本研究通過大田放養(yǎng)、花粉飼喂、稻桿粉作用3種方式，以成年泥鰍機體Cry1Ab/Ac蛋白含量、生長發(fā)育、生理酶活性、血常規(guī)與紅細胞核及組織學(xué)為試驗指標，以非轉(zhuǎn)基因親本水稻明恢63（MH63）為對照，評價了轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻華恢1號（HH1）對泥鰍的安全性影響。試驗取得了以下研究結(jié)果： 一、轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻及泥鰍不同器官中的毒蛋白含量 采用雙抗體夾心ELISA方法，選用EnvirLogix公司Cry1Ab/Ac試劑盒，分別檢測不同生長期的水稻。結(jié)果表明HH1水稻不同器官（根、莖、葉、花、種子）良好的表達了Cry1Ab/Ac蛋白，在生長周期中呈現(xiàn)為成熟期＞揚花期＞拔節(jié)期。 水稻拔節(jié)、揚花和成熟時，HH1水稻田間泥鰍的鰓、腸、胃、肌肉和性腺中Cry1Ab/Ac蛋白含量均低于最低檢測值0.2ng/g。 二、轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻對泥鰍生長性能的影響 通過鮮重稱量，結(jié)合生物參數(shù)計算公式，統(tǒng)計結(jié)果顯示，2012年HH1稻田環(huán)境對泥鰍的增重率、肥滿度、內(nèi)臟系數(shù)、肝體比和成熟系數(shù)沒有影響（P＞0.05）。2013年于HH1水稻拔節(jié)期、揚花期、成熟... 

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 Bt 蛋白
        1.1.1 蘇云金芽孢桿菌及其殺蟲晶體蛋白
        1.1.2 Bt 蛋白的分類與命名
        1.1.3 Bt 蛋白殺蟲的作用機理
        1.1.4 Bt 蛋白檢測方法
    1.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻研究現(xiàn)狀
        1.2.1 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻培育
        1.2.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻的抗性評價
    1.3 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻的生態(tài)安全性研究進展
        1.3.1 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻對非靶標動物的影響
        1.3.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻花粉漂移及安全性影響
        1.3.3 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲稻田土壤殘留及安全性研究
    1.4 選題依據(jù)、研究意義及技術(shù)路線
        1.4.1 目的和意義
        1.4.2 技術(shù)路線
第二章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 水稻及田間泥鰍不同器官中的毒蛋白含量
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試稻種與泥鰍
        2.1.2 水稻種植與泥鰍放養(yǎng)
        2.1.3 樣品采集與稻田水體 pH 測定
        2.1.4 Bt 蛋白含量檢測
        2.1.5 儀器設(shè)備與試劑
        2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 稻田水體環(huán)境的 pH 值
        2.2.2 水稻不同器官在不同生長期 Cry1Ab/Ac 蛋白的表達量
        2.2.3 泥鰍不同器官中 Cry1Ab/Ac 蛋白含量檢測
    2.3 結(jié)論
第三章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍生長性能的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試水稻
        3.1.2 供試花粉
        3.1.3 供試稻桿粉
        3.1.4 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲稻田環(huán)境對泥鰍的毒性試驗設(shè)計
        3.1.5 飼料中添加花粉對泥鰍的毒性試驗設(shè)計
        3.1.6 添加稻桿粉在水體中對泥鰍的毒性試驗設(shè)計
        3.1.7 測定方法
        3.1.8 參數(shù)計算
        3.1.9 儀器設(shè)備與實驗用品
        3.1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 水稻環(huán)境對泥鰍生長情況的影響
        3.2.2 飼料中添加花粉對泥鰍生長情況的影響
        3.2.3 稻桿粉對試驗水環(huán)境 pH、溶解氧的影響
        3.2.4 稻桿粉對泥鰍生長情況的影響
    3.3 結(jié)論
第四章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍酶活性的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試材料
        4.1.2 粗酶液提取
        4.1.3 酶活檢測方法
        4.1.4 儀器設(shè)備
        4.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍抗氧化酶的影響
            4.2.1.1 稻田環(huán)境對泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
            4.2.1.2 花粉對泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
            4.2.1.3 稻桿粉對泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
        4.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍解毒酶的影響
            4.2.2.1 稻田環(huán)境對泥鰍 GST 酶的影響
            4.2.2.2 花粉對泥鰍 GST 酶活性的影響
            4.2.2.3 稻桿粉對泥鰍 GST 酶的影響
        4.2.3 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.1 稻田環(huán)境對泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.2 花粉對泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.3 稻桿粉對泥鰍蛋白水解酶的影響
        4.2.4 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.1 稻田環(huán)境對泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.2 花粉對泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.3 稻桿粉對泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
    4.3 結(jié)論
第五章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍血常規(guī)及血紅細胞核的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試材料
        5.1.2 血常規(guī)測定
        5.1.3 血涂片制作
        5.1.4 儀器設(shè)備與藥品試劑
        5.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍血紅蛋白的影響
        5.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍高鐵血紅蛋白的影響
        5.2.3 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍血紅細胞核的影響
        5.2.4 花粉對泥鰍血紅細胞核的影響
        5.2.5 稻桿粉對泥鰍血紅細胞核的影響
    5.3 小結(jié)
第六章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍性腺組織的影響
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試材料
        6.1.2 石蠟切片制作方法
        6.1.3 儀器設(shè)備與藥品試劑
    6.2 結(jié)果
        6.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍卵巢的影響
        6.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對泥鰍精巢的影響
    6.3 小結(jié)
第七章 結(jié)論與討論
參考文獻
致謝
附錄 A
附錄 B
附錄 C
附錄 D


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3682292