本研究旨在探討嗜水氣單胞菌（Aeromonashydrophila,Ah）脅迫下MHCⅠ基因在東北林蛙不同組織的表達(dá)特征,為揭示兩棲類抗感染免疫應(yīng)答機(jī)制提供依據(jù)。文中首先構(gòu)建嗜水氣單胞菌感染下的試驗(yàn)動(dòng)物模型,通過(guò)蘇木精-伊紅染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE染色）觀察病理學(xué)變化;利用RT-PCR克隆東北林蛙MHCⅠ基因α1+α2肽結(jié)合區(qū)并進(jìn)行生物信息學(xué)分析,再運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)Ah脅迫下MHCⅠ在不同組織中的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果表明:在Ah感染后,皮膚、肝臟和肌肉等組織均出現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)消失和紋理紊亂等現(xiàn)象;獲得MHCⅠ基因α1+α2肽結(jié)合區(qū)片段494bp,可編碼164個(gè)氨基酸,與兩棲類同源性在77%以上,與哺乳類同源性低至14.96%,表明MHCⅠ基因α1+α2區(qū)在不同物種間保守性較低;熒光定量PCR結(jié)果顯示,在Ah脅迫下,實(shí)驗(yàn)組肝臟、脾臟、腎臟、皮膚和肌肉組織MHCⅠ基因的轉(zhuǎn)錄水平在72 h前均高于對(duì)照組,但是各組織到達(dá)峰值的時(shí)間具有差異性（P＜0.01）,表明Ah脅迫下MHCⅠ基因在不同組織的表達(dá)時(shí)間存在差異。研究結(jié)果為進(jìn)一步探究MHC分子在抗感染中... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和菌株
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 儀器設(shè)備
    1.2 方法
        1.2.1 東北林蛙的人工感染和樣品采集
        1.2.2 引物設(shè)計(jì)
        1.2.3 東北林蛙MHCⅠ類α1+α2的克隆及生物信息學(xué)分析
        1.2.4 東北林蛙病理組織切片的制備
        1.2.5 東北林蛙MHCⅠ類基因的熒光定量PCR分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 東北林蛙MHCⅠ基因α1+α2區(qū)的克隆與鑒定
    2.2 東北林蛙MHCⅠ基因α1+α2區(qū)序列的生物信息學(xué)分析
    2.3 嗜水氣單胞菌脅迫下東北林蛙組織的病理鑒定
    2.4 東北林蛙MHCⅠ基因在不同組織中的轉(zhuǎn)錄水平
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]東北林蛙MHC基因的多態(tài)性及其遺傳進(jìn)化[D]. 陶久臣.哈爾濱師范大學(xué) 2019
[2]峨眉樹(shù)蛙和斑腿樹(shù)蛙MHCⅠ類基因的多態(tài)性及其進(jìn)化[D]. 王永珍.華中師范大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3697593