無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）又被稱為B族鏈球菌,是一種會導致人體和動物患病的重要病原體,該菌也會引起水生物種的多種疾病。無乳鏈球菌在水產養(yǎng)殖中是導致羅非魚患病的主要致病菌,抗生素是治療羅非魚無乳鏈球菌病的主要手段。然而由于抗生素的不合理使用,無乳鏈球菌產生了嚴重的耐藥性,導致抗生素治療效果下降甚至失敗,嚴重威脅羅非魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。因此,亟待研發(fā)全新機制的抗羅非魚無乳鏈球菌感染的藥物。中草藥在我國具有長久的使用歷史,具有原材料來源廣泛、低毒或無毒性、活性物質多等優(yōu)勢,中草藥成為代替抗生素治療疾病的首要選擇。分選酶A（Srt A）是一種轉肽酶,是由大部分革蘭氏陽性菌分泌的,與細菌粘附在宿主細胞表面的過程有關,是研究抗革蘭氏陽性菌藥物的靶標。本文以Srt A為靶標,研究了蘆丁對無乳鏈球菌體外致病力的作用,研究結果如下:1. 本文首先對無乳鏈球菌ATCC 51487的Srt A進行了研究,通過采用分子克隆、原核表達純化和活性試驗等一系列方法,探索了無乳鏈球菌重組Srt A的表達純化條件和功能。結果顯示,試驗構建的srt A_△N82-p... 

【文章來源】：上海海洋大學上海市

【文章頁數】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 文獻綜述
    1.1 無乳鏈球菌的研究進展
        1.1.1 無乳鏈球菌的流行病學
        1.1.2 無乳鏈球菌的發(fā)病機理
        1.1.3 無乳鏈球菌的毒力因子和血清學
        1.1.4 無乳鏈球菌的檢測方法和分子分型
    1.2 藥物與細菌性疾病治療研究進展
        1.2.1 化學性藥物
        1.2.2 植物性藥物
        1.2.3 疫苗
        1.2.4 微生物類
    1.3 研究的目的和意義
第二章 無乳鏈球菌分選酶A的表達、純化與活性
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結果與分析
        2.2.1 srt A-p GEX-6p-1 重組表達載體的構建
        2.2.2 SrtA的表達與條件優(yōu)化
        2.2.3 蛋白純化
        2.2.4 分選酶活性測定
        2.2.5 分選酶的Km值測定
    2.3 討論
第三章 蘆丁對分選酶SrtA活性的作用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結果
        3.2.1 蘆丁對SrtA的活性抑制效果
        3.2.2 蘆丁對無乳鏈球菌的最小抑菌濃度和生長曲線
        3.2.3 蘆丁與無乳鏈球菌對纖維連接蛋白的黏附作用
        3.2.4 蘆丁對無乳鏈球菌生物被膜生長的影響
    3.3 討論
第四章 蘆丁對Srr1在無乳鏈球菌表面錨定的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結果
        4.2.1 Srr1核酸序列與氨基酸序列
        4.2.2 Srr1抗原誘導表達
        4.2.3 Srr1抗原蛋白純化結果
        4.2.4 Srr1抗體純化效價、濃度及表達
        4.2.5 Srr1的Dot-blot結果
    4.3 討論
第五章 結論與展望
    5.1 研究結論
    5.2 展望
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]無乳鏈球菌的分子分型及耐藥特征分析[J]. 南征,周芳,閆東輝,蘇建榮,周妍妍.  疾病監(jiān)測. 2019(12)
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[3]幾種消毒劑對弧菌的抑制效果研究[J]. 孫昌飛,祭仲石,韋艷,朱建樓,趙光明.  科學養(yǎng)魚. 2019(10)
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[5]水產養(yǎng)殖中益生菌研究進展[J]. 田啟文,郭振,嵇樂樂,賀帥,劉培,朱小燕,李相前.  工業(yè)微生物. 2019(04)
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博士論文
[1]羅非魚無乳鏈球菌病病原學、病理學及cpsE基因的原核表達研究[D]. 黃錦爐.四川農業(yè)大學 2012

碩士論文
[1]金黃色葡萄球菌Sortase A小分子抑制劑的研究[D]. 倪騰鳳.中國科學院上海藥物研究所 2016
[2]瞬時受體電位通道蛋白小分子配體的設計與合成[D]. 宋珍臻.浙江理工大學 2015



本文編號：3633382