本研究通過大田放養(yǎng)、花粉飼喂、稻桿粉作用3種方式，以成年泥鰍機(jī)體Cry1Ab/Ac蛋白含量、生長(zhǎng)發(fā)育、生理酶活性、血常規(guī)與紅細(xì)胞核及組織學(xué)為試驗(yàn)指標(biāo)，以非轉(zhuǎn)基因親本水稻明恢63（MH63）為對(duì)照，評(píng)價(jià)了轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻華恢1號(hào)（HH1）對(duì)泥鰍的安全性影響。試驗(yàn)取得了以下研究結(jié)果： 一、轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻及泥鰍不同器官中的毒蛋白含量 采用雙抗體夾心ELISA方法，選用EnvirLogix公司Cry1Ab/Ac試劑盒，分別檢測(cè)不同生長(zhǎng)期的水稻。結(jié)果表明HH1水稻不同器官（根、莖、葉、花、種子）良好的表達(dá)了Cry1Ab/Ac蛋白，在生長(zhǎng)周期中呈現(xiàn)為成熟期＞揚(yáng)花期＞拔節(jié)期。 水稻拔節(jié)、揚(yáng)花和成熟時(shí)，HH1水稻田間泥鰍的鰓、腸、胃、肌肉和性腺中Cry1Ab/Ac蛋白含量均低于最低檢測(cè)值0.2ng/g。 二、轉(zhuǎn)Cry1Ab/Ac抗蟲水稻對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能的影響 通過鮮重稱量，結(jié)合生物參數(shù)計(jì)算公式，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，2012年HH1稻田環(huán)境對(duì)泥鰍的增重率、肥滿度、內(nèi)臟系數(shù)、肝體比和成熟系數(shù)沒有影響（P＞0.05）。2013年于HH1水稻拔節(jié)期、揚(yáng)花期、成熟... 

【文章頁(yè)數(shù)】：120 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 Bt 蛋白
        1.1.1 蘇云金芽孢桿菌及其殺蟲晶體蛋白
        1.1.2 Bt 蛋白的分類與命名
        1.1.3 Bt 蛋白殺蟲的作用機(jī)理
        1.1.4 Bt 蛋白檢測(cè)方法
    1.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻研究現(xiàn)狀
        1.2.1 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻培育
        1.2.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻的抗性評(píng)價(jià)
    1.3 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻的生態(tài)安全性研究進(jìn)展
        1.3.1 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻對(duì)非靶標(biāo)動(dòng)物的影響
        1.3.2 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲水稻花粉漂移及安全性影響
        1.3.3 轉(zhuǎn) Bt 基因抗蟲稻田土壤殘留及安全性研究
    1.4 選題依據(jù)、研究意義及技術(shù)路線
        1.4.1 目的和意義
        1.4.2 技術(shù)路線
第二章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 水稻及田間泥鰍不同器官中的毒蛋白含量
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試稻種與泥鰍
        2.1.2 水稻種植與泥鰍放養(yǎng)
        2.1.3 樣品采集與稻田水體 pH 測(cè)定
        2.1.4 Bt 蛋白含量檢測(cè)
        2.1.5 儀器設(shè)備與試劑
        2.1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 稻田水體環(huán)境的 pH 值
        2.2.2 水稻不同器官在不同生長(zhǎng)期 Cry1Ab/Ac 蛋白的表達(dá)量
        2.2.3 泥鰍不同器官中 Cry1Ab/Ac 蛋白含量檢測(cè)
    2.3 結(jié)論
第三章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍生長(zhǎng)性能的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試水稻
        3.1.2 供試花粉
        3.1.3 供試稻桿粉
        3.1.4 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲稻田環(huán)境對(duì)泥鰍的毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.1.5 飼料中添加花粉對(duì)泥鰍的毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.1.6 添加稻桿粉在水體中對(duì)泥鰍的毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.1.7 測(cè)定方法
        3.1.8 參數(shù)計(jì)算
        3.1.9 儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)用品
        3.1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 水稻環(huán)境對(duì)泥鰍生長(zhǎng)情況的影響
        3.2.2 飼料中添加花粉對(duì)泥鰍生長(zhǎng)情況的影響
        3.2.3 稻桿粉對(duì)試驗(yàn)水環(huán)境 pH、溶解氧的影響
        3.2.4 稻桿粉對(duì)泥鰍生長(zhǎng)情況的影響
    3.3 結(jié)論
第四章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍酶活性的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試材料
        4.1.2 粗酶液提取
        4.1.3 酶活檢測(cè)方法
        4.1.4 儀器設(shè)備
        4.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍抗氧化酶的影響
            4.2.1.1 稻田環(huán)境對(duì)泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
            4.2.1.2 花粉對(duì)泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
            4.2.1.3 稻桿粉對(duì)泥鰍 SOD、CAT 酶的影響
        4.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍解毒酶的影響
            4.2.2.1 稻田環(huán)境對(duì)泥鰍 GST 酶的影響
            4.2.2.2 花粉對(duì)泥鰍 GST 酶活性的影響
            4.2.2.3 稻桿粉對(duì)泥鰍 GST 酶的影響
        4.2.3 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.1 稻田環(huán)境對(duì)泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.2 花粉對(duì)泥鰍蛋白水解酶的影響
            4.2.3.3 稻桿粉對(duì)泥鰍蛋白水解酶的影響
        4.2.4 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.1 稻田環(huán)境對(duì)泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.2 花粉對(duì)泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
            4.2.4.3 稻桿粉對(duì)泥鰍乙酰膽堿酯酶的影響
    4.3 結(jié)論
第五章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍血常規(guī)及血紅細(xì)胞核的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試材料
        5.1.2 血常規(guī)測(cè)定
        5.1.3 血涂片制作
        5.1.4 儀器設(shè)備與藥品試劑
        5.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析方法
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍血紅蛋白的影響
        5.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍高鐵血紅蛋白的影響
        5.2.3 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍血紅細(xì)胞核的影響
        5.2.4 花粉對(duì)泥鰍血紅細(xì)胞核的影響
        5.2.5 稻桿粉對(duì)泥鰍血紅細(xì)胞核的影響
    5.3 小結(jié)
第六章 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍性腺組織的影響
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試材料
        6.1.2 石蠟切片制作方法
        6.1.3 儀器設(shè)備與藥品試劑
    6.2 結(jié)果
        6.2.1 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍卵巢的影響
        6.2.2 轉(zhuǎn) Cry1Ab/Ac 抗蟲水稻對(duì)泥鰍精巢的影響
    6.3 小結(jié)
第七章 結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 A
附錄 B
附錄 C
附錄 D


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Bt水稻田重要非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物暴露于Cry2Aa蛋白的程度分析[J]. 張青玲,李云河,華紅霞,楊長(zhǎng)舉,武紅巾,彭于發(fā).  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2013(06)
[2]Cry1Ab蛋白在蜘蛛體內(nèi)的富集及對(duì)蜘蛛相關(guān)酶活性的影響[J]. 周穎,魏寶陽(yáng),王智,李超民,羅翔宇,肖安琪.  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(07)
[3]轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因水稻對(duì)大螟幼蟲的取食、生長(zhǎng)及存活的影響[J]. 郭文娟,陸馳宇,熊應(yīng)強(qiáng),馬鶴娟,李紹勤.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2013(01)
[4]不同地區(qū)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻稻谷對(duì)赤擬谷盜生長(zhǎng)發(fā)育的影響[J]. 姚英娟,徐雪亮,嚴(yán)寒,蔡萬倫,林擁軍,華紅霞.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2012(06)
[5]轉(zhuǎn)基因水稻Bt汕優(yōu)63種植兩年對(duì)土壤線蟲群落的影響[J]. 李修強(qiáng),陳法軍,劉滿強(qiáng),陳小云,胡鋒.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(11)
[6]氨氮對(duì)泥鰍的急性毒性及對(duì)其肝、鰓組織超微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 郝小鳳,劉洋,凌去非.  水生態(tài)學(xué)雜志. 2012(05)
[7]不同蛋白質(zhì)和脂肪水平對(duì)1齡團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能和體組成的影響[J]. 蔣陽(yáng)陽(yáng),李向飛,劉文斌,吳陽(yáng),李貴鋒,朱浩.  水生生物學(xué)報(bào). 2012(05)
[8]Effect of vegetation of transgenic Bt rice lines and their straw amendment on soil enzymes, respiration, functional diversity and community structure of soil microorganisms under field conditions[J]. Hua Fang1,2, Bin Dong1,3, Hu Yan1, Feifan Tang1, Baichuan Wang1, Yunlong Yu1,2, 1. Institute of Pesticide and Environmental Toxicology, College of Agriculture and Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China. 2. Key Laboratory of Molecular Biology of Crop Pathogens and Insects, Ministry of Agriculture, Hangzhou 310058, China 3. Agricultural Service Center, Qidu, Wujiang 215234, China.  Journal of Environmental Sciences. 2012(07)
[9]蘇丹紅Ⅲ對(duì)泥鰍的急性毒性、遺傳及生理毒性研究[J]. 常重杰,王君,肖靜,王瓊瓊,杜啟艷.  水生態(tài)學(xué)雜志. 2012(04)
[10]轉(zhuǎn)Cry1Ab和Cry1Ac融合基因型抗蟲水稻對(duì)田間二化螟和大螟種群發(fā)生動(dòng)態(tài)的影響[J]. 李志毅,隋賀,徐艷博,韓蘭芝,陳法軍.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(06)

博士論文
[1]Bt抗蟲水稻的培育[D]. 唐微.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]CrylAb蛋白在轉(zhuǎn)基因水稻—褐飛虱—黑肩綠盲蝽間的傳遞路徑[D]. 安飛.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
[2]Bt水稻對(duì)蜘蛛生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的初步研究[D]. 肖凱夫.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]轉(zhuǎn)cry2Aa基因抗蟲水稻對(duì)中華通草蛉的潛在影響[D]. 王園園.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[4]轉(zhuǎn)基因水稻中Bt蛋白的表達(dá)規(guī)律及生態(tài)適應(yīng)性研究[D]. 華樺.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]轉(zhuǎn)基因生物Bt蛋白降解技術(shù)研究[D]. 喬文靜.西南大學(xué) 2010
[6]蘇云金芽孢桿菌菌株的分離和cry基因的鑒定[D]. 吳會(huì)賢.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[7]蘇云金桿菌三個(gè)亞種和兩個(gè)工程菌株殺蟲晶體蛋白的比較蛋白質(zhì)組研究[D]. 黃江麗.湖南師范大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3682292