哲羅魚早期發(fā)育階段免疫指標變化及vasa基因的克隆與表達分析
發(fā)布時間:2022-08-11 13:50
哲羅魚生長速度快,肉質(zhì)鮮美,屬珍稀冷水性魚類,具有較高的經(jīng)濟價值。隨哲羅魚人工養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大,苗種的需求量不斷增加,高質(zhì)量仔稚魚的大量產(chǎn)出是苗種培育的關(guān)鍵,苗種死亡率高成為制約哲羅魚人工養(yǎng)殖發(fā)展的因素之一。因此迫切需要對哲羅魚早期階段的免疫能力和生殖發(fā)育進行研究。因此,本實驗研究了哲羅魚早期發(fā)育階段的免疫酶活性和抗氧化物含量,睪酮和雌二醇的含量變化,仔稚魚期性腺發(fā)育情況,并對哲羅魚vasa基因進行克隆和表達分析,結(jié)果如下:1在哲羅魚早期發(fā)育階段,通過測定不同發(fā)育時期堿性磷酸酶(AKP),酸性磷酸酶(ACP),超氧化物歧化酶(SOD),過氧化氫酶(CAT)活力和還原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,研究魚體內(nèi)免疫酶活性變化和抗氧化物含量變化,發(fā)現(xiàn)哲羅魚胚胎期ACP活性明顯低于成魚期[1],說明在胚胎期ACP未發(fā)揮重要作用;但在破膜時,ACP活性顯著升高,推測ACP在哲羅魚出膜期發(fā)揮重要作用。在隨后的仔稚幼魚發(fā)育期,ACP活性一直維持在較高水平,保護魚體。而AKP活性顯著低于ACP。在胚胎期,AKP活性低且有所下降,只在破膜后至破膜后30d短暫升高后再次下降,表明在胚胎期A...
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
引言
1 哲羅魚概述
2 魚類早期階段的免疫機制
2.1 魚類免疫系統(tǒng)
2.2 胚胎至仔稚幼魚的免疫和抗氧化機制
3 魚類性腺分化
3.1 原始生殖細胞
3.2 PGCs 的分子標記 vasa 基因
第一章 哲羅魚早期階段免疫指標和抗氧化物酶的活性變化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
2.1 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 ACP 和 AKP 活性變化
2.2 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 SOD 和 CAT 活性變化
2.3 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 GSH 水平變化
2.4 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 MDA 水平變化
3 討論
3.1 哲羅魚早期發(fā)育階段磷酸酶的變化
3.2 哲羅魚早期發(fā)育階段抗氧化系統(tǒng)
3.3 哲羅魚早期發(fā)育階段 MDA 的變化
第二章 哲羅魚早期階段性腺發(fā)育和性類固醇激素的含量變化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果
2.1 哲羅魚早期階段 E2 水平的變化
2.2 哲羅魚早期階段 T 水平的變化
2.3 哲羅魚早期階段性腺發(fā)育
3 討論
第三章 哲羅魚 vasa 基因的克隆
1 vasa 基因研究的意義和研究進展
1.1 DEAD-box 家族
1.2 vasa 基因的研究進展
2 哲羅魚的生長階段劃分
2.1 胚胎階段
2.2 雌性哲羅魚卵巢發(fā)育分期
3 實驗?zāi)康暮鸵饬x
3.1 目的
3.2 意義
4 哲羅魚 vasa 基因的克隆和序列特征分析
4.1 材料
4.2 哲羅魚 vasa 基因克隆方法
4.3 結(jié)果
4.4 討論
第四章 哲羅魚 vasa 基因的表達分析
1 材料
1.1 實驗用魚
1.2 試劑和儀器
2 引物設(shè)計
3 實驗方法
3.1 總 RNA 的提取和轉(zhuǎn)錄
3.2 半定量 PCR
3.3 熒光定量 PCR
4 結(jié)果
5 討論
小結(jié)
參考文獻
致謝
本文編號:3674775
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1 哲羅魚概述
2 魚類早期階段的免疫機制
2.1 魚類免疫系統(tǒng)
2.2 胚胎至仔稚幼魚的免疫和抗氧化機制
3 魚類性腺分化
3.1 原始生殖細胞
3.2 PGCs 的分子標記 vasa 基因
第一章 哲羅魚早期階段免疫指標和抗氧化物酶的活性變化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
2.1 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 ACP 和 AKP 活性變化
2.2 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 SOD 和 CAT 活性變化
2.3 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 GSH 水平變化
2.4 胚胎至仔稚幼魚期哲羅魚的 MDA 水平變化
3 討論
3.1 哲羅魚早期發(fā)育階段磷酸酶的變化
3.2 哲羅魚早期發(fā)育階段抗氧化系統(tǒng)
3.3 哲羅魚早期發(fā)育階段 MDA 的變化
第二章 哲羅魚早期階段性腺發(fā)育和性類固醇激素的含量變化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果
2.1 哲羅魚早期階段 E2 水平的變化
2.2 哲羅魚早期階段 T 水平的變化
2.3 哲羅魚早期階段性腺發(fā)育
3 討論
第三章 哲羅魚 vasa 基因的克隆
1 vasa 基因研究的意義和研究進展
1.1 DEAD-box 家族
1.2 vasa 基因的研究進展
2 哲羅魚的生長階段劃分
2.1 胚胎階段
2.2 雌性哲羅魚卵巢發(fā)育分期
3 實驗?zāi)康暮鸵饬x
3.1 目的
3.2 意義
4 哲羅魚 vasa 基因的克隆和序列特征分析
4.1 材料
4.2 哲羅魚 vasa 基因克隆方法
4.3 結(jié)果
4.4 討論
第四章 哲羅魚 vasa 基因的表達分析
1 材料
1.1 實驗用魚
1.2 試劑和儀器
2 引物設(shè)計
3 實驗方法
3.1 總 RNA 的提取和轉(zhuǎn)錄
3.2 半定量 PCR
3.3 熒光定量 PCR
4 結(jié)果
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本文編號:3674775
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