近些年來,由于在自然風(fēng)和潮汐、水溫、季節(jié)變化以及污水排放、海岸線開發(fā)等自然與人為因素的綜合影響下,軍曹魚近海養(yǎng)殖的海域頻繁出現(xiàn)周期性和連續(xù)性的低氧狀況。而現(xiàn)階段相對(duì)養(yǎng)殖密度較高的養(yǎng)殖海區(qū)更是加劇了低氧現(xiàn)象的頻繁發(fā)生,直接影響到未來軍曹魚養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。目前關(guān)于軍曹魚低氧的研究主要集中在生理生化機(jī)制方面,關(guān)于軍曹魚對(duì)低氧適應(yīng)的分子調(diào)節(jié)機(jī)制尚未見報(bào)道。鑒于此,本研究以軍曹魚幼魚為實(shí)驗(yàn)材料,研究了急性低氧下對(duì)幼魚肝臟代謝機(jī)能狀態(tài)變化以及低氧-復(fù)氧下對(duì)軍曹魚血清生化指標(biāo)變化、鰓及肝組織的損傷情況及肝臟轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的比較分析,并采用c DNA末端快速擴(kuò)增（RACE）和實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RQ-PCR）技術(shù),克隆軍曹魚低氧相關(guān)基因血紅素加氧酶基因（Heme oxygenase,HO）,探究低氧-復(fù)氧下HO基因在不同組織中的表達(dá)變化。研究結(jié)果如下:1、急性低氧對(duì)軍曹魚幼魚肝臟代謝機(jī)能狀態(tài)變化的影響。急性低氧脅迫后,軍曹魚肝臟超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性均降低,與脅迫前差異極顯著;脂質(zhì)過氧化物（LPO）活性、丙二醛（MDA）含量均升高,與脅迫前差異極顯著;過氧化... 

【文章來源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響

低氧環(huán)境對(duì)軍曹魚幼魚生化指標(biāo)、相關(guān)基因表達(dá)的影響及其轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析102.2.2急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟能量利用的影響急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟糖原含量、ATP酶活性的影響見圖2-2。由圖2-2可知，低氧脅迫后，糖原含量比脅迫前降低了9.4mg/g（95%CI：6.062至12.75），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.234，df=4，P=0.0008<0.01）。ATP酶活性比脅迫前下降了3.8（U/mgprot）（95%CI：1.999至5.505），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.502，df=4，P=0.0027<0.01）。圖2-2急性低氧對(duì)軍曹魚糖肝臟原含量（a）和ATP酶活性（b）的影響Fig.2-2Effectsofacutehypoxiaonglycogencontent(a)andATPaseactivity(b)inliverofcobia.注：**表示差異極顯著（P<0.01）Notes：**showsextremelysignificantdifference.2.2.3急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟糖代謝的影響急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟乳酸脫氫酶活性、丙酮酸激酶活性和已糖激酶活性見圖2-3。由圖2-3可知，急性低氧脅迫后，乳酸脫氫酶活性比脅迫前升高了115.5（U/mgprot），（95%CI：-143.4至-87.67），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=10.66，df=4，P=0.0001<0.01）。丙酮酸激酶活性比脅迫前升高了1.1（U/mgprot），（95%CI：-1.132至-1.014），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=46.87，df=4，P=0.0001<0.01）。已糖激酶活性活性比脅迫前升高了1.3（U/mgprot），（95%CI：-1.824至-0.7462），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.132，df=4，P=0.0017<0.01）。

廣東海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文11圖2-3急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟乳酸脫氫酶活性（a）、丙酮酸激酶活性（b）和已糖激酶活性（c）的影響Fig.2-3Effectsofacutehypoxiaonlacticdehydrogenaseactivity(a)、pyruvatekinaseactivity(b)andhexokinaseactivity(c)inliverofcobia.注：**表示差異極顯著（P<0.01）Notes：**showsextremelysignificantdifference.2.3討論2.3.1急性低氧對(duì)軍曹魚肝臟氧化應(yīng)激的影響研究表明，魚類在低氧環(huán)境下，有氧呼吸速率下降，活性氧(ROS)的增加會(huì)對(duì)魚類的抗氧化功能產(chǎn)生一定的影響，從而引起魚類的氧化應(yīng)激[76,79]。當(dāng)過多的ROS無法被魚類自身及時(shí)有效地消除時(shí),這些多余的ROS會(huì)引發(fā)諸如蛋白、核酸等生物大分子的加重氧化，生成可能直接破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能完整性的過氧化物產(chǎn)物，引起各種生理機(jī)能的改變，最終誘發(fā)疾病的發(fā)生[77,80]。為了減少ROS的積累，在改善細(xì)胞保護(hù)和降低氧化應(yīng)激水平的同時(shí)，魚類在長(zhǎng)期適應(yīng)和進(jìn)化過程中形成了一系列具有抗氧化酶（SOD，CAT，GSH-Px）和小分子抗氧化劑（類胡蘿卜素，維生素等）的抗氧化系統(tǒng)[79,81,82]。本研究中，軍曹魚幼魚經(jīng)歷急性低氧脅迫后，肝臟SOD、GSH-Px活性極顯著低于脅迫前水平（P<0.01），CAT活性比預(yù)應(yīng)力水平略低，但沒有顯著差異（P>0.05），這表明它在肝臟ROS系統(tǒng)不能有效地去除抗氧化酶，機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激，最終導(dǎo)致MDA積累。此外，MDA含量和LPO活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著高于急性缺氧應(yīng)激前的變化，這也證實(shí)了這一結(jié)論。MDA和LPO被用作脂質(zhì)過氧化的指標(biāo)，并且其增加的內(nèi)容指示缺氧應(yīng)激造成到魚體氧化損傷，影響魚的生理功能[83,84]。研究發(fā)現(xiàn)，一旦機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物累積超出負(fù)荷則會(huì)使抗氧化酶的活性出現(xiàn)降低或者是進(jìn)一步降解[85]。經(jīng)歷急性低氧軍曹魚幼魚MDA增加的同時(shí)SOD降低的?


本文編號(hào)：3605297