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擬態(tài)弧菌及其靶向DNA疫苗對草魚腸道菌群和腸組織結構的影響

發(fā)布時間:2022-10-30 15:35
  擬態(tài)弧菌(Vibrio mimicus)是一種常見的腸道病原菌,可引起養(yǎng)殖魚類的嚴重腹水病,給水產養(yǎng)殖業(yè)帶來較大經濟損失,亟需開展該菌的致病機理和免疫防控研究。腸道菌群對宿主的營養(yǎng)吸收、生長發(fā)育、免疫抗病等方面發(fā)揮不可或缺的關鍵作用。在自然或人工因素作用下,宿主與腸道菌群的動態(tài)平衡一旦遭到破壞,宿主就會因腸道菌群結構紊亂而出現(xiàn)機體營養(yǎng)吸收代謝障礙、免疫功能降低等現(xiàn)象,引發(fā)各種疾病。同樣,口服疫苗接種后也必將引起其腸道菌群結構的變化。目前,腸道菌群及其相關研究成為了科研關注的熱點,也為探索病原的致病機理和防治方法提供了新思路。前期研究中我們從患病草魚體內分離到一株毒力較強的擬態(tài)弧菌,構建了其DNA疫苗,并發(fā)現(xiàn)該疫苗可誘導魚體產生良好的腸黏膜免疫應答。在此基礎上,本論文研究了擬態(tài)弧菌感染以及擬態(tài)弧菌靶向DNA疫苗對草魚腸道菌群和腸組織結構的影響。完成的主要研究工作和成果總結如下:1)擬態(tài)弧菌靶向DNA疫苗構建及其腸道原位表達檢測。論文采用膜囊法以大腸桿菌DH5α凍干菌蛻裝載擬態(tài)弧菌DNA疫苗,經熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)1 mg菌蛻裝載了214μg疫苗質粒,表明擬態(tài)弧菌靶向DNA疫苗構建成功。... 

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
本論文常用中英文縮寫詞
文獻綜述
引言
1 材料與方法
    1.1 菌株
    1.2 主要試劑(盒)
    1.3 主要溶液和培養(yǎng)基的配制
    1.4 主要儀器
    1.5 實驗動物
    1.6 擬態(tài)弧菌DNA疫苗的制備
    1.7 擬態(tài)弧菌及其靶DNA疫苗對草魚腸道菌群的影響
    1.8 擬態(tài)弧菌及其DNA疫苗對草魚腸組織結構的影響
2 結果與分析
    2.1 DH5α凍干菌蛻對擬態(tài)弧菌DNA疫苗的裝載量
    2.2 擬態(tài)弧菌DNA疫苗在不同腸段中的原位表達情況
    2.3 腸道內容物總DNA的提取質量
    2.4 高通量測序序列分析
    2.5 免疫與感染后草魚腸道菌群的OTU聚類分析
    2.6 免疫與感染后草魚腸道菌群Alpha多樣性分析
    2.7 免疫與感染后草魚腸道菌群群落結構分析
    2.8 免疫與感染前后草魚腸組織結構的變化
討論
結論
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]口服幽門螺桿菌疫苗候選株對小鼠腸道菌群的影響[J]. 陶好霞,張錚,袁盛凌,王艷春,關清,王雪涵,劉純杰.  生物技術通訊. 2018(01)
[2]擬態(tài)弧菌感染黃顙魚的動態(tài)病理損傷及病原分布研究[J]. 陳成,耿毅,汪開毓,余澤輝,陳德芳,歐陽萍,黃小麗,李亞軍,唐俊輝.  南方水產科學. 2017(01)
[3]育肥飼料中蝦青素含量對雄性中華絨螯蟹腸道和鰓部可培養(yǎng)優(yōu)勢細菌數(shù)量和組成的影響[J]. 馬文元,吳旭干,張小明,趙慶,劉燦,龍曉文,成永旭,張慶華.  水產學報. 2016(09)
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[6]16SrRNA基因序列分析技術在腸道菌群檢測中的應用進展[J]. 徐愛蕾,黃毅,王為.  臨床消化病雜志. 2015(03)
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[8]草魚與團頭魴腸道菌群結構比較分析[J]. 王純,倪加加,顏慶云,李金金,李星浩,余育和.  水生生物學報. 2014(05)
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博士論文
[1]鯉魚早期發(fā)育階段腸道菌群的分析及其免疫相關性研究[D]. 王蕾.山東師范大學 2017
[2]嗜水氣單胞菌誘導的草魚腸道炎癥機制研究[D]. 宋學宏.蘇州大學 2015
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碩士論文
[1]膽汁酸對草魚生長、脂質代謝及腸道微生物區(qū)系的影響[D]. 陳昊杰.西北農林科技大學 2016
[2]感染嗜水氣單胞菌草魚腸道菌群結構研究[D]. 李東亮.西北農林科技大學 2016
[3]鮰愛德華氏菌感染黃顙魚的病理形態(tài)學及病原分布研究[D]. 廖雨婷.四川農業(yè)大學 2012
[4]斑馬魚腸道微細結構及腸粘膜屏障的研究[D]. 姚一琳.南京農業(yè)大學 2010
[5]泰山螭霖魚腸道組織學和免疫組織化學的研究[D]. 張金花.山東農業(yè)大學 2002



本文編號:3699155

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