近年來，隨著大黃魚養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)張，網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚的病害頻發(fā)，其中大黃魚“白點(diǎn)病”成為危害最為嚴(yán)重的流行性疾病之一�！鞍c(diǎn)病”病原為刺激隱核蟲(Cryptocaryon irritans)，病魚大量感染該寄生蟲后，會出現(xiàn)體表、鰭條及鰓瓣布滿肉眼可見的大小白色點(diǎn)狀蟲體和包囊，活動異常、上皮增生、呼吸困難、機(jī)械損傷等病癥。本文利用分子生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建并完善了LAMP檢測方法；采用該方法對養(yǎng)殖大黃魚海區(qū)、魚體組織等感染刺激隱核蟲跟蹤檢測，闡述了2012²013年期間，刺激隱核蟲感染養(yǎng)殖大黃魚的規(guī)律；研究了溫度、鹽度等海區(qū)水體理化因子對刺激隱核蟲感染的影響；分析了刺激隱核蟲對不同魚體組織的感染差異；為大黃魚刺激隱核蟲病的防控技術(shù)研究以及實行刺激隱核蟲病原的檢測、監(jiān)測等提供了理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。 本文依賴自動循環(huán)鏈置換反應(yīng)，通過識別靶序列上4個特異區(qū)域的引物和具有鏈置換的DNA聚合酶，在Mg2+濃度為2mmol-1、反應(yīng)溫度61℃⁶6°C，內(nèi)外引物濃度2:1⁶:1、反應(yīng)時間60min的優(yōu)化條件下，擴(kuò)增出呈特異性LAMP梯形條帶產(chǎn)物...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
論文摘要
Abstract of Thesis
引言
1.緒論
    1.1 大黃魚的生物學(xué)特性及養(yǎng)殖現(xiàn)狀
        1.1.1 形態(tài)特征
        1.1.2 種群分布
        1.1.3 生物學(xué)特征
        1.1.4 繁殖規(guī)律
        1.1.5 養(yǎng)殖現(xiàn)狀
    1.2 大黃魚病害研究概況
        1.2.1 網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚的主要疾病及其病原
        1.2.2 大黃魚疾病的病原檢測及其防治
    1.3 海水魚類刺激隱核蟲及其研究進(jìn)展
        1.3.1 刺激隱核蟲的基本特征
        1.3.2 刺激隱核蟲的發(fā)現(xiàn)以及分類學(xué)地位的確定
        1.3.3 刺激隱核蟲的生活史
        1.3.4 刺激隱核蟲病的病理癥狀及診斷
        1.3.5 刺激隱核蟲病流行情況及病因分析
        1.3.6 刺激隱核蟲病防治方法
    1.4 魚類寄生蟲病的檢測與診斷方法
    1.5 LAMP 檢測技術(shù)的研究與應(yīng)用
    1.6 論文研究的內(nèi)容及目的
2.大黃魚刺激隱核蟲 LAMP 檢測方法的建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 蟲株與菌株
        2.1.2 主要試劑及儀器
        2.1.3 大黃魚刺激隱核蟲的 LAMP 反應(yīng)體系的建立
        2.1.4 反應(yīng)體系及條件的優(yōu)化
            2.1.4.1 時間、溫度的優(yōu)化
            2.1.4.2 反應(yīng)體系組成的優(yōu)化
        2.1.5 反應(yīng)特異性檢驗
        2.1.6 LAMP 反應(yīng)靈敏度檢驗
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 建立大黃魚刺激隱核蟲病 LAMP 檢測方法
        2.2.2 時間、溫度的優(yōu)化
        2.2.3 反應(yīng)體系組成的優(yōu)化
        2.2.4 反應(yīng)特異性檢驗
        2.2.5 LAMP 反應(yīng)靈敏度檢驗
    2.3 討論
3 刺激隱核蟲感染養(yǎng)殖大黃魚的檢測與分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要試劑
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 樣品來源
        3.1.4 魚組織總 DNA 和病原生物基因組 DNA 的提取
        3.1.5 樣品檢測
        3.1.6 水體理化因子的檢測
        3.1.7 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 水溫、鹽度對大黃魚刺激隱核蟲感染的影響
        3.2.2 刺激隱核蟲感染大黃魚不同組織的差異
        3.2.3 養(yǎng)殖海區(qū)水體中刺激隱核蟲的周年監(jiān)測與分析
        3.2.4 大黃魚養(yǎng)殖海區(qū)水體理化因子檢測與分析
    3.3 討論
4 本研究的主要結(jié)論
    4.1 建立、優(yōu)化大黃魚刺激隱核蟲病的 LAMP 檢測技術(shù)
    4.2 刺激隱核蟲感染大黃魚的周年監(jiān)測
參考文獻(xiàn)
在學(xué)研究成果
致謝



本文編號：3763665