發(fā)布時間：2022-01-08 07:13

　　中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）即河蟹、大閘蟹,在我國淡水養(yǎng)殖業(yè)中占有相當(dāng)大的比重,能夠創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟(jì)價值。近年來,伴隨養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大、養(yǎng)殖密度迅速增加,中華絨螯蟹的患病幾率也大大增加,主要由細(xì)菌、病毒和寄生蟲引起。其中,中華絨螯蟹螺原體（Spiroplasma ericheiris）作為一種新型致病菌,能引發(fā)中華絨螯蟹患“顫抖病”,所造成的危害最為嚴(yán)重�；谇捌谥腥A絨螯蟹血細(xì)胞免疫蛋白組學(xué)篩選結(jié)果可知,轉(zhuǎn)鐵蛋白（EsTTF）以及鐵蛋白（EsFe1、EsFe2）在螺原體感染中華絨螯蟹后,在血細(xì)胞中的表達(dá)量發(fā)生顯著變化。此外,先前已有報(bào)道證實(shí)轉(zhuǎn)鐵蛋白和鐵蛋白曾參與了其他物種宿主的免疫反應(yīng)。綜上所述,我們推斷EsTF、EsFe1和EsFe2極有可能在中華絨螯蟹的免疫防御機(jī)制中發(fā)揮的重要的作用。本論文首先通過基因克隆及生物信息學(xué)分析的方法,對EsTF的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。其次,通過qRT-PCR的方法檢測外源補(bǔ)充鐵元素及螺原體刺激后EsTF、EsFe1和EsFe2的表達(dá)變化。依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們初步推斷這三個蛋白以及鐵元素可能在抵御螺原體侵染中華絨螯蟹的免疫反應(yīng)中發(fā)揮了作... 

【文章來源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．２?ＥｓＴＦ的ＴＲ＿ＦＥＲ結(jié)構(gòu)域示意圖

框（ＯｐｅｎＲｅａｄｉｎｇＦｒａｍｅ，ＯＲＦ），是一段能編碼７３０個氦基酸的多肽。結(jié)果顯示??３’端有含有６４６匕口的非翻譯區(qū)（１１１１的１１５１３１１〇１１比§１〇１１，１］�。暴栆约暗湫偷模癌枺毖景�??的尾巴，５’端則包含１３５ｂｐ的ＵＴＲ（圖２．１）。預(yù)測該蛋白質(zhì)分子量為７９．５９?ｋＤａ，??等電點(diǎn)為６．８７。ＳＭＡＲＴ網(wǎng)站預(yù)測該蛋白第２１到第３６９個以及第３７１到７０９個??氨基酸殘基均為ＴＲ＿ＦＥＲ結(jié)構(gòu)域（圖２．２）。??０?１００?２００?３００?４００?５００?６００?７００??圖２．２?ＥｓＴＦ的ＴＲ＿ＦＥＲ結(jié)構(gòu)域示意圖。??Ｆｉｇ．２．２?ＴＲ＿ＦＥＲ?ｄｏｍａｉｎ?ｏｆ?ＥｓＴＦ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｂｙ?ＳＭＡＲＴ．??２．３．３?ＥｓＴＦ基因編碼蛋白信號肽預(yù)測??通過Ｓｉｇｎａｌ?Ｐ在線軟件可知，ＥｓＴＦ蛋白的信號肽位于卜１９氨基酸，第２０??個氨基酸位點(diǎn)是信號肽剪切位點(diǎn)（圖２．３）。??９ｇｎａｌＰ－４．１?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（ｅｕｋｎｅｔｗｏｒｋｓ）：?Ｓｅｑｕｅｎｃｅ??￣?Ｃ－ｓｃｏｒｅ＇?￣??１０?■?，?Ｓｓｃｏｒｅ???？??一廣、?、?Ｙ－ｓｃｏｒｅ????０８?？?ｖ：?－??０．６?■?＇Ｊｉ?－??“?：??０２?？?－??０．０．ｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉｌｉｌｉｉｉｉｉｉ＿ｉｉＭｎｉｉＷＴＭｍＭ??ＭＲＡＶＦＬＣＶＳＶＡ?ＬＡ?Ａ?Ｓ?Ｌ?ＡＨＱＶＶ?ＲＬＣＶ?ＰＥＯＱＩＱＰＣＴ?ＥＵＬＲＤ?ＰＳＬＡＮＬＴ?ＶＯＣＶＳＧＰＤＲＹＱＣ?ＬＥＫＬＡＡＫＥＶＤＶ＾??０?１０?２０?３０?４

占３３．５６％?（藍(lán)色部分），延伸鏈占１３．７０°／。（紅色部分），隨機(jī)卷曲占５２．７４％?（紫??色部分）。在Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ蛋白整個多肽鏈中并沒有突出的？螺旋結(jié)構(gòu)，最主要??成分是隨機(jī)卷曲的結(jié)構(gòu)（圖２．４）。??０?ｉｅｅ?２ｅｅ?３ｅｅ?柳?ｓｅｅ?ｍ??圖２．４?ＥｓＴＦ氨基酸序列二級結(jié)構(gòu)預(yù)測??Ｆｉｇ．２．４?ＥｓＴＦ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｏｆ?ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ??２．３．５?ＥｓＴＦ基因序列同源性分析??通過ＤＮＡＭＡＮ多序列比對可以發(fā)現(xiàn)，ＥｓＴＦ的蛋白序列與美洲鱟（Ｚｉｗｗ／ｗ??／？〇細(xì)／ｚｅｗｗｓ）以及蚤狀潘（Ｄｏｐ／ｚｗ＇ａｐｗ／ａ：）序列的相似性在４０％以上，并且具有相??同的ＴＲ＿ＦＥＲ結(jié)構(gòu)域，說明該蛋白的在進(jìn)化中非常保守（圖２．５）。??２２??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3576121