副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是全球范圍內由海產品引起食源性疾病的首要致病菌。雖然溶血素、粘附素、III型（T3SS）及Ⅵ型（T6SS）分泌系統(tǒng)已被揭示為其主要毒力因子,但它們的調控機制仍不明確。近年來發(fā)現由Ser/Thr蛋白激酶引起的蛋白質磷酸化修飾是細菌功能調控的核心,且與毒力密切相關。本研究通過生物信息學分析發(fā)現,VP0057基因編碼Ser/Thr蛋白激酶,可能具有介導蛋白質磷酸化修飾的作用,因此探討了VP0057對副溶血弧菌毒力的調控作用及相關的分子機制。首先通過同源互補的方式構建VP0057缺失菌株（△VP0057）,比較正常副溶血弧菌（VP）與△VP0057的生長、對He La細胞的粘附、生物被膜的產生以及二者中編碼T3SS效應蛋白的基因的表達等方面的差異來探討VP0057對副溶血弧菌毒力的調控作用。結果表明在正常培養(yǎng)基LBS和細胞培養(yǎng)基RPMI1640中△VP0057的生長速度均慢于VP;△VP0057在對HeLa細胞的粘附力和形成生物被膜的產量方面均弱于VP;與VP相比,△VP0057中編碼T3SS效應蛋白基因的表達降低,表明VP0057的... 

【文章來源】：浙江理工大學浙江省

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

VP0057和PknB的激酶結構域的氨基酸序列對比

VP0057及PknB激酶結構域三維結構

碩士學位論文 副溶血弧菌Ser/Thr蛋白激酶VP0057對其毒力的調控及分子機制研究圖 2.2VP0057 及 PknB 激酶結構域三維結構Fig 2.2 The three dimensional structure of kinase domain of VP0057and PknB

【參考文獻】：
期刊論文
[1]副溶血弧菌VPA1045和VPA1049調節(jié)Hcp2蛋白轉位[J]. 俞盈,張晏,李俊,楊虹,宋厚輝,方維煥.  微生物學報. 2012(08)
[2]Bacterial Phosphoproteomic Analysis Reveals the Correlation Between Protein Phosphorylation and Bacterial Pathogenicity[J]. Ruiguang Ge and Weiran Shan Laboratory of Integrative Biosciences, College of Life Sciences, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510275, China.  Genomics, Proteomics & Bioinformatics. 2011(Z2)
[3]副溶血弧菌的Ⅲ型分泌系統(tǒng)[J]. 俞盈,吳蓓蓓,方維煥.  微生物學報. 2009(07)
[4]胸膜肺炎放線桿菌萘啶酸抗性菌株的選育和信號標簽突變株的構建[J]. 商霖,李薇,李良軍,黎璐,張四化,李婷婷,李耀坤,劉磊,郭志偉,周銳,陳煥春.  微生物學報. 2008(01)



本文編號：3620733