本研究旨在開發(fā)一種靈敏、準確、簡便的分子鑒定方法,實現(xiàn)對魚粉中原料魚組成的鑒定。采用cytb和16S rDNA 2對引物,分別對9種海、淡水魚和7種商品魚粉的基因組DNA進行擴增后發(fā)現(xiàn),cytb較16S rDNA引物可獲得良好的擴增效果,各樣品中均出現(xiàn)較清晰明亮的目的條帶。將cytb引物擴增魚粉基因組DNA得到的目的片段分別連接到克隆載體pMD19-T,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α感受態(tài)細胞后,挑取陽性克隆進行測序,將測序結(jié)果進行BlastN比對分析。結(jié)果顯示:在7種商品魚粉中共鑒定到33個魚類物種,主要包括鳀屬（Engraulis）、圓鲹屬（Decapterus）、沙丁魚屬（Sardina）、竹莢魚屬（Trachurus）、油鯡屬（Brevoortia）及羅非魚屬（Tilapia）的各種魚類,種類數(shù)量遠超產(chǎn)品標簽所示魚種范圍。為驗證該方法的可靠性,重復以上步驟,對2種添加已知魚種的自配魚粉進行了驗證性鑒定,鑒定結(jié)果與試驗設(shè)計吻合。綜上可知,基于cytb引物的分子鑒定技術(shù)可實現(xiàn)魚粉中原料魚組成的鑒定,鑒定結(jié)果將為魚粉質(zhì)量的準確判斷提供豐富信息。 

【文章來源】：動物營養(yǎng)學報. 2020,32(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【部分圖文】：

cytb和16S rDNA引物擴增魚類樣品的結(jié)果

cytb引物第1、2次擴增7種商業(yè)魚粉樣品的結(jié)果

將所有魚粉cytb引物的二次擴增產(chǎn)物純化回收、連接、轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)后，每個樣品從LB平板中隨機選擇30個單克隆，PCR鑒定后，分別獲得陽性克隆13～21個，陽性克隆率為43.3%～70.0%。將得到的陽性克隆進行測序和BlastN比對分析，確定樣品中原料魚的種類。圖4 cytb引物第1、2次擴增2種自配魚粉樣品的結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3595099