墨吉明對蝦（Fenneropenaeus merguiensis）蛻皮抑制激素（molt-inhibiting hormone,MIH）,屬于甲殼動物高血糖激素（crustacean hyperglycemic hormone,CHH）家族神經(jīng)肽,由眼柄神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控中心X器官-竇腺復(fù)合體（X-organ-sinus-gland,XO-SG）合成分泌。蛻皮抑制激素和蛻皮類固醇激素（molting hormone,MH）相互拮抗而調(diào)控蛻皮活動,并且其在甲殼動物的生長、繁殖和滲透壓調(diào)節(jié)等一系列活動中發(fā)揮重要作用。近年來,隨著墨吉明對蝦遺傳育種工作的開展,因此對其生長、繁殖、蛻皮等相關(guān)基因的克隆、表達(dá)及功能研究意義重大。本研究利用RT-PCR和RACE技術(shù)首次克隆獲得墨吉明對蝦蛻皮抑制激素MIH1的cDNA、gDNA全長并對其進(jìn)行生物學(xué)特性描述;運(yùn)用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測了MIH1基因在墨吉明對蝦不同組織、不同蛻皮時期的表達(dá)分布;同時運(yùn)用原核重組表達(dá)技術(shù)成功獲得FmMIH1重組蛋白,注射FmMIH1重組蛋白和雙鏈對MIH1進(jìn)行功能研究。FmMIH1擁有二型眼柄神經(jīng)肽CHH/MIH/GIH... 

【文章來源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

眼柄神經(jīng)節(jié)示意圖

圖 1-2 甲殼動物 CHH 家族激素生理調(diào)控與功能模式圖Fig.1-2 Illustration of physiological regulation and function of CHH-family hormo近二十年來，甲殼動物神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)相關(guān)基因的克隆表達(dá)、功能及調(diào)控方研究一直是一個研究核心問題[15-17,26]。隨著生物科技技術(shù)的快速發(fā)展， CHH 家經(jīng)肽分離純化、基因克隆、功能及調(diào)控機(jī)制研究方面的實驗技術(shù)也不斷進(jìn)步，為步闡明其生理功能提供便利。

最終得到 827bp 大小的 FmMIH1 cDNA 全長序列(圖2-1)，包括 70 bp 的 5′- UTR、318 bp 的開放閱讀框(ORF)和 459 bp 的 3′- UTR。最終拼接的 FmMIH1 cDNA 經(jīng) BLASTX 分析發(fā)現(xiàn)與大多數(shù)十足目甲殼綱動物已知的 MIH1 序列具有較高的氨基酸序列一致性，其中與斑節(jié)對蝦和凡納濱對蝦的MIH1 核苷酸序列同源性最高為 86%。開放閱讀框(ORF) 共編碼 105 個氨基酸殘基，5′端帶有起始密碼子(ATG)，3′端有帶有終止密碼子(TGA)。SignalP 4.1 在線檢測推導(dǎo)的氨基酸序列發(fā)現(xiàn)信號肽切割位點在第29位的S和第30位的F之間，因此1~29位氨基酸殘基編碼FmMIH1信號肽，30~105位氨基酸殘基則編碼FmMIH1成熟肽。FmMIH1成熟肽第11位為甘氨酸殘基，并擁有 6 個

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同條件下副溶血弧菌對墨吉明對蝦致病性研究[J]. 趙吉臣,王毓勉,王剛,陳兆明,孫成波.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2015(32)
[2]豐南區(qū)南美白對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)存在的問題及發(fā)展對策[J]. 張玲,馬云聰,張玨,劉洪文,李飛.  河北漁業(yè). 2015(09)
[3]溫度和鹽度對墨吉明對蝦（Fenneropenaeus meiguiensis）生長與存活的聯(lián)合效應(yīng)[J]. 錢佳慧,栗志民,葉寧,劉建勇,胡志國,鄭開江.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2015(03)
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[10]微衛(wèi)星技術(shù)對黃、渤海海域7個不同地理群體中國對蝦的遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳分化研究[J]. 孟憲紅,孔杰,王清印,劉萍.  海洋水產(chǎn)研究. 2008(05)

碩士論文
[1]日本沼蝦性腺抑制激素免疫定位及莠去津處理對其表達(dá)量的影響[D]. 張鳳娟.河北大學(xué) 2015
[2]青蝦RNAi技術(shù)的研究及其在蛻皮抑制激素（MIH）基因功能研究中的應(yīng)用[D]. 江豐偉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]三疣梭子蟹和日本蟳的線粒體DNA序列比較分析及三疣梭子蟹蛻皮抑制激素基因的SNP位點篩選[D]. 高俊娜.中國海洋大學(xué) 2011
[4]中華絨螯蟹性腺抑制激素基因克隆[D]. 王穎.河北大學(xué) 2009



本文編號：3569919