目的研究蕪湖市鯽魚體腔寄生的間斷雙線絳蟲裂頭蚴的形態(tài)和分子特征及系統(tǒng)發(fā)育。方法于2019年在實(shí)驗(yàn)室對間斷雙線絳蟲裂頭蚴進(jìn)行光鏡和掃描電鏡的形態(tài)學(xué)觀察,并克隆擴(kuò)增其ITS、COI基因,進(jìn)一步對間斷雙線絳蟲裂頭蚴ITS和COI基因進(jìn)行同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果形態(tài)特征上,裂頭蚴頭部有一條凹槽,體表有橫皺紋,蟲體扁平帶狀且不分節(jié),肉質(zhì)肥厚呈乳白色�？寺U(kuò)增的ITS和COI基因序列長分別為1226 bp和409 bp,COI基因與間斷雙線絳蟲同源性最高并聚為一支,ITS基因與雙線絳蟲屬線蟲同源性最高并聚為一支。結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)的裂頭蚴為間斷雙線絳蟲裂頭蚴。 

【文章來源】：齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2020,41(11)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

圖1 雙線間斷絳蟲裂頭蚴的形態(tài)特征

成功擴(kuò)增出雙線絳蟲ITS、COI序列條帶,與預(yù)期目的片段長度相一致,經(jīng)克隆擴(kuò)增去掉引物后,ITS基因和COI基因序列大小分別為1226 bp(MN204040)和409 bp(MN219466)。見圖2。3.同源性和系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系分析:

GenBank上分別下載25條和15條絳蟲裂頭蚴的COI和ITS絳蟲序列(表2),將測序所得的雙線絳蟲裂頭蚴的COI和ITS與Genbank收錄的其他絳蟲的相應(yīng)序列進(jìn)行比較分析(圖3、圖4)�？芍狙芯康氖徍p線絳蟲裂頭蚴與其他絳蟲存在不同差異,其中COI與間斷雙線絳蟲(Digramma interrupta)(EU241311和MF671697)同源性最高,均為99.5%,變異度均為0.5%(圖3);ITS與雙線絳蟲(Digramma sp.)(AF354291)同源性最高,為99.7%。變異度為0.3%(圖4)。運(yùn)用MEGA 5.0構(gòu)建NJ系統(tǒng)進(jìn)化樹,并以細(xì)粒棘球絳蟲作為外群(圖5、圖6)。基于COI基因構(gòu)建種系發(fā)育樹中,裂頭科中各個屬基本各自構(gòu)成一個群,本株裂頭蚴與間斷雙線絳蟲法國分離株(EU241311)聚成一個單獨(dú)小分支,自展值為70%,也與間斷雙線絳蟲中國分離株(MF671697)聚在一支,與舌狀屬絳蟲分離株聚在一大支。基于ITS基因構(gòu)建種系發(fā)育樹中,本株裂頭蚴與雙線絳蟲(Digramma sp.)中國分離株(AF354292)聚成一小分支,自展值為93%,與間斷雙線絳蟲伊朗分離株(KC900986)聚為一大支,而雙線絳蟲伊朗分離株與舌狀絳蟲伊朗分離株聚在一支,所以推斷出裂頭蚴的ITS序列較為保守,但還是存在著國家或地區(qū)上的地理差異。結(jié)果表明,本研究發(fā)現(xiàn)的裂頭蚴為間斷雙線絳蟲裂頭蚴。從基因核苷酸序列同源性比對和兩個進(jìn)化樹的分支情況看,本研究鑒定的裂頭蚴(蕪湖)與雙線絳蟲裂頭蚴種屬親緣關(guān)系最近。圖4 間斷雙線絳蟲ITS與其他絳蟲同源基因核苷酸序列同源性比對

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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