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三個(gè)Tetraspanin蛋白的表達(dá)及其在WSSV感染中的作用分析

發(fā)布時(shí)間:2022-02-15 08:56
  白斑綜合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是目前對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)最嚴(yán)重的病原,給全世界范圍內(nèi)的對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了巨大損失,到目前為止尚無(wú)有效的治療手段。因此分析WSSV的侵染機(jī)制和致病機(jī)理對(duì)尋找WSSV的防治方法至關(guān)重要。Tetraspanin蛋白是一類(lèi)較保守的四次跨膜糖蛋白,廣泛分布于不同物種中。通過(guò)形成tetraspanin蛋白網(wǎng)格參與細(xì)胞生長(zhǎng)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動(dòng),此外在病原的侵染、腫瘤細(xì)胞遷移等免疫過(guò)程中也起到重要作用。本文研究了tetraspanin蛋白在WSSV感染中的作用,主要研究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)方面:第一章:根據(jù)Gen Bank公布的中國(guó)明對(duì)蝦Tetraspanin-3(Fc T3)基因序列,設(shè)計(jì)特異性引物,經(jīng)PCR擴(kuò)增得到Tetraspanin-3蛋白大胞外環(huán)區(qū)域(Large extracellularloop,LEL)的基因片段,酶切后成功構(gòu)建原核表達(dá)載體p BAD/gⅢA-T3L并轉(zhuǎn)化入大腸桿菌TOP10感受態(tài)細(xì)胞中。測(cè)序正確的菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),經(jīng)L-阿拉伯糖誘導(dǎo)表達(dá)。采用鈷離子親和層析法純化表達(dá)的蛋白,質(zhì)譜分析顯示表達(dá)的蛋白為Fc T3... 

【文章來(lái)源】:上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】:90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

三個(gè)Tetraspanin蛋白的表達(dá)及其在WSSV感染中的作用分析


PCR擴(kuò)增FcT3L.Fig.1-1.AmplicationofFcT3LbyPCRM:DNA標(biāo)準(zhǔn)品DL2000;1:陰性對(duì)照;2:T3L基因;M:DNAMarkerDL2000;1:Negativecontrol;

菌落PCR,標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)序,相符合


菌落PCR結(jié)果,Fig.1-2.Colony-PCRM:DNA標(biāo)準(zhǔn)品DL2000;1:陰性對(duì)照;2-3:重組FcT3LM:DNAMarkerDL2000;1:Negativecontrol;2-3:RecombinantFcT3L

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),分析表,條帶,菌液


SDS-PAGE分析表達(dá)的FcT3L.Fig.1-3.SDS-PAGEanalysisofFcT3LexpressedinE.coliM:蛋白分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);1:對(duì)照;2:FcT3L菌液M.ProteinmolecularweightMarker;1:Control;2:RecombinantFcT3L

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]對(duì)蝦白斑綜合癥病毒囊膜蛋白VP19的融合表達(dá)及其抗病毒感染作用[J]. 賈啟軍,孟小林,徐進(jìn)平,王健,魯偉.  Virologica Sinica. 2006(06)
[2]白斑癥病毒感染與病毒囊膜完整性的關(guān)系[J]. 王曉潔,邢婧,繩秀珍,周麗,戰(zhàn)文斌.  中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(05)

博士論文
[1]中國(guó)對(duì)蝦白斑癥病毒(WSSV)血細(xì)胞受體蛋白的研究[D]. 唐小千.中國(guó)海洋大學(xué) 2010



本文編號(hào):3626333

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