優(yōu)化
            2.1.4.2 反應(yīng)體系組成的優(yōu)化
        2.1.5 反應(yīng)特異性檢驗(yàn)
        2.1.6 LAMP 反應(yīng)靈敏度檢驗(yàn)
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 建立大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)病 LAMP 檢測(cè)方法
        2.2.2 時(shí)間、溫度的優(yōu)化
        2.2.3 反應(yīng)體系組成的優(yōu)化
        2.2.4 反應(yīng)特異性檢驗(yàn)
        2.2.5 LAMP 反應(yīng)靈敏度檢驗(yàn)
    2.3 討論
3 刺激隱核蟲(chóng)感染養(yǎng)殖大黃魚(yú)的檢測(cè)與分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要試劑
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 樣品來(lái)源
        3.1.4 魚(yú)組織總 DNA 和病原生物基因組 DNA 的提取
        3.1.5 樣品檢測(cè)
        3.1.6 水體理化因子的檢測(cè)
        3.1.7 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 水溫、鹽度對(duì)大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)感染的影響
        3.2.2 刺激隱核蟲(chóng)感染大黃魚(yú)不同組織的差異
        3.2.3 養(yǎng)殖海區(qū)水體中刺激隱核蟲(chóng)的周年監(jiān)測(cè)與分析
        3.2.4 大黃魚(yú)養(yǎng)殖海區(qū)水體理化因子檢測(cè)與分析
    3.3 討論
4 本研究的主要結(jié)論
    4.1 建立、優(yōu)化大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)病的 LAMP 檢測(cè)技術(shù)
    4.2 刺激隱核蟲(chóng)感染大黃魚(yú)的周年監(jiān)測(cè)
參考文獻(xiàn)
在學(xué)研究成果
致謝



本文編號(hào)：3763665