斑馬魚早期胚胎/幼魚急相期反應(yīng)基因表達(dá)模式研究及血清淀粉樣蛋白A(SAA)功能分析
發(fā)布時間:2022-11-05 05:01
急相期反應(yīng)在感染疾病的動物體內(nèi)被發(fā)現(xiàn),是生物體先天性免疫應(yīng)答的重要組成部分,是機(jī)體受到病源微生物的感染、創(chuàng)傷、腫瘤增生和炎癥等出現(xiàn)時所產(chǎn)生的一系列的生理反應(yīng),從而快速抵御外來微生物入侵,促進(jìn)創(chuàng)傷的修復(fù),維持穩(wěn)定的內(nèi)部環(huán)境,恢復(fù)機(jī)體正常生理功能。目前很多文獻(xiàn)已經(jīng)報道在多種動物從魚類到哺乳動物體內(nèi)都發(fā)現(xiàn)急相期反應(yīng)的存在。在急相期反應(yīng)通常伴隨血清中急相期反應(yīng)蛋白(APPs)濃度的升高、身體發(fā)熱、血管滲透壓升高以及新陳代謝和身體病理性的變化。急相期反應(yīng)蛋白一般是由肝臟合成并分泌到血清中成為血漿蛋白,組成急相期反應(yīng)的重要部分。在哺乳動物體內(nèi)急相期反應(yīng)通常是由Toll樣受體介導(dǎo)刺激誘導(dǎo)前炎癥因子(IL-1β和TNF-α)的產(chǎn)生,從而最終引起急相期反應(yīng)。根據(jù)急相期反應(yīng)蛋白的濃度變化可分為正急相期反應(yīng)蛋白和負(fù)急相期反應(yīng)蛋白。在人類體內(nèi)正急相期反應(yīng)蛋白有CRP、SAA、HP、C3、Bf等,白蛋白和鐵傳遞蛋白是負(fù)急相期反應(yīng)蛋白。在多種魚類體內(nèi)已經(jīng)證實(shí)有和人類同源的急相期反應(yīng)蛋白。近年來已經(jīng)有報道證明CRP、SAA、HP、LECT2、HAMP也是成年斑馬魚體內(nèi)的急相期反應(yīng)蛋白。在斑馬魚或其它魚類的早期發(fā)育的...
【文章頁數(shù)】:118 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語
第一章 文獻(xiàn)綜述
1. 概述
2. 急相期反應(yīng)(Acute phase response) 和急相期反應(yīng)蛋白(Acute phase protein)
2.1 急相期反應(yīng)和急相期反應(yīng)蛋白簡介
2.2 幾種正急相期反應(yīng)蛋白作用
2.3 負(fù)急相期反應(yīng)蛋白的作用
2.4 魚類的急相期反應(yīng)和急相期反應(yīng)蛋白
3.免疫學(xué)研究的新型模式生物——斑馬魚
3.1 斑馬魚的基本特征
3.2 斑馬魚與免疫學(xué)研究
4. 斑馬魚胚胎的早期免疫保護(hù)機(jī)制
5.研究目的與技術(shù)路線
5.1 研究目的
5.2 技術(shù)路線
第二章 斑馬魚早期胚胎/幼魚急相期反應(yīng)基因的表達(dá)模式研究
1 前言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 APR 基因(CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP)的生物信息學(xué)分析
3.2 斑馬魚肝臟 RNA 的提取
3.3 用于合成 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα反義 RNA 探針的 PCR 片斷擴(kuò)增
3.4 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα反義 RNA 探針的合成41
3.5 Real-time PCR 的引物檢測
3.6 斑馬魚早期胚胎注射不同濃度 LPS 的存活比例
3.7 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα在 LPS 處理的斑馬魚早期胚胎/幼魚的表達(dá)量變化
3.8 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα在斑馬魚正常不同發(fā)育時期和 LPS 處理的斑馬魚胚胎/幼魚表達(dá)模式
4 討論
第三章 斑馬魚血清樣淀粉蛋白(SAA)功能分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 重組蛋白 His-SAA 蛋白的原核表達(dá)
3.2 重組蛋白 His-SAA 的功能研究
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡介
發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
本文編號:3701963
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第一章 文獻(xiàn)綜述
1. 概述
2. 急相期反應(yīng)(Acute phase response) 和急相期反應(yīng)蛋白(Acute phase protein)
2.1 急相期反應(yīng)和急相期反應(yīng)蛋白簡介
2.2 幾種正急相期反應(yīng)蛋白作用
2.3 負(fù)急相期反應(yīng)蛋白的作用
2.4 魚類的急相期反應(yīng)和急相期反應(yīng)蛋白
3.免疫學(xué)研究的新型模式生物——斑馬魚
3.1 斑馬魚的基本特征
3.2 斑馬魚與免疫學(xué)研究
4. 斑馬魚胚胎的早期免疫保護(hù)機(jī)制
5.研究目的與技術(shù)路線
5.1 研究目的
5.2 技術(shù)路線
第二章 斑馬魚早期胚胎/幼魚急相期反應(yīng)基因的表達(dá)模式研究
1 前言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 APR 基因(CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP)的生物信息學(xué)分析
3.2 斑馬魚肝臟 RNA 的提取
3.3 用于合成 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα反義 RNA 探針的 PCR 片斷擴(kuò)增
3.4 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα反義 RNA 探針的合成41
3.5 Real-time PCR 的引物檢測
3.6 斑馬魚早期胚胎注射不同濃度 LPS 的存活比例
3.7 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα在 LPS 處理的斑馬魚早期胚胎/幼魚的表達(dá)量變化
3.8 CRP、SAA、LECT2、HAMP、HP、IL-1β和 TNFα在斑馬魚正常不同發(fā)育時期和 LPS 處理的斑馬魚胚胎/幼魚表達(dá)模式
4 討論
第三章 斑馬魚血清樣淀粉蛋白(SAA)功能分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 重組蛋白 His-SAA 蛋白的原核表達(dá)
3.2 重組蛋白 His-SAA 的功能研究
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
本文編號:3701963
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