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深海嗜熱噬菌體GVE2裂解宿主菌的機(jī)制及GVE2感染相關(guān)代謝物的功能研究

發(fā)布時間:2022-08-01 12:23
  眾所周知,海洋覆蓋了地球70%多的地表,蘊(yùn)育著豐富和獨特的生物資源,相比于陸生生物資源,人們對于海洋生物資源的認(rèn)識和開發(fā)還處于起步階段。自從1977年美國阿爾文號深潛器在太平洋首次發(fā)現(xiàn)了深海熱液口后,深海熱液口的生態(tài)系統(tǒng)和生物資源便受到了人們極大的關(guān)注。在深海熱液口生態(tài)系統(tǒng)中,一些化能合成細(xì)菌和古菌能夠利用地?zé)崮芎突軄砗铣捎袡C(jī)物,它們是整個生態(tài)系統(tǒng)中食物鏈的基礎(chǔ)。近年來的研究發(fā)現(xiàn)在這些細(xì)菌和古細(xì)菌中存在著大量的病毒,這些病毒能夠通過裂解細(xì)菌和古菌來破壞食物鏈的基礎(chǔ),從而極大地影響熱液口生態(tài)系統(tǒng)的群落結(jié)構(gòu)。同時,這些嗜熱病毒還能夠通過裂解宿主菌釋放出可溶性的有機(jī)物來參與地球化學(xué)物質(zhì)循環(huán)。因此對嗜熱病毒尤其是嗜熱菌噬菌體裂解宿主菌分子機(jī)理的研究,不僅能讓我們了解在高溫條件下病毒是如何裂解宿主菌的,而且在我們理解嗜熱病毒對深海熱液口生物群落和地球化學(xué)物質(zhì)循環(huán)的作用方面具有非常重要的意義。本試驗研究了深海熱液口高溫噬菌體GVE2裂解其宿主嗜熱細(xì)菌Geobacillus sp. E263的分子機(jī)理。我們的研究發(fā)現(xiàn),作為雙鏈DNA噬菌體,GVE2能通過編碼兩種蛋白endolysin和holin來... 

【文章頁數(shù)】:161 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
    1.1 嗜熱微生物和噬菌體研究進(jìn)展
        1.1.1 嗜熱微生物研究進(jìn)展
        1.1.2 嗜熱噬菌體研究進(jìn)展
    1.2 噬菌體裂解宿主菌機(jī)制研究進(jìn)展
        1.2.1 常溫噬菌體裂解宿主菌機(jī)制概述
        1.2.2 常溫噬菌體裂解宿主過程的調(diào)控
    1.3 海洋生物次生代謝產(chǎn)物與代謝組學(xué)
        1.3.1 海洋生物的次生代謝產(chǎn)物
        1.3.2 代謝組學(xué)
    1.4 代謝物與腫瘤發(fā)生和發(fā)展的關(guān)系
        1.4.1 腫瘤中的代謝改變
        1.4.2 抗腫瘤藥物的研究
    1.5 本文研究的目的和意義
材料與方法
    2.1. 材料
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 細(xì)胞系、菌株和質(zhì)粒
        2.1.3 試驗試劑
        2.1.4 數(shù)據(jù)分析軟件
        2.1.5 引物序列
        2.1.6 設(shè)備與儀器
        2.1.7 主要培養(yǎng)基與常用溶液
    2.2 試驗方法
結(jié)果與分析
    3.1 GVE2裂解宿主嗜熱細(xì)菌Geobacillus sp.E263的分子機(jī)理
        3.1.1 氯化銫梯度離心法純化高溫噬菌體GVE2
        3.1.2 噬菌體GVE2感染導(dǎo)致宿主菌的裂解
        3.1.3 裂解相關(guān)基因endolysin和holin的表達(dá)時相分析
        3.1.4 endolysin-GFP在宿主菌中的定位分析
        3.1.5 endolysin的互作蛋白
    3.2 Geobacillus sp.E263骨架蛋白MreB在GVE2侵染中的作用
    3.3 噬菌體GVE2感染相關(guān)代謝產(chǎn)物的功能研究
        3.3.1 噬菌體感染相關(guān)代謝產(chǎn)物在宿主抵抗GVE2侵染中的作用
            3.3.1.1 噬菌體感染相關(guān)代謝產(chǎn)物的篩選
            3.3.1.2 外源性色醇添加條件的確定
            3.3.1.3 噬菌體感染相關(guān)代謝物在噬菌體感染中的作用
        3.3.2 GVE2感染相關(guān)代謝物的抗腫瘤作用分析
討論
小結(jié)與展望
    小結(jié)
    展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Caspase家族與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J]. 趙瑞杰,李引乾,王會,王廣彬,娜日蘇,金大鵬,關(guān)偉軍,馬月輝.  中國畜牧雜志. 2010(17)
[2]海洋微生物資源及其產(chǎn)生生物活性代謝產(chǎn)物的研究[J]. 李越中,陳琦.  生物工程進(jìn)展. 2000(05)



本文編號:3667443

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