近年來(lái),關(guān)于生殖細(xì)胞的研究被全世界學(xué)者廣泛關(guān)注,除在哺乳動(dòng)物中有廣泛深入的研究以外,在魚(yú)類(lèi)等低等脊椎動(dòng)物中也逐漸開(kāi)展起來(lái),并取得很多進(jìn)展。DAZL （deleted in azoospermia-like）是DAZ家族的成員之一,同時(shí)也是一種重要的RNA結(jié)合蛋白。現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn),從無(wú)脊椎動(dòng)物到脊椎動(dòng)物,dazl特異地表達(dá)于雌性和雄性生殖細(xì)胞,可能在生殖細(xì)胞發(fā)育過(guò)程發(fā)揮重要作用。不少研究也從一些硬骨魚(yú)中鑒定了dazl基因,并對(duì)其表達(dá)規(guī)律作出了詳細(xì)的探討。本研究克隆和鑒定了牙鲆（Paralichthys olivaceus） dazl基因,首次在硬骨魚(yú)中發(fā)現(xiàn)了其mRNA的可變剪接形式,將這兩種牙鲆dazl mRNA稱為Podazl-Ⅰ和Podazl-Ⅱ,探究了它們?cè)趍RNA水平和蛋白水平的表達(dá)規(guī)律,并找到了牙鲆DAZL的靶mRNA,預(yù)測(cè)其功能。首先,通過(guò)基因克隆等方法,得到了牙鲆dazl基因,全長(zhǎng)5413 bp,包括9個(gè)外顯子和9個(gè)內(nèi)含子,其中外顯子1僅有ATG三個(gè)堿基,內(nèi)含子9位于3’非翻譯區(qū),這些特征與許多dazl同源基因是相似的。一對(duì)dazl等位基因在內(nèi)含子6的序列上有差異。由于外顯子... 

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 魚(yú)類(lèi)生殖細(xì)胞發(fā)育
        1.2.1 魚(yú)類(lèi)的性別決定及相關(guān)因子
        1.2.2 魚(yú)類(lèi)生殖細(xì)胞發(fā)育及相關(guān)因子
        1.2.3 魚(yú)類(lèi)生殖細(xì)胞特異表達(dá)基因
    1.3 RNA結(jié)合蛋白
        1.3.1 RNA結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)特征
        1.3.2 RNA結(jié)合蛋白的功能
    1.4 DAZ家族研究進(jìn)展
        1.4.1 DAZ家族的結(jié)構(gòu)特征
        1.4.2 DAZ家族成員的進(jìn)化關(guān)系
        1.4.3 DAZ家族的相關(guān)研究
        1.4.4 DAZ家族與人類(lèi)疾病
    1.5 硬骨魚(yú)dazl表達(dá)與功能研究
    1.6 本研究的主要內(nèi)容和意義
        1.6.1 本研究的主要內(nèi)容
        1.6.2 本研究的創(chuàng)新性和意義
第二章 牙鲆dazl基因及其可變剪接mRNA的鑒定
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 牙鲆dazl cDNA序列
        2.3.2 牙鲆dazl DNA序列
        2.3.3 牙鲆dazl兩種可變剪接mRNA的鑒定
        2.3.4 牙鲆dazl基因上游調(diào)控序列的預(yù)測(cè)
    2.4 討論
        2.4.1 關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.2 關(guān)于牙鲆dazl UTR的可變剪接
        2.4.3 關(guān)于牙鲆dazl可變剪接的意義
        2.4.4 本章小結(jié)
第三章 牙鲆DAZL的表達(dá)規(guī)律
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 牙鲆dazl mRNA在各組織的相對(duì)表達(dá)水平
        3.3.2 牙鲆dazl兩種mRNA在性腺的表達(dá)
        3.3.3 牙鲆dazl兩種mRNA在胚胎發(fā)育時(shí)期的表達(dá)
        3.3.4 牙鲆dazl兩種mRNA在性腺的定位
        3.3.5 牙鲆dazl甲基化對(duì)其表達(dá)的調(diào)控
        3.3.6 牙鲆DAZL兩種蛋白在組織的表達(dá)
        3.3.7 牙鲆DAZL兩種蛋白在性腺的定位
    3.4 討論
        3.4.1 關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.2 關(guān)于牙鲆dazl mRNA與蛋白的表達(dá)
        3.4.3 本章小結(jié)
第四章 牙鲆DAZL兩種蛋白的靶mRNA研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 免疫沉淀產(chǎn)物的RT-PCR檢測(cè)
        4.3.2 高通量測(cè)序結(jié)果
        4.3.3 牙鲆DAZL兩種蛋白的靶mRNA
        4.3.4 牙鲆dazl的兩種mRNA可能是其蛋白產(chǎn)物的靶mRNA
    4.4 討論
        4.4.1 關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法
        4.4.2 關(guān)于PODAZL的功能
        4.4.3 本章小結(jié)
    4.5 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]玉米苗期干旱脅迫下可變剪接及其調(diào)控因子的研究[D]. 李嬌.鄭州大學(xué) 2013
[4]牙鲆Paralichthys olivaceus性腺分化與發(fā)育的組織學(xué)研究[D]. 孫朝徽.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3726585