發(fā)布時間：2022-11-03 20:25

　　為探明厚殼貽貝足絲中一種新型超氧化物歧化酶（Byssal superoxide dismutase,BSOD）類蛋白的結(jié)構(gòu)與功能,對厚殼貽貝BSOD開展了序列分析并采用密碼子優(yōu)化結(jié)合大腸桿菌重組表達(dá)系統(tǒng),開展BSOD重組表達(dá)以及表達(dá)產(chǎn)物的分離純化和功能鑒定。序列分析結(jié)果表明,厚殼貽貝BSOD序列中含信號肽和典型的SOD結(jié)構(gòu)域,屬于分泌型SOD分子;其一級結(jié)構(gòu)與數(shù)據(jù)庫中已報道的其他物種SOD具有一定的相似性,但進(jìn)化樹分析結(jié)果表明厚殼貽貝BSOD是一種較為新穎的SOD分子,與水生甲殼類生物的胞外SOD同源。重組表達(dá)結(jié)果表明,重組BSOD主要通過包涵體形式表達(dá)。經(jīng)復(fù)性后,重組厚殼貽貝BSOD具有明顯的歧化酶酶活性;該活性在重組BSOD鰲合銅離子和鋅離子后明顯增強(qiáng);且鰲合了銅離子和鋅離子后重組BSOD對DPPH具有較強(qiáng)的清除率,表明BSOD是一種需要金屬離子輔助的抗氧化蛋白。推測BSOD在足絲黏附過程中參與了其他富含多吧的足絲蛋白的保護(hù)以及還原態(tài)維持,并對貽貝足絲在固化和黏附前維持還原態(tài)具有重要意義。 

【文章頁數(shù)】：13 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 厚殼貽貝BSOD的序列分析
    1.2 目標(biāo)基因的密碼子優(yōu)化、設(shè)計與表達(dá)載體的構(gòu)建
    1.3 重組足絲BSOD蛋白的表達(dá)、復(fù)性及分離純化
    1.4 SDS-PAGE和Western分析
    1.5 重組足絲BSOD的質(zhì)譜鑒定
    1.6 重組BSOD的功能測試
2 結(jié)果與分析
    2.1 厚殼貽貝SOD序列分析結(jié)果
    2.2 BSOD基因的設(shè)計和密碼子優(yōu)化
    2.3 重組BSOD的表達(dá)、純化與鑒定
    2.4 重組BSOD的功能分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利用質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合EST庫搜索鑒定厚殼貽貝新型足絲蛋白（英文）[J]. 孫敬敬,李楠楠,王信超,廖智.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2014(01)



本文編號：3700569