為了解促性腺激素α基因（Gt Hα）在施氏鱘Acipenser schrenckii性腺分化過程中的表達、分布及調(diào)控作用。采用同源性克隆和c DNA末端快速擴增（RACE）方法從施氏鱘垂體中克隆了Gt Hα基因的全長c DNA序列。通過腹腔注射不同劑量（1μg/kg、3μg/kg和5μg/kg）的LHRH-A,應用RT-qPCR方法檢測在注射LHRH-A后不同時段（1 d、3 d、5 d、7 d）施氏鱘垂體和性腺中Gt Hα基因的表達變化,并研究Gt Hα在心、肝、脾、腎、垂體等不同組織中的表達分布。結(jié)果表明:Gt Hα基因的全長c DNA序列中包含54 bp的5’非編碼區(qū)、348 bp的開放閱讀框和243 bp的3’非編碼區(qū)。該基因共編碼115個氨基酸,蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)主要以α-螺旋和無規(guī)則卷曲為主,屬于含有信號肽、跨膜結(jié)構(gòu)且分泌到細胞外的親水性蛋白。氨基酸同源性和進化分析表明,施氏鱘與中華鱘Acipenser sinensis Gt Hα序列一致性最高,與鱘科魚類親緣關(guān)系最近。實時熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn),Gt Hα基因的表達具有組織特異性,在性腺、垂體中的表達量較高,顯著高于肌肉、腸... 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料及樣品采集
    1.2 總RNA的提取和c DNA合成
    1.3 施氏鱘Gt Hα基因全長克隆
    1.4 施氏鱘Gt Hα基因的序列分析
    1.5 實時熒光定量PCR
    1.6 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 施氏鱘Gt Hα的序列分析和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預測
    2.2 施氏鱘Gt Hα氨基酸同源性比較及系統(tǒng)進化分析
    2.3 施氏鱘Gt Hα在不同組織中的表達
    2.4 LHRH-A對施氏鱘Gt Hαm RNA表達的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3658929