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天然四倍體泥鰍染色體組操作及微衛(wèi)星分析

發(fā)布時(shí)間:2023-02-10 21:38
  魚(yú)類(lèi)染色體組操作主要包括多倍體的人工誘導(dǎo)、雌核發(fā)育和雄核發(fā)育等,在魚(yú)類(lèi)遺傳育種中占有重要的地位。本文為探討魚(yú)類(lèi)人工誘導(dǎo)四倍體及雄核發(fā)育二倍體的新方法,以天然四倍泥鰍、二倍體泥鰍為研究對(duì)象,通過(guò)冷休克處理抑制第二極體釋放,誘導(dǎo)四倍體,對(duì)其所產(chǎn)生后代的染色體數(shù)目、DNA相對(duì)含量、血紅細(xì)胞核體積及微衛(wèi)星等進(jìn)行了較系統(tǒng)的分析;并采用冷休克方法誘導(dǎo)四倍體泥鰍雄核發(fā)育二倍體,對(duì)其后代的胚胎發(fā)育、倍性鑒定及用微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)雄核發(fā)育個(gè)體進(jìn)行分析鑒定。具體結(jié)果如下:(1)冷休克誘導(dǎo)泥鰍四倍體的研究:結(jié)果表明,血紅細(xì)胞核體積測(cè)定四倍體泥鰍的紅細(xì)胞核長(zhǎng)軸、短軸以及體積都顯著大于三倍體(P<0.01)。流式細(xì)胞儀共檢測(cè)一齡魚(yú)147尾,其中三倍體泥鰍共31尾,四倍體泥鰍共116尾,占總數(shù)的78.9%;對(duì)流式細(xì)胞儀已確定的三倍體和四倍體泥鰍各3尾的鰭細(xì)胞體外培養(yǎng)進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)。結(jié)果顯示,三倍體泥鰍染色體數(shù)目為3n=75,四倍體泥鰍染色體數(shù)目為4n=100;三種倍性鑒定方法結(jié)果一致。本試驗(yàn)采用了15對(duì)引物,篩選4對(duì)引物(Mac24、Mac37、Mac63、Mac425)用于微衛(wèi)星標(biāo)記的分析。結(jié)果表明,對(duì)照組均遺...

【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 魚(yú)類(lèi)多倍體誘導(dǎo)方法
    1.2 人工誘導(dǎo)魚(yú)類(lèi)雌核發(fā)育
    1.3 人工誘導(dǎo)魚(yú)類(lèi)雄核發(fā)育
    1.4 魚(yú)類(lèi)倍性鑒定方法
    1.5 泥鰍的研究進(jìn)展
第二章 冷休克誘導(dǎo)泥鰍四倍體倍性鑒定及微衛(wèi)星分析
    1 材料
    2 方法
        2.1 倍性檢測(cè)
        2.2 鰭細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 鰭組織細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備
        2.4 微衛(wèi)星分析
    3 結(jié)果
        3.1 血紅細(xì)胞核體測(cè)量
        3.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)
        3.3 鰭細(xì)胞體外培養(yǎng)制備染色體觀察
        3.4 基因組DNA的制備結(jié)果
        3.5 微衛(wèi)星標(biāo)記檢測(cè)
    4 討論
第三章 冷休克誘導(dǎo)泥鰍雄核發(fā)育二倍體倍性鑒定及微衛(wèi)星分析
    1 材料
        1.1 材料親本
    2 方法
        2.1 人工催產(chǎn)及受精
        2.2 冷休克處理
        2.3 受精卵孵化及仔魚(yú)培育
        2.4 胚胎倍性檢測(cè)
        2.5 受精卵和仔魚(yú)管理及受精率、孵化率和成活率的統(tǒng)計(jì)
        2.6 顯著性檢驗(yàn)方法
        2.7 親子鑒定
    3 結(jié)果
        3.1 受精率、孵化率及7天成活率
        3.2 胚胎倍性檢測(cè)
        3.3 微衛(wèi)星分析
    4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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致謝



本文編號(hào):3739959

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