為了鑒定CyHV-2的主要免疫原性蛋白,本研究用分離的CyHV-2-YC-1分離株（下簡稱CyHV-2）感染異育銀鯽尾鰭細(xì)胞系（GiCF）,用蔗糖密度梯度超速離心法對細(xì)胞感染液中的CyHV-2進(jìn)行純化,純化后的CyHV-2病毒免疫小鼠制備抗CyHV-2多克隆抗體。純化的病毒顆粒經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和考馬斯亮藍(lán)染色后,用抗CyHV-2多克隆抗體進(jìn)行Western blotting分析和質(zhì)譜鑒定。結(jié)果顯示,透射電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)50%～66%的蔗糖梯度多見完整囊膜包裹的CyHV-2病毒顆粒,也有少量囊膜破損的病毒顆粒。Western blotting結(jié)果顯示,抗CyHV-2多克隆抗體與多種病毒蛋白具有特異性免疫反應(yīng),質(zhì)譜鑒定顯示,其中8種主要免疫原性蛋白分別是ORF92、ORF115、ORF25、ORF57、ORF66、ORF72、ORF131和ORF132。研究表明,通過蔗糖密度梯度超速離心法提純CyHV-2病毒顆粒后,本研究制備的抗CyHV-2多克隆抗體能夠特異性識別CyHV-2病毒的主要免疫原性蛋白。本研究將為CyHV-2免疫學(xué)檢測方法的建立以及疫苗的研制提供更多... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鯉皰疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗體制備與免疫原性分析[J]. 周勇,史玉恒,范玉頂,劉文枝,江南,趙建青,許晨,曾令兵.  淡水漁業(yè). 2018(06)
[2]鯉皰疹病毒3型T分離株主要免疫原性蛋白的鑒定[J]. 鄭樹城,王慶,李瑩瑩,王英英,曾偉偉,任燕,石存斌.  淡水漁業(yè). 2018(02)
[3]鯉皰疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表達(dá)及免疫原性研究[J]. 廖紅,林華,郝中香,佘容,陳世界,楊苗,陳珍容,薛昌華,趙珊,韓國全,曹三杰,顏其貴.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2016(11)
[4]一種基于Ⅱ型鯉皰疹病毒衣殼蛋白72的免疫學(xué)檢測方法[J]. 孔善云,姜有聲,許丹,謝駿,呂利群.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2016(02)
[5]異育銀鯽感染鯉皰疹病毒Ⅱ型（CyHV-2）后血液生理生化指標(biāo)變化的研究[J]. 劉文枝,曾令兵,張輝,楊星,徐進(jìn),江南,周勇,馬杰.  上海海洋大學(xué)學(xué)報. 2013(06)
[6]鯉皰疹病毒2型武漢株的分離與鑒定[J]. 徐進(jìn),曾令兵,楊德國,張輝,馬杰,江南,范玉頂.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2013(06)



本文編號：3679104