性腺抑制激素（Gonad inhibiting hormone，GIH）是甲殼動(dòng)物X器官竇腺復(fù)合體（XO-SG complexs）合成分泌的一種重要的神經(jīng)多肽激素，對雌性和雄性的性腺發(fā)育起抑制作用。本文以凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）為研究對象，利用SMARTer RACE技術(shù)克隆GIH的5’UTR（包含部分ORF），利用生物信息學(xué)對GIH序列和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析預(yù)測，通過免疫組化技術(shù)研究了GIH蛋白在眼柄中的表達(dá)和分布，用熒光定量PCR技術(shù)檢測了雌激素對GIH及眼柄激素對其它性腺發(fā)育相關(guān)基因（DMC1、VASA和VTG）表達(dá)的影響，主要結(jié)果如下：1. GIH基因的序列分析凡納濱對蝦GIH cDNA序列由865個(gè)核苷酸組成，其中5’端非編碼區(qū)（5’UTR）有56bp，3’UTR（包括poly（A））有521bp，開放閱讀框（ORF）有288bp，共編碼96個(gè)氨基酸（包括17個(gè)氨基酸信號(hào)肽）。同源比對與進(jìn)化關(guān)系顯示，凡納濱對蝦GIH與斑節(jié)對蝦GIH親緣關(guān)系最近，同源性高達(dá)94%，與刀額新對蝦同源性達(dá)63%，而與歐洲龍蝦、美洲鰲蝦、擬穴青蟹、青蝦和鼠婦等甲殼動(dòng)物GIH同... 

【文章來源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 甲殼動(dòng)物眼柄神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)概述
        1.1.1 X 器官竇腺復(fù)合體（XO-SG）顯微超微結(jié)構(gòu)
        1.1.2 X 器官竇腺復(fù)合體（XO-SG）內(nèi)的神經(jīng)多肽激素的類型、結(jié)構(gòu)以及功能
        1.1.3 眼柄神經(jīng)激素的合成及分泌方式
    1.2 眼柄中性腺抑制激素(GIH)的理化性質(zhì)及分布
        1.2.1 GIH 的理化性質(zhì)
        1.2.2 GIH 的分布
    1.3 外源激素對甲殼動(dòng)物的生殖調(diào)控
    1.4 甲殼動(dòng)物生殖相關(guān)基因
        1.4.1 DMC16
        1.4.2 VASA
        1.4.3 卵黃蛋白原（Vitellogenin，VTG）
    1.5 本研究的目的
2 凡納濱對蝦性腺抑制激素 GIH 5’UTR 的克隆及序列分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 凡納濱對蝦 GIH 基因 5’UTR 的克隆
        2.2.2 凡納濱對蝦 GIH 基因全長 cDNA 序列分析
    2.3 討論
3 GIH 在凡納濱對蝦眼柄中的定位
    3.1 材料方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Western-blot 檢測斑節(jié)對蝦的 GIH 抗體特異性
        3.2.2 凡納濱對蝦 GIH 在眼柄視神經(jīng)中的定位
    3.3 討論
4 雌二醇（17β-E2）對凡納濱對蝦 GIH 表達(dá)的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
        4.1.3 數(shù)據(jù)處理
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 凡納濱對蝦卵巢發(fā)育時(shí)期的組織學(xué)變化
        4.2.2 卵巢不同發(fā)育時(shí)期凡納濱對蝦眼柄中 GIH 的表達(dá)量
        4.2.3 17β-E2聯(lián)合雌激素受體拮抗物（TAM）在體注射對 GIH 表達(dá)的影響
        4.2.4 17β-E2對離體眼柄 GIH 表達(dá)的影響
    4.3 討論
5 摘除眼柄與注射眼柄激素對生殖相關(guān)基因的表達(dá)
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 摘除眼柄與注射眼柄激素對 DMC1 表達(dá)的影響
        5.2.2 摘除眼柄與注射眼柄激素對 VASA 表達(dá)的影響
        5.2.3 摘除眼柄與注射眼柄激素對 VTG 表達(dá)的影響
    5.3 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測凡納濱對蝦和羅氏沼蝦卵黃蛋白原mRNA在卵巢和肝胰腺中的表達(dá)[J]. 李媛媛,蔡生力,劉紅.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2012(11)
[2]眼柄粗提物對凡納濱對蝦性分化的影響[J]. 朱春華,趙光鳳,李廣麗.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(01)
[3]凡納濱對蝦促雄性腺的組織學(xué)初步觀察[J]. 趙光鳳,李廣麗,朱春華.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(06)
[4]Cloning,characterization,and expression analysis of the DEAD-box family genes,Fc-vasa and Fc-PL10a,in Chinese shrimp （Fenneropenaeus chinensis）[J]. 周倩如,邵明瑜,秦貞奎,康慶浩,張志峰.  Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2010(01)
[5]擬穴青蟹卵巢早期發(fā)育的組織學(xué)觀察[J]. 唐小林,沈琪,胡超群,張呂平.  海洋湖沼通報(bào). 2009(03)
[6]凡納濱對蝦性別分化的初步研究[J]. 趙光鳳,李廣麗,朱春華.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(03)
[7]Immunorecognition of estrogen and androgen receptors in the brain and thoracic ganglion mass of mud crab,Scylla paramamosain[J]. Haihui Ye*,Huiyang Huang,Shaojing Li,Guizhong Wang Department of Oceanography,Xiamen University,Xiamen 361005,China.  Progress in Natural Science. 2008(06)
[8]17α-羥基孕酮對性早熟中華絨螯蟹主要體征和卵巢發(fā)育影響的初步觀察[J]. 沈蓓杰,楊筱珍,吳旭干,常國亮,成永旭.  上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(03)
[9]卵黃蛋白原的發(fā)生、結(jié)構(gòu)及功能研究現(xiàn)狀[J]. 張年國,張穎,孫大江,曲秋芝.  水產(chǎn)學(xué)雜志. 2007(01)
[10]克氏原螯蝦X器官—竇腺復(fù)合體的組織學(xué)觀察[J]. 殷海成,張訓(xùn)蒲,龔世園.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(13)

博士論文
[1]中華絨螯蟹精巢組織cDNA文庫構(gòu)建和Dmcl基因的克隆與序列分析[D]. 張偉.華東師范大學(xué) 2012

碩士論文
[1]斑節(jié)對蝦幾種激素和基因與卵巢發(fā)育相關(guān)性的研究[D]. 周俊.上海海洋大學(xué) 2012
[2]凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）和羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）卵黃蛋白原mRNA合成部位的初步研究[D]. 李媛媛.上海海洋大學(xué) 2012
[3]凡納濱對蝦性腺抑制激素基因的克隆與表達(dá)[D]. 姜姝娜.廣東海洋大學(xué) 2011
[4]環(huán)境因子對凡納濱對蝦性別分化的影響[D]. 冉維亮.廣東海洋大學(xué) 2010
[5]中華絨螯蟹性腺抑制激素純化及其免疫定位的研究[D]. 馬奎.河北大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3592623